公司產(chǎn)品僅用于科研
細(xì)胞生物學(xué)研究有以下幾個(gè)方面:
細(xì)胞生物學(xué)的研究內(nèi)容十分廣泛,主要包括:
①細(xì)胞核、染色體以及基因表達(dá)的研究;
②生物膜與細(xì)胞器的研究;
③細(xì)胞骨架體系的研究;
④細(xì)胞增殖及其調(diào)控;
⑤細(xì)胞分化及其調(diào)控;
⑥細(xì)胞的衰老與編程性死亡(凋亡);
⑦細(xì)胞的起源與進(jìn)化;
⑧細(xì)胞工程.
產(chǎn)品屬性:
中文名稱:線粒體電子傳遞抑制劑(Rotenone)
英文名稱:Rotenone
產(chǎn)品規(guī)格:1mL(10mM)|1g|5g
發(fā)貨周期:1~3天
商品介紹:
Rotenone是線粒體電子傳遞抑制劑,用于誘導(dǎo)建立帕金森癥狀的大鼠模型。 注:本品僅可用于科研實(shí)驗(yàn),嚴(yán)禁用于臨床醫(yī)療及其他用途! CAS號(hào):83-79-4 純度:98.0% 分子式:C??H??O? 分子量:394.42 儲(chǔ)存條件:-20℃,有效期2年,溶入溶劑后-20℃請盡量在一個(gè)月內(nèi)使用。 |
實(shí)驗(yàn)報(bào)告:
一、分離與培養(yǎng):
1、無菌條件下,取出1-3d 齡SD大鼠心房組織,然后用PBS將此組織塊清洗2次,最后將1mm3左右大?。?/span>
2、往組織塊中加入4 mL酶消化液(0.1% 和0.1% I型膠原酶),混懸10s,置37℃條件下消化10min,之后用滴管吹打制成單細(xì)胞懸液,自然沉淀并收集上清,用含10% FBS培養(yǎng)基終止消化后4℃放置;
3、剩下的組織再加入3~4mL酶消化液,混懸10s,置37℃消化10 min后,按上述方法收集上清并終止消化后4℃放置,重復(fù)此步驟2-3次,直至組織*被消化;
4、用200目不銹鋼篩網(wǎng)過濾細(xì)胞消化液,1200r/min 離心10min,棄去上清,沉淀細(xì)胞用含有10% FBS DMEM/F12培養(yǎng)基混懸,接種于25cm2培養(yǎng)瓶,放置于37℃ ,5%CO2 培養(yǎng)箱中培養(yǎng);
5、差速貼壁1h后,吸出培養(yǎng)基,按實(shí)驗(yàn)需要接種于6孔板中繼續(xù)培養(yǎng);
二、免疫熒光鑒定:
1、待心房肌細(xì)胞生長至80%融合時(shí),棄去培養(yǎng)基,用溫育的PBS沖洗細(xì)胞2次,每次10min,然后用4%多聚甲醛在室溫條件下固定細(xì)胞15min;
2、PBS沖洗細(xì)胞2次,每次10min,然后在4℃條件下,用0.1%Triton X-100透膜15min;
3、PBS沖洗細(xì)胞2次,每次10min,然后在室溫條件下,用4% BSA封閉細(xì)胞30min;
4、按1: 100的比例稀釋α-actin一抗,然后將其放在4℃冰箱中孵育細(xì)胞過夜;
5、PBS沖洗細(xì)胞3次,每次10min,按1:150的比例稀釋抗α-actin的二抗, 37℃條件下放置1h;
6、用PBS沖洗3次,每次10min,最后在倒置熒光顯微鏡下觀察圖像并拍照。
操作規(guī)程
1、在96孔板加入細(xì)胞100μL/孔,通常細(xì)胞增殖實(shí)驗(yàn)每孔加入100微升2000個(gè)細(xì)胞,細(xì)胞毒性實(shí)驗(yàn)每孔加入100微升5000~10000個(gè)細(xì)胞(具體每孔所用的細(xì)胞的數(shù)目,需根據(jù)細(xì)胞的大小,細(xì)胞增殖速度的快慢等決定)。置37℃ 5%CO2細(xì)胞培養(yǎng)箱培養(yǎng)24小時(shí).
2、.加入適當(dāng)濃度的0~10μL 受試化合物。
3、將96孔板在37℃,含5% CO2空氣及100%濕度的細(xì)胞培養(yǎng)箱中孵育適當(dāng)時(shí)間。
4、將5×MTT 用稀釋液稀釋成1× MTT 溶液。
5、每孔加50μL 1× MTT 溶液,在37℃孵育4小時(shí),使MTT 還原為甲臜。
6、吸出上清液,每孔加150μL DMSO 使甲臜溶解,用平板搖床搖勻。
7、酶標(biāo)儀在570nm 波長處檢測每孔的光密度(如無570nm 濾光片,可以使用560-600nm 的濾光片)。
8、結(jié)果分析
a、細(xì)胞的存活率:將各測試孔的OD 值減去本底OD 值(*培養(yǎng)基加MTT,無細(xì)胞)或空白藥物孔OD 值(*培養(yǎng)基加受試藥物的不同稀釋度加MTT,無細(xì)胞),各重復(fù)孔的OD 值取平均數(shù)±SD。細(xì)胞的存活率以T/C%表示,T 為加藥細(xì)胞的OD 值,C 為對照細(xì)胞的OD 值。細(xì)胞存活率% =(加藥細(xì)胞OD/對照細(xì)胞OD)×100
b、求出T/C = 50% 時(shí)的藥物濃度(IC50)及T/C = 10%時(shí)的藥物濃度(IC90)
鹽古桿菌黑色瘤相關(guān)抗原B3抗體Human NUCB2(Nucleobindin-2) ELISA Kit人抗人絨毛膜促性腺激抗體(AhCGAb)ELISA Kit
布魯氏菌 生物Ⅱ型鋅指蛋白801抗體Human RLN3(Relaxin-3) ELISA Kit人抗染色體抗體(anti-chromosome Ab)ELISA Kit
中性彎曲嗜菌NDUFS2抗體Human IL5RA(Interleukin-5 receptor) ELISA Kit人抗浦肯野抗體/抗Yo抗體(PCA-1/Yo)ELISA Kit
產(chǎn)朊假絲酵母NDUFAF4抗體Human S100A16(Protein S100-A16) ELISA Kit人抗平滑肌抗體(ASMA)ELISA Kit
黑木耳分化相關(guān)基因NDRG1抗體Human ELANE(Neutrophil elastase) ELISA Kit人抗皮膚抗體(ASA)ELISA Kit
中慢生華癸根瘤菌神經(jīng)降壓抗體Human RRM1(Ribonucleoside-diphosphate reductase large subunit) ELISA Kit人抗凝血抗體(aPT1/aPT2)ELISA Kit
殺鮭氣單胞菌核受體輔助抑制因子2抗體Human PSG3(Pregnancy-specific beta-1-glycoprotein 3) ELISA Kit人抗凝血受體(ATR)ELISA Kit
黃色短桿菌核仁磷蛋白抗體Human IL5RA(Interleukin-5 receptor) ELISA Kit人抗凝血III(AT III)ELISA Kit
大腸埃希氏菌嗜中性粒胞漿因子4抗體Human NUCB2(Nucleobindin-2) ELISA Kit人抗凝血Ⅲ抗體(AT-Ⅲ)ELISA Kit
蘑菇輪枝孢磷化核因子NF-κB p65抗體Human S100A16(Protein S100-A16) ELISA Kit人抗凝血Ⅲ(ATⅢ)ELISA Kit
*勝利油田熱微球菌磷化一氧化氮合成3(內(nèi)皮型)抗體Human RLN3(Relaxin-3) ELISA Kit人抗釀酒酵母抗體(ASCA)ELISA Kit
黑曲霉核抑制蛋白磷1抗體Human FABP4(Fatty acid-binding protein, adipocyte) ELISA Kit人抗內(nèi)因子抗體(IFA)ELISA Kit
異配囊接霉NCK銜接蛋白1抗體Human IL9(Interleukin-9) ELISA Kit人抗內(nèi)皮抗體(AECA)ELISA Kit
熱帶鹽水孢菌α-中連蛋白抗體Human RRM1(Ribonucleoside-diphosphate reductase large subunit) ELISA Kit人抗腦組織抗體(ABAb)ELISA Kit
大腸桿菌核受體Rev-Erbα抗體Human LAMA1(Laminin subunit alpha-1) ELISA Kit人抗苗勒管激(AMH)ELISA Kit
Wautersiella falsenii性受體NK-p44抗體Human PDGFRA(Alpha-type plaet-derived growth factor receptor) ELISA Kit人抗麥膠蛋白/麥溶蛋白抗體(AGA)ELISA Kit
副溶血弧菌Vibrio│parahaemolyticus 質(zhì)量規(guī)格:BR,4000u/g落新婦苷
假交替單胞菌Pseudoalteromonas│tetraodonis 質(zhì)量規(guī)格:BR,100 U/mg羅通定
鹽單胞菌Halomonas│sp. 質(zhì)量規(guī)格:BR,75U/MG鹽基葡萄糖
線粒體電子傳遞抑制劑(Rotenone)FOXJ1/HFH-4 叉頭蛋白J1抗體氧鹽鹽 98%
FoxP1 叉頭蛋白P1抗體甜菜,無水 98%
FOXM1/HFH 11 叉頭蛋白M1抗體甜菜,一水 99%
FoxP3 叉頭蛋白P3抗體甜菜鹽鹽 99.5%
FOXO1 叉頭蛋白O1抗體酰酮鈹 97%
Phospho-FoxO1 (Thr24)/FoxO3a (Thr32) 化叉頭蛋白家族抗體酰酮鈷(II) 97%
Phospho-FoxO1 (Ser319) 化叉頭蛋白家族1抗體酰酮銅 97%
Phospho-FoxO1 (Ser256) 化叉頭蛋白家族1抗體酰酮鎘 98%