商品介紹:
WIN55,212-2Mesylate是一種有效的cannabinoid receptor激動(dòng)劑,對(duì)人重組CB1和CB2受體的Ki值分別為62.3和3.3nM。 注:本品僅可用于科研實(shí)驗(yàn),嚴(yán)禁用于臨床醫(yī)療及其他用途! CAS號(hào):131543-23-2 別名:(R)-(+)-WIN 55212 純度:98.98% 分子式:C??H??N?O?S 分子量:522.61 儲(chǔ)存條件:-20℃,有效期2年,溶入溶劑后-20℃請(qǐng)盡量在一個(gè)月內(nèi)使用。 |
以下是細(xì)胞生物學(xué)試劑的詳細(xì)介紹:
操作步驟:
1. 樣品染色
1) 將Binding Buffer(10×)稀釋成1×Binding buffer工作液備用(1ml Binding Buffer(10×)需加入9ml無(wú)菌去離子水)。
2) 對(duì)于懸浮細(xì)胞,500-1000g離心5min收集細(xì)胞。
對(duì)于貼壁細(xì)胞,要用不含EDTA的胰酶消化細(xì)胞,胰酶消化時(shí)間不宜過(guò)長(zhǎng)或過(guò)短,最好是在輕輕吹打可以使貼壁細(xì)胞吹打下來(lái)時(shí),加入細(xì)胞培養(yǎng)液,將細(xì)胞輕輕吹打下來(lái),轉(zhuǎn)移到離心管內(nèi),500-1000g離心5min收集細(xì)胞。
3) 收集細(xì)胞后,加入預(yù)冷PBS溶液輕搖或用移液器輕柔吹打洗滌,離心收集細(xì)胞,共洗滌兩次。
4) 在細(xì)胞沉淀中加入1×Binding buffer工作液,重懸細(xì)胞,使細(xì)胞濃度達(dá)到1×106 cell/ml。
5) 吸取100μl細(xì)胞懸液(細(xì)胞總數(shù)為1×105 cell)至一新管中,加入5μl Annexin V-FITC和5-10 μl PI,輕輕混勻,室溫避光孵育15min。
2. 樣品檢測(cè)
1) 流式細(xì)胞儀檢測(cè):
染色孵育后,每管加入400μl 1×Binding Buffer工作液,混勻后使用流式細(xì)胞儀檢測(cè)(1小時(shí)內(nèi)檢測(cè))。
建議設(shè)置經(jīng)凋亡誘導(dǎo)的正常細(xì)胞、PI單染和Annexin V-FITC單染3個(gè)對(duì)照組,正常細(xì)胞組可作為熒光補(bǔ)償調(diào)節(jié)去除光譜重疊和設(shè)定十字門的位置。結(jié)果可用CellQuest等軟件進(jìn)行分析,繪制雙色散點(diǎn)圖(two-color dot plot),F(xiàn)ITC為橫坐標(biāo),PI為縱坐標(biāo)。Annexin V-FITC和PI聯(lián)合使用時(shí),活細(xì)胞僅有很低強(qiáng)度的背景熒光,早期凋亡細(xì)胞僅有較強(qiáng)的綠色熒光,晚期凋亡細(xì)胞有綠色和紅色雙重?zé)晒狻?/span>
2) 熒光顯微鏡檢測(cè):
染色孵育后涂片,顯微鏡下觀察。使用熒光顯微鏡上的藍(lán)光和綠光通道分別觀察FITC和PI。被Annexin V-FITC結(jié)合的細(xì)胞顯示漿膜上有綠色光環(huán)。喪失細(xì)胞膜完整性的細(xì)胞,細(xì)胞核顯示紅色,膜上有綠色光環(huán)。
公司產(chǎn)品僅用于科研細(xì)胞培養(yǎng)操作規(guī)程:
一.培養(yǎng)基及培養(yǎng)凍存條件準(zhǔn)備:
1)準(zhǔn)備RPMI-1640培養(yǎng)基(RPMI-1640:GIBCO),90%;優(yōu)質(zhì)胎牛血清,10%。
2)培養(yǎng)條件: 氣相:空氣,95%;二氧化碳,5%。 溫度:37℃,培養(yǎng)箱濕度為70%-80%。
3)凍存液:90%血清,10%DMSO,現(xiàn)用現(xiàn)配,液氮儲(chǔ)存。
二.細(xì)胞處理:
1)復(fù)蘇細(xì)胞:將含有1mL細(xì)胞懸液的凍存管迅速放入37℃水浴中(水面要低于凍存管蓋部)搖晃解凍,移入事先準(zhǔn)備好的含有4mL培養(yǎng)基的15ml離心管中混合均勻。在1000RPM條件下離心4分鐘,棄去上清液,加入1mL培養(yǎng)基后吹勻。然后將所有細(xì)胞懸液移入含有5ml培養(yǎng)基的培養(yǎng)瓶中培養(yǎng)過(guò)夜。第二天換液并檢查細(xì)胞密度。
2)細(xì)胞傳代:如果細(xì)胞密度達(dá)80%-90%,即可進(jìn)行傳代培養(yǎng)。
對(duì)于懸浮細(xì)胞,傳代可參考以下方法:
方法一:收集細(xì)胞,1000RPM,常溫條件下離心5分鐘,棄去上清液,補(bǔ)加1-2mL培養(yǎng)液后吹勻,將細(xì)胞懸液按1:2到1:5的比例分到新的含8ml培養(yǎng)基的新皿中或者瓶中。
膠韌革菌(榆耳,榆蘑)磷化絲裂原活化的蛋白激p38β抗體Human KLF13(Krueppel-like factor 13) ELISA Kit人抗心磷脂抗體IgG(ACA-IgG)ELISA Kit
異常漢遜酵母磷化自噬微管相關(guān)蛋白輕鏈3抗體Human MYH9(Myosin-9) ELISA Kit人抗心磷脂抗體IgA(ACA-IgA)ELISA Kit
聚多曲霉粘蛋白-5B抗體Human AMSH(alpha-MSH) ELISA Kit人抗心肌抗體(AMA)ELISA Kit
矩圓黑盤孢粘蛋白-3抗體Human KLF14(Krueppel-like factor 14) ELISA Kit人抗小鼠抗體(HAMA)ELISA Kit
馬克斯克魯維酵母雞馬立克氏病火雞皰疹病抗體Human THBS4(Thrombospondin-4) ELISA Kit人抗線粒體抗體M2亞型(AMA-M2)ELISA Kit
三骨菇多藥耐藥蛋白/P-糖蛋白抗體(C端)Human CRHR2(Corticotropin-releasing factor receptor 2) ELISA Kit人抗線粒體抗體(AMA)ELISA Kit
雜色曲霉甲硝唑抗體Human IL17RB(Interleukin-17 receptor B) ELISA Kit人抗膜DNA抗體(cmDNA)ELISA Kit
中華芽孢桿菌黑色瘤相關(guān)抗原4抗體Human GPT(Alanine aminotransferase 1) ELISA Kit人抗胃壁抗體(AGPA/PCA)ELISA Kit
枯草芽孢桿菌鈣結(jié)合蛋白39抗體Human VGF(Neurosecretory protein VGF) ELISA Kit人抗網(wǎng)硬蛋白抗體(ARA)ELISA Kit
山楂生葉點(diǎn)霉線粒體抗病信號(hào)MAVS蛋白抗體Human GALNS(N-acetylgalactosamine-6-sulfatase) ELISA Kit人抗唾液腺導(dǎo)管組織抗體(SDA)ELISA Kit
巴氏醋桿菌巨噬集落激因子受體抗體Human FBLN5(Fibulin-5) ELISA Kit人抗脫氧核糖核蛋白抗體(DNP-Ab)ELISA Kit
產(chǎn)短桿菌腫瘤轉(zhuǎn)移相關(guān)蛋白1抗體Human MUC21(Mucin-21) ELISA Kit人抗突觸前膜抗體(PsmAb)ELISA Kit
葡紫紅菇粘蛋白4抗體Human SERPINA6(Corticosteroid-binding globulin) ELISA Kit人抗突變型瓜波形蛋白抗體(MCV)ELISA Kit
紫紅曲霉三聚抗體Human NR1H2(Oxysterols receptor LXR-beta) ELISA Kit人抗突變型瓜波形蛋白抗體(anti-MCV Ab)ELISA Kit
凍土毛霉原變型磷化雷帕霉靶蛋白抗體Human UBR4(E3 ubiquitin-protein ligase UBR4) ELISA Kit人抗透明帶抗體(aZP)ELISA Kit
三隔鐮刀菌黑皮質(zhì)-1受體抗體Human CRYAB(Alpha-crystallin B chain) ELISA Kit人抗天然脫氧核糖核抗體(n-DNA-Ab)ELISA Kit
美澳型核果褐腐病菌Monilinia│fructicola (G. Winter) Honey 質(zhì)量規(guī)格:≥90%,進(jìn)分木犀草
香菇Lentinula│edodes 質(zhì)量規(guī)格:≥99%,BR雷公藤內(nèi)酯
: =AS1.365=AS1.0365資源名稱: 大腸埃希氏菌 質(zhì)量規(guī)格:3萬(wàn)U/g雷公藤紅
cannabinoid receptor激動(dòng)劑FLG(filaggrin) 絲聚蛋白/中間絲蛋白抗體百里香酚藍(lán) IND
FLIP S/L 凋亡調(diào)節(jié)因之一抗體百里香酚藍(lán) ACS reagent, 95 %
FLIPS 凋亡調(diào)節(jié)因之一抗體(短型)百里香酚酞 indicator
FLT-3/CD135 FMS樣酪氨激3香草 AR,99%
Phospho-FLT3 (Tyr591) 化FMS樣酪氨激3瑞氏色 BS
Phospho-FLT3 (Tyr589/591) 化FMS樣酪氨激3瑞氏色 高純級(jí),>97%(HPLC),用于血液和生物學(xué)染色
Phospho-FLT3 (Tyr842) 化FMS樣酪氨激3二酚橙 AR
Phospho-FLT3 (Tyr969) 化FMS樣酪氨激3二酚橙 高純級(jí)