AdipoR激動(dòng)劑(AdipoRon)公司正在出售的產(chǎn)品：Anti-GPNMB/Osteoactivin/FITC 熒光素標(biāo)記GPNMB抗體IgGMulti-class antibodies規(guī)格： 0.2ml
Anti-Phospho-MAPKAPK2 (Thr334)/FITC 熒光素標(biāo)記磷酸化原活化蛋白激酶活化的蛋白激酶2抗體IgGMulti-class antibodies規(guī)格： 0.2ml

以下是細(xì)胞生物學(xué)試劑的詳細(xì)介紹：

 

公司產(chǎn)品僅用于科研細(xì)胞培養(yǎng)操作規(guī)程：

一．培養(yǎng)基及培養(yǎng)凍存條件準(zhǔn)備：

1）準(zhǔn)備RPMI-1640培養(yǎng)基(RPMI-1640：GIBCO)，90%；優(yōu)質(zhì)胎牛血清，10%。

2）培養(yǎng)條件： 氣相：空氣，95%；二氧化碳，5%。 溫度：37℃，培養(yǎng)箱濕度為70%-80%。

3）凍存液：90%血清，10%DMSO，現(xiàn)用現(xiàn)配，液氮儲(chǔ)存。

二．細(xì)胞處理：

1）復(fù)蘇細(xì)胞：將含有1mL細(xì)胞懸液的凍存管迅速放入37℃水浴中（水面要低于凍存管蓋部）搖晃解凍，移入事先準(zhǔn)備好的含有4mL培養(yǎng)基的15ml離心管中混合均勻。在1000RPM條件下離心4分鐘，棄去上清液，加入1mL培養(yǎng)基后吹勻。然后將所有細(xì)胞懸液移入含有5ml培養(yǎng)基的培養(yǎng)瓶中培養(yǎng)過(guò)夜。第二天換液并檢查細(xì)胞密度。

2）細(xì)胞傳代：如果細(xì)胞密度達(dá)80%-90%，即可進(jìn)行傳代培養(yǎng)。

對(duì)于懸浮細(xì)胞，傳代可參考以下方法：

方法一：收集細(xì)胞，1000RPM，常溫條件下離心5分鐘，棄去上清液，補(bǔ)加1-2mL培養(yǎng)液后吹勻，將細(xì)胞懸液按1：2到1：5的比例分到新的含8ml培養(yǎng)基的新皿中或者瓶中。
商品介紹：

操作步驟：

1. 樣品染色

1) 將Binding Buffer（10×）稀釋成1×Binding buffer工作液備用（1ml Binding Buffer（10×）需加入9ml無(wú)菌去離子水）。

2) 對(duì)于懸浮細(xì)胞，500-1000g離心5min收集細(xì)胞。

對(duì)于貼壁細(xì)胞，要用不含EDTA的胰酶消化細(xì)胞，胰酶消化時(shí)間不宜過(guò)長(zhǎng)或過(guò)短，最好是在輕輕吹打可以使貼壁細(xì)胞吹打下來(lái)時(shí)，加入細(xì)胞培養(yǎng)液，將細(xì)胞輕輕吹打下來(lái)，轉(zhuǎn)移到離心管內(nèi)，500-1000g離心5min收集細(xì)胞。

3) 收集細(xì)胞后，加入預(yù)冷PBS溶液輕搖或用移液器輕柔吹打洗滌，離心收集細(xì)胞，共洗滌兩次。

4) 在細(xì)胞沉淀中加入1×Binding buffer工作液，重懸細(xì)胞，使細(xì)胞濃度達(dá)到1×106 cell/ml。

5) 吸取100μl細(xì)胞懸液（細(xì)胞總數(shù)為1×105 cell）至一新管中，加入5μl Annexin V-FITC和5-10 μl PI，輕輕混勻，室溫避光孵育15min。

2. 樣品檢測(cè)

1) 流式細(xì)胞儀檢測(cè)：

染色孵育后，每管加入400μl 1×Binding Buffer工作液，混勻后使用流式細(xì)胞儀檢測(cè)（1小時(shí)內(nèi)檢測(cè)）。

建議設(shè)置經(jīng)凋亡誘導(dǎo)的正常細(xì)胞、PI單染和Annexin V-FITC單染3個(gè)對(duì)照組，正常細(xì)胞組可作為熒光補(bǔ)償調(diào)節(jié)去除光譜重疊和設(shè)定十字門的位置。結(jié)果可用CellQuest等軟件進(jìn)行分析，繪制雙色散點(diǎn)圖（two-color dot plot），F(xiàn)ITC為橫坐標(biāo)，PI為縱坐標(biāo)。Annexin V-FITC和PI聯(lián)合使用時(shí)，活細(xì)胞僅有很低強(qiáng)度的背景熒光，早期凋亡細(xì)胞僅有較強(qiáng)的綠色熒光，晚期凋亡細(xì)胞有綠色和紅色雙重?zé)晒狻?/span>

2) 熒光顯微鏡檢測(cè)：

染色孵育后涂片，顯微鏡下觀察。使用熒光顯微鏡上的藍(lán)光和綠光通道分別觀察FITC和PI。被Annexin V-FITC結(jié)合的細(xì)胞顯示漿膜上有綠色光環(huán)。喪失細(xì)胞膜完整性的細(xì)胞，細(xì)胞核顯示紅色，膜上有綠色光環(huán)。

異常威克漢姆酵母磷化絲裂原活化蛋白激ERK抗體Human JUN(Transcription factor AP-1) ELISA Kit犬血栓調(diào)節(jié)蛋白(TM)免疫試劑盒

石面單胞菌屬CD312抗體Human NHLH2 (Helix-loop-helix protein 2) ELISA KIT犬血清淀粉樣蛋白A2(SAA2)免疫試劑盒

野野村氏菌屬eIF4E結(jié)合蛋白抗體Human COQ3 (Ubiquinone biosynthesis O-methyltransferase, mitochondrial) ELISA KIT犬血清淀粉樣蛋白A(SAA)免疫試劑盒

谷棒桿菌磷化表皮生長(zhǎng)因子受體抗體Human RBBP4 (Histone-binding protein RBBP4) ELISA KIT犬血管性血友病因子/瑞斯托霉輔因子(VWF)免疫試劑盒

堆肥鞘桿菌磷化表皮生長(zhǎng)因子受體抗體Human HN1L (Hematological and neurological expressed 1-like protein) ELISA KIT犬血管緊張轉(zhuǎn)化2(ACE2)免疫試劑盒

堅(jiān)強(qiáng)芽孢桿菌肝配蛋白A1受體抗體Human OTX1 (Homeobox protein OTX1) ELISA KIT犬血管緊張轉(zhuǎn)化(ACE)免疫試劑盒

根瘤菌真核翻譯起始因子2C2抗體Human HCST (Hematopoietic cell signal transducer) ELISA KIT犬血管緊張Ⅱ(ANG-Ⅱ)免疫試劑盒

蘇云金芽孢桿菌眼睛發(fā)育缺失蛋白EYA2抗體Human HORMAD2 (HORMA domain-containing protein 2) ELISA KIT犬血管緊張1-7(Ang1-7)免疫試劑盒

枯草芽孢桿菌EYA4蛋白抗體Human GMPR2 (GMP reductase 2) ELISA KIT犬胸腺肽α1(Thymosin α1)免疫試劑盒

三葉草根瘤菌血清反應(yīng)因子輔助蛋白1抗體Human GADD45G (Growth arrest and DNA damage-inducible protein GADD45 gamma) ELISA KIT犬胸腺基質(zhì)淋巴生成(TSLP)免疫試劑盒

紫孢側(cè)耳（美味側(cè)耳）吞噬運(yùn)動(dòng)蛋白2抗體Human PIGR(Polymeric Immunoglobulin Receptor/Membrane Secretory Component) ELISA Kit犬胸腺活化調(diào)節(jié)趨化因子(TARC/CCL17)免疫試劑盒

枯草芽孢桿菌紅膜條帶4.1蛋白抗體Human HARBI1 (Putative nuclease HARBI1) ELISA KIT犬心型脂肪結(jié)合蛋白(h-FABP)免疫試劑盒

pQE31磷化紅生成受體抗體Human COLGALT2 (Procollagen galactosyltransferase 2) ELISA KIT犬心肌特異性肌鈣蛋白T(c)免疫試劑盒

毛殼轉(zhuǎn)錄調(diào)節(jié)因子E2F7抗體Human HAND1 (Heart- and neural crest derivatives-expressed protein 1) ELISA KIT犬心肌肌鈣蛋白Ⅰ(cTn-Ⅰ)免疫試劑盒

小鼠小短桿菌膠質(zhì)谷運(yùn)載蛋白4抗體Human HAND2 (Heart- and neural crest derivatives-expressed protein 2) ELISA KIT犬纖溶原激活物抑制劑1(SERPINE1)免疫試劑盒

巴斯德畢赤酵母erbB3結(jié)合蛋白1抗體Human GRTP1 (Growth hormone-regulated TBC protein 1) ELISA KIT犬細(xì)小病(PV)抗體(IgG)免疫試劑盒

腸膜狀明串珠菌Leuconostoc│mesenteroides 質(zhì)量規(guī)格：鹽野靛堿

皺紋假單胞菌Pseudomonas│corrugata 質(zhì)量規(guī)格：濕楊芽黃

大腸埃希氏菌Escherichia│coli 質(zhì)量規(guī)格：干鴉膽子D
AdipoR激動(dòng)劑(AdipoRon)卡維?。?biāo)準(zhǔn)品）英文名稱： Moxonidine 原癌基因蛋白/活化蛋白1抗體包裝25g

克拉霉（標(biāo)準(zhǔn)品）英文名稱： Moxonidine 死亡活化蛋白抗體包裝5g

克拉維英文名稱： Nepafenac角蛋白19抗體包裝100g

克林霉磷酯(標(biāo)準(zhǔn)品)英文名稱： Nepafenac角蛋白2抗體包裝25g

克霉唑(標(biāo)準(zhǔn)品)英文名稱： Nicarbazin 角蛋白4抗體包裝500g

喹乙;喹酰（標(biāo)準(zhǔn)品）英文名稱： Nimustine HCl(ACNU)色b245輕鏈抗體包裝1g

醌式利福平（標(biāo)準(zhǔn)品）英文名稱： NVP-BEZ 2355號(hào)染色體開放閱讀框44抗體包裝5g

拉呋替?。?biāo)準(zhǔn)品）英文名稱： Pemirolast potassium心臟特異性絲蛋白抗體包裝5g

拉米夫定(標(biāo)準(zhǔn)品)英文名稱： Perindopril erbumine胞漿型磷脂A2抗體包裝1g

拉米夫定（標(biāo)準(zhǔn)品）英文名稱： phenylbutazone周期及凋亡調(diào)節(jié)蛋白1抗體包裝5g

拉莫三 （標(biāo)準(zhǔn)品）英文名稱： phenylbutazone神經(jīng)粘附分子1抗體包裝1g

拉西地平（標(biāo)準(zhǔn)品）英文名稱： phenylbutazone Calcium緊密連接蛋白5抗體包裝1g

來(lái)米特（標(biāo)準(zhǔn)品）英文名稱： phenylbutazone Sodium富含半胱運(yùn)動(dòng)神經(jīng)元蛋白1抗體包裝1g

來(lái)米特雜質(zhì)I（4-三）（標(biāo)準(zhǔn)品）英文名稱： Pirfenidone角蛋白5+6抗體包裝5g

來(lái)米特雜質(zhì)Ⅱ（標(biāo)準(zhǔn)品）英文名稱： Pirfenidonec-Myc tag標(biāo)簽抗體包裝1g