商品介紹:
TTPU是可溶性環(huán)氧化物水解酶(sEH)抑制劑,對猴子和人類的IC50值分別為37和3.7nM。 注:本品僅可用于科研實驗,嚴(yán)禁用于臨床醫(yī)療及其他用途! CAS號:1222780-33-7 純度:98.07% 分子量:359.34 儲存條件:-20℃,有效期2年,溶入溶劑后-20℃請盡量在一個月內(nèi)使用。 |
產(chǎn)品屬性:
中文名稱:sEH抑制劑(TPPU)
英文名稱:TPPU
產(chǎn)品規(guī)格:1mL(10mM)|5mg|10mg|25mg|50mg|100mg
發(fā)貨周期:1~3天
公司產(chǎn)品僅用于科研
細(xì)胞生物學(xué)研究有以下幾個方面:
細(xì)胞生物學(xué)的研究內(nèi)容十分廣泛,主要包括:
①細(xì)胞核、染色體以及基因表達(dá)的研究;
②生物膜與細(xì)胞器的研究;
③細(xì)胞骨架體系的研究;
④細(xì)胞增殖及其調(diào)控;
⑤細(xì)胞分化及其調(diào)控;
⑥細(xì)胞的衰老與編程性死亡(凋亡);
⑦細(xì)胞的起源與進(jìn)化;
⑧細(xì)胞工程.
實驗報告:
一、分離與培養(yǎng):
1、無菌條件下,取出1-3d 齡SD大鼠心房組織,然后用PBS將此組織塊清洗2次,最后將1mm3左右大小;
2、往組織塊中加入4 mL酶消化液(0.1% 和0.1% I型膠原酶),混懸10s,置37℃條件下消化10min,之后用滴管吹打制成單細(xì)胞懸液,自然沉淀并收集上清,用含10% FBS培養(yǎng)基終止消化后4℃放置;
3、剩下的組織再加入3~4mL酶消化液,混懸10s,置37℃消化10 min后,按上述方法收集上清并終止消化后4℃放置,重復(fù)此步驟2-3次,直至組織*被消化;
4、用200目不銹鋼篩網(wǎng)過濾細(xì)胞消化液,1200r/min 離心10min,棄去上清,沉淀細(xì)胞用含有10% FBS DMEM/F12培養(yǎng)基混懸,接種于25cm2培養(yǎng)瓶,放置于37℃ ,5%CO2 培養(yǎng)箱中培養(yǎng);
5、差速貼壁1h后,吸出培養(yǎng)基,按實驗需要接種于6孔板中繼續(xù)培養(yǎng);
二、免疫熒光鑒定:
1、待心房肌細(xì)胞生長至80%融合時,棄去培養(yǎng)基,用溫育的PBS沖洗細(xì)胞2次,每次10min,然后用4%多聚甲醛在室溫條件下固定細(xì)胞15min;
2、PBS沖洗細(xì)胞2次,每次10min,然后在4℃條件下,用0.1%Triton X-100透膜15min;
3、PBS沖洗細(xì)胞2次,每次10min,然后在室溫條件下,用4% BSA封閉細(xì)胞30min;
4、按1: 100的比例稀釋α-actin一抗,然后將其放在4℃冰箱中孵育細(xì)胞過夜;
5、PBS沖洗細(xì)胞3次,每次10min,按1:150的比例稀釋抗α-actin的二抗, 37℃條件下放置1h;
6、用PBS沖洗3次,每次10min,最后在倒置熒光顯微鏡下觀察圖像并拍照。
操作規(guī)程
1、在96孔板加入細(xì)胞100μL/孔,通常細(xì)胞增殖實驗每孔加入100微升2000個細(xì)胞,細(xì)胞毒性實驗每孔加入100微升5000~10000個細(xì)胞(具體每孔所用的細(xì)胞的數(shù)目,需根據(jù)細(xì)胞的大小,細(xì)胞增殖速度的快慢等決定)。置37℃ 5%CO2細(xì)胞培養(yǎng)箱培養(yǎng)24小時.
2、.加入適當(dāng)濃度的0~10μL 受試化合物。
3、將96孔板在37℃,含5% CO2空氣及100%濕度的細(xì)胞培養(yǎng)箱中孵育適當(dāng)時間。
4、將5×MTT 用稀釋液稀釋成1× MTT 溶液。
5、每孔加50μL 1× MTT 溶液,在37℃孵育4小時,使MTT 還原為甲臜。
6、吸出上清液,每孔加150μL DMSO 使甲臜溶解,用平板搖床搖勻。
7、酶標(biāo)儀在570nm 波長處檢測每孔的光密度(如無570nm 濾光片,可以使用560-600nm 的濾光片)。
8、結(jié)果分析
a、細(xì)胞的存活率:將各測試孔的OD 值減去本底OD 值(*培養(yǎng)基加MTT,無細(xì)胞)或空白藥物孔OD 值(*培養(yǎng)基加受試藥物的不同稀釋度加MTT,無細(xì)胞),各重復(fù)孔的OD 值取平均數(shù)±SD。細(xì)胞的存活率以T/C%表示,T 為加藥細(xì)胞的OD 值,C 為對照細(xì)胞的OD 值。細(xì)胞存活率% =(加藥細(xì)胞OD/對照細(xì)胞OD)×100
b、求出T/C = 50% 時的藥物濃度(IC50)及T/C = 10%時的藥物濃度(IC90)
孟氏假單胞菌CD36抗體Human Pro-MMP-1(pro-Matrix Metalloproteinase 1) ELISA Kit人髓鞘相關(guān)糖蛋白(MAG)免疫試劑盒
畢赤酵母固合成CYP11B2抗體Human pNF-H(Phosphorylated Neurofilament H) ELISA Kit人髓鞘堿性蛋白抗體(MBP antibody)免疫試劑盒
漢遜德巴利酵母7號染色體開放閱讀框16抗體Human PP(Pepsin) ELISA Kit人髓鞘蛋白P0(MPZ)免疫試劑盒
香矛假單胞菌10號染色體開放閱讀框62抗體Human PPAR-α(Peroxisome ProlifeRator Activated Receptor Alpha) ELISA Kit人髓磷脂堿性蛋白(MBP)免疫試劑盒
大豆慢生根瘤菌胃癌多藥耐藥相關(guān)蛋白Human PP13(Placental Protein13) ELISA Kit人髓磷脂P2蛋白(PMP2)免疫試劑盒
亮白曲霉酪蛋白激casein kinase Iα抗體Human PPAR-γ(Peroxisome ProlifeRator Activated Receptor Gamma) ELISA Kit人髓過氧化物特異性抗中性粒胞質(zhì)抗體IgG(MPO-ANCA IgG)免疫試劑盒
米曲霉磷化酪蛋白激casein kinase Iα抗體Human Pro-MMP-10(Pro-Matrix Metalloproteinase 10) ELISA Kit人髓過氧化物(MPO)免疫試劑盒
干草寒冷桿菌磷化酪蛋白激casein kinase Iα抗體Human PPP1R1A(Protein Phosphatase 1 Regulatory Subunit A) ELISA Kit人性鐵蛋白(AIF)免疫試劑盒
Sinomonas flave肌動蛋白調(diào)節(jié)蛋白CAPG抗體Human PPOX(Protoporphyrinogen Oxidase) ELISA Kit人性神經(jīng)鞘磷脂(ASM)免疫試劑盒
蘇云金芽孢桿菌Ⅰ型膠原/1型膠原a1抗體Human PPAR-α(Peroxisome ProlifeRator Activated Receptor Alpha) ELISA Kit人性磷(ACP)免疫試劑盒
假諾卡氏菌Ⅲ型膠原蛋白/膠原蛋白3/3型膠原蛋白抗體Human PRB1(Basic Salivary Proline Rich Protein 1) ELISA Kit人性富亮核磷蛋白32家族成員E(ANP32E)免疫試劑盒
地衣芽孢桿菌CD96抗體Human PPP1R1A(Protein Phosphatase 1 Regulatory Subunit A) ELISA Kit人性成纖維生長因子(aFGF/FGF-1)免疫試劑盒
平菇貓眼綜合征染色體候選基因2抗體Human PPAR-γ(Peroxisome ProlifeRator Activated Receptor Gamma) ELISA Kit人四氫生物蝶呤(BH4)免疫試劑盒
釀酒酵母1號染色體開放閱讀框146抗體Human PK2(Prokineticin 2) ELISA Kit人四連接(CLEC3B)免疫試劑盒
枯草芽孢桿菌1號染色體開放閱讀框150抗體Human PPOX(Protoporphyrinogen Oxidase) ELISA Kit人死亡相關(guān)蛋白1(DAP/DAP1)免疫試劑盒
黑曲霉1號染色體開放閱讀框156抗體Human PK(Pyruvate Kinase, Liver And RBC) ELISA Kit人絲裂原活化蛋白激激6(MKK6)免疫試劑盒
大腸埃希氏菌Escherichia│coli 質(zhì)量規(guī)格:>98%,BRCD5分子試劑盒二羥茶堿E
麥斑點附球霉Epicoccum│tritici Henn. 質(zhì)量規(guī)格:>98%,BRCD4分子試劑盒二氫麻醉椒苫
普勞瑟爾氏菌Prauserella│sp. 質(zhì)量規(guī)格:>98%,BRCD45分子試劑盒二氫醉椒
sEH抑制劑(TPPU)蛋白質(zhì)磷1G抗體(PP2Cγ)包裝25g
6磷果糖激1抗體包裝5g
枯草溶菌轉(zhuǎn)化1抑制劑抗體包裝100g
枯草溶菌轉(zhuǎn)化1抑制劑抗體包裝25g
蛋白質(zhì)磷2調(diào)節(jié)亞基5C/PP2A-B56-γ抗體包裝100g
蛋白質(zhì)磷2調(diào)節(jié)亞基5D/PP2A-B56-δ抗體包裝25g
磷化絲/蘇抗體包裝500g
ATP鈣離子轉(zhuǎn)運(yùn)蛋白PMCA3抗體包裝100g
PUM1蛋白抗體包裝25g
核糖核結(jié)合蛋白1抗體包裝5g
神經(jīng)叢蛋白B2抗體包裝100ml
磷化p53結(jié)合蛋白1抗體包裝25ml
PDZ結(jié)構(gòu)域蛋白GOPC抗體包裝100g
轉(zhuǎn)錄因子Pax6抗體包裝500g
多型性腺瘤基因樣蛋白1抗體包裝1g