產(chǎn)品屬性:
中文名稱:p38MAPK抑制劑(SB-681323)
英文名稱:SB-681323
產(chǎn)品規(guī)格:1mL(10mM)|1mg|5mg|10mg|20mg
發(fā)貨周期:1~3天
公司產(chǎn)品僅用于科研
商品介紹:
SB-681323是有效的p38MAPK抑制劑,能夠有效抑制慢性阻塞性肺病引起的炎癥。 注:本品僅可用于科研實(shí)驗(yàn),嚴(yán)禁用于臨床醫(yī)療及其他用途! CAS號(hào):444606-18-2 別名:Dilmapimod;GW 681323 純度:99.56% 分子量:456.42 儲(chǔ)存條件:-20℃,有效期2年,溶入溶劑后-20℃請(qǐng)盡量在一個(gè)月內(nèi)使用。 |
細(xì)胞生物學(xué)研究有以下幾個(gè)方面:
細(xì)胞生物學(xué)的研究?jī)?nèi)容十分廣泛,主要包括:
①細(xì)胞核、染色體以及基因表達(dá)的研究;
②生物膜與細(xì)胞器的研究;
③細(xì)胞骨架體系的研究;
④細(xì)胞增殖及其調(diào)控;
⑤細(xì)胞分化及其調(diào)控;
⑥細(xì)胞的衰老與編程性死亡(凋亡);
⑦細(xì)胞的起源與進(jìn)化;
⑧細(xì)胞工程.
實(shí)驗(yàn)報(bào)告:
一、分離與培養(yǎng):
1、無(wú)菌條件下,取出1-3d 齡SD大鼠心房組織,然后用PBS將此組織塊清洗2次,最后將1mm3左右大?。?/span>
2、往組織塊中加入4 mL酶消化液(0.1% 和0.1% I型膠原酶),混懸10s,置37℃條件下消化10min,之后用滴管吹打制成單細(xì)胞懸液,自然沉淀并收集上清,用含10% FBS培養(yǎng)基終止消化后4℃放置;
3、剩下的組織再加入3~4mL酶消化液,混懸10s,置37℃消化10 min后,按上述方法收集上清并終止消化后4℃放置,重復(fù)此步驟2-3次,直至組織*被消化;
4、用200目不銹鋼篩網(wǎng)過(guò)濾細(xì)胞消化液,1200r/min 離心10min,棄去上清,沉淀細(xì)胞用含有10% FBS DMEM/F12培養(yǎng)基混懸,接種于25cm2培養(yǎng)瓶,放置于37℃ ,5%CO2 培養(yǎng)箱中培養(yǎng);
5、差速貼壁1h后,吸出培養(yǎng)基,按實(shí)驗(yàn)需要接種于6孔板中繼續(xù)培養(yǎng);
二、免疫熒光鑒定:
1、待心房肌細(xì)胞生長(zhǎng)至80%融合時(shí),棄去培養(yǎng)基,用溫育的PBS沖洗細(xì)胞2次,每次10min,然后用4%多聚甲醛在室溫條件下固定細(xì)胞15min;
2、PBS沖洗細(xì)胞2次,每次10min,然后在4℃條件下,用0.1%Triton X-100透膜15min;
3、PBS沖洗細(xì)胞2次,每次10min,然后在室溫條件下,用4% BSA封閉細(xì)胞30min;
4、按1: 100的比例稀釋?duì)?actin一抗,然后將其放在4℃冰箱中孵育細(xì)胞過(guò)夜;
5、PBS沖洗細(xì)胞3次,每次10min,按1:150的比例稀釋抗α-actin的二抗, 37℃條件下放置1h;
6、用PBS沖洗3次,每次10min,最后在倒置熒光顯微鏡下觀察圖像并拍照。
新城疫病Cappuccino蛋白抗體Human VLDL(Very low-density lipoprotein) ELISA Kit人甘肽硫轉(zhuǎn)移pi基因(GSTpi)免疫試劑盒
黃桿菌前列腺過(guò)氧化物合成3抗體Human EN2(Homeobox protein engrailed-2) ELISA Kit人甘肽還原(GR)免疫試劑盒
大腸埃希菌補(bǔ)體因子H相關(guān)蛋白1抗體Human NFKBIB(NF-kappa-B inhibitor beta) ELISA Kit人甘肽過(guò)氧化(GSH-Px)免疫試劑盒
米根霉羧肽CPN2抗體Human HPN(Serine protease hepsin) ELISA Kit人谷甘肽S轉(zhuǎn)移TT(GSTπ)免疫試劑盒
金針菇(黃)鈣/鈣調(diào)依賴蛋白激2D(CaMKIIδ)Human Rock-2(Rho Associated Coiled Coil Containing Protein Kinase 2) ELISA Kit人谷甘肽(GSH)免疫試劑盒
大腸埃希菌胞漿-5′-核苷-Ⅱ抗體Human CALU(Calumenin) ELISA Kit人谷酰轉(zhuǎn)移6抗體(IgM)免疫試劑盒
pCMV-GlucCD86抗體Human NTN1(Netrin-1) ELISA Kit人谷酰轉(zhuǎn)移2抗體(IgG)免疫試劑盒
圍小叢殼菌周期依賴性激1抗體Human APOA5(Apolipoprotein A-V) ELISA Kit人谷酰轉(zhuǎn)移2抗體(IgA)免疫試劑盒
粉色小菇周期依賴性激2抗體Human PRSS1(Trypsin-1) ELISA Kit人谷脫羧自身抗體IgM(GAD-Ab-IgM)免疫試劑盒
楚科奇??凭S爾氏菌周期依賴性激4抗體Human NTN4(Netrin-4) ELISA Kit人谷脫羧自身抗體IgG(GAD-Ab-IgG)免疫試劑盒
豬鏈球菌II型周期依賴性激5抗體Human NTN1(Netrin-1) ELISA Kit人谷脫羧65(GAD65)抗體(IgG)免疫試劑盒
未定德研所菌1號(hào)染色體開放閱讀框200抗體Human PRSS1(Trypsin-1) ELISA Kit人谷脫羧65(GAD65)免疫試劑盒
黑腐皮殼屬6號(hào)染色體開放閱讀框223抗體Human APOA5(Apolipoprotein A-V) ELISA Kit人谷脫羧(GAD)免疫試劑盒
弗氏檸檬桿菌纖維抗體Human NMU(Neuromedin-U) ELISA Kit人谷受體(NMDAR)免疫試劑盒
釀酒酵母C型凝集4家族E抗體Human NTN4(Netrin-4) ELISA Kit人谷谷草轉(zhuǎn)2,線粒體(谷草轉(zhuǎn)2)(GOT2)免疫試劑盒
淺玫瑰鏈霉菌蕈堿型乙酰受體抗體Human IL2RB(Interleukin-2 receptor subunit beta) ELISA Kit人谷-半胱連接調(diào)節(jié)亞基(GCLM)免疫試劑盒
球孢白僵菌Beauveria│bassiana (Bals.-Criv.) Vuill. 質(zhì)量規(guī)格:分析標(biāo)準(zhǔn)品3,5-二-O-咖啡??鼘?/span>
蠟狀芽孢桿菌Bacillus│cereus 質(zhì)量規(guī)格:分析標(biāo)準(zhǔn)品蟛蜞菊內(nèi)酯
鏈霉菌屬菌種Streptomyces│sp. 質(zhì)量規(guī)格:分析標(biāo)準(zhǔn)品乙酰纈草三酯
p38MAPK抑制劑(SB-681323)骨成型蛋白7(BMP-7)檢測(cè)試劑盒英文名稱:BMP-7 ELISA Kit聚集蛋白抗體包裝100g
骨成型蛋白4(BMP-4)檢測(cè)試劑盒英文名稱:BMP-4 ELISA Kit轉(zhuǎn)錄因子AP2α+β抗體包裝25g
骨成型蛋白2(BMP-2)檢測(cè)試劑盒英文名稱:BMP-2 ELISA Kit磷化腺瘤樣息肉抗體包裝5g
骨成型蛋白15(BMP-15)檢測(cè)試劑盒英文名稱:BMP-15 ELISA Kit磷化周期末期促進(jìn)復(fù)合蛋白APC1抗體包裝25g
骨保(OPG)檢測(cè)試劑盒英文名稱:OPG ELISA Kit周期后期促進(jìn)蛋白亞基10抗體包裝5g
骨保護(hù)配體(OPGL)檢測(cè)試劑盒英文名稱:OPGL ELISA Kit周期后期促進(jìn)蛋白亞基11抗體包裝25g
骨保護(hù)(OPG)檢測(cè)試劑盒英文名稱:OPG ELISA Kit腺瘤性結(jié)腸息肉病蛋白2抗體包裝5g
甘肽過(guò)氧化(GSH-Px)檢測(cè)試劑盒英文名稱:GSH-Px ELISA Kit磷化分裂周期蛋白16抗體包裝1g
谷脫羧自身抗體IgM(GAD-Ab-IgM)檢測(cè)試劑盒英文名稱:GAD-Ab-IgM ELISA KitDNA修復(fù)相互作用蛋白抗體包裝5g
谷脫羧自身抗體IgG(GAD-Ab-IgG)檢測(cè)試劑盒英文名稱:GAD-Ab-IgG ELISA Kit脂肪膜相關(guān)蛋白抗體包裝1g
谷脫羧自身抗體(GAD-Ab)檢測(cè)試劑盒英文名稱:GAD-Ab ELISA Kit載脂蛋白A1結(jié)合蛋白抗體抗體包裝25g
谷脫氫(GDH/GLDH)檢測(cè)試劑盒英文名稱:GDH/GLDH ELISA Kit載脂蛋白B-mRNA編輯復(fù)合物1抗體包裝5g
孤腓肽(OFQ/N)檢測(cè)試劑盒英文名稱:OFQ/N ELISA Kit載脂蛋白B-mRNA編輯復(fù)合物2抗體包裝1g
鉤端螺旋體IgG(Lep IgG)檢測(cè)試劑盒英文名稱:Lep IgG ELISA Kit載脂蛋白B-mRNA編輯復(fù)合物3B抗體包裝1g
睪(Testoterone)檢測(cè)試劑盒英文名稱:Testoterone ELISA Kit載脂蛋白B-mRNA編輯復(fù)合物3C抗體包裝5g
操作規(guī)程
1、在96孔板加入細(xì)胞100μL/孔,通常細(xì)胞增殖實(shí)驗(yàn)每孔加入100微升2000個(gè)細(xì)胞,細(xì)胞毒性實(shí)驗(yàn)每孔加入100微升5000~10000個(gè)細(xì)胞(具體每孔所用的細(xì)胞的數(shù)目,需根據(jù)細(xì)胞的大小,細(xì)胞增殖速度的快慢等決定)。置37℃ 5%CO2細(xì)胞培養(yǎng)箱培養(yǎng)24小時(shí).
2、.加入適當(dāng)濃度的0~10μL 受試化合物。
3、將96孔板在37℃,含5% CO2空氣及100%濕度的細(xì)胞培養(yǎng)箱中孵育適當(dāng)時(shí)間。
4、將5×MTT 用稀釋液稀釋成1× MTT 溶液。
5、每孔加50μL 1× MTT 溶液,在37℃孵育4小時(shí),使MTT 還原為甲臜。
6、吸出上清液,每孔加150μL DMSO 使甲臜溶解,用平板搖床搖勻。
7、酶標(biāo)儀在570nm 波長(zhǎng)處檢測(cè)每孔的光密度(如無(wú)570nm 濾光片,可以使用560-600nm 的濾光片)。
8、結(jié)果分析
a、細(xì)胞的存活率:將各測(cè)試孔的OD 值減去本底OD 值(*培養(yǎng)基加MTT,無(wú)細(xì)胞)或空白藥物孔OD 值(*培養(yǎng)基加受試藥物的不同稀釋度加MTT,無(wú)細(xì)胞),各重復(fù)孔的OD 值取平均數(shù)±SD。細(xì)胞的存活率以T/C%表示,T 為加藥細(xì)胞的OD 值,C 為對(duì)照細(xì)胞的OD 值。細(xì)胞存活率% =(加藥細(xì)胞OD/對(duì)照細(xì)胞OD)×100
b、求出T/C = 50% 時(shí)的藥物濃度(IC50)及T/C = 10%時(shí)的藥物濃度(IC90)