以下是細(xì)胞生物學(xué)試劑的詳細(xì)介紹:
中文名稱 | 英文名稱 | 產(chǎn)品規(guī)格 | 發(fā)貨周期 |
CSF1R抑制劑(Ki20227) | Ki20227 | 1mL(10mM)|2mg|5mg|10mg|50mg | 1~3天 |
商品介紹:
Ki-20227是CSF1R抑制劑,IC50為2nM,對VEGFR2的IC50為12nM,對c-Kit/PDGFRβ的IC50則為451/217nM。 注:本品僅可用于科研實(shí)驗(yàn),嚴(yán)禁用于臨床醫(yī)療及其他用途! CAS號(hào):623142-96-1 純度:99.45% 分子量:480.54 儲(chǔ)存條件:-20℃,有效期2年,溶入溶劑后-20℃請盡量在一個(gè)月內(nèi)使用。 |
公司產(chǎn)品僅用于科研細(xì)胞培養(yǎng)操作規(guī)程:
一.培養(yǎng)基及培養(yǎng)凍存條件準(zhǔn)備:
1)準(zhǔn)備RPMI-1640培養(yǎng)基(RPMI-1640:GIBCO),90%;優(yōu)質(zhì)胎牛血清,10%。
2)培養(yǎng)條件: 氣相:空氣,95%;二氧化碳,5%。 溫度:37℃,培養(yǎng)箱濕度為70%-80%。
3)凍存液:90%血清,10%DMSO,現(xiàn)用現(xiàn)配,液氮儲(chǔ)存。
二.細(xì)胞處理:
1)復(fù)蘇細(xì)胞:將含有1mL細(xì)胞懸液的凍存管迅速放入37℃水浴中(水面要低于凍存管蓋部)搖晃解凍,移入事先準(zhǔn)備好的含有4mL培養(yǎng)基的15ml離心管中混合均勻。在1000RPM條件下離心4分鐘,棄去上清液,加入1mL培養(yǎng)基后吹勻。然后將所有細(xì)胞懸液移入含有5ml培養(yǎng)基的培養(yǎng)瓶中培養(yǎng)過夜。第二天換液并檢查細(xì)胞密度。
2)細(xì)胞傳代:如果細(xì)胞密度達(dá)80%-90%,即可進(jìn)行傳代培養(yǎng)。
對于懸浮細(xì)胞,傳代可參考以下方法:
方法一:收集細(xì)胞,1000RPM,常溫條件下離心5分鐘,棄去上清液,補(bǔ)加1-2mL培養(yǎng)液后吹勻,將細(xì)胞懸液按1:2到1:5的比例分到新的含8ml培養(yǎng)基的新皿中或者瓶中。
操作步驟:
1. 樣品染色
1) 將Binding Buffer(10×)稀釋成1×Binding buffer工作液備用(1ml Binding Buffer(10×)需加入9ml無菌去離子水)。
2) 對于懸浮細(xì)胞,500-1000g離心5min收集細(xì)胞。
對于貼壁細(xì)胞,要用不含EDTA的胰酶消化細(xì)胞,胰酶消化時(shí)間不宜過長或過短,最好是在輕輕吹打可以使貼壁細(xì)胞吹打下來時(shí),加入細(xì)胞培養(yǎng)液,將細(xì)胞輕輕吹打下來,轉(zhuǎn)移到離心管內(nèi),500-1000g離心5min收集細(xì)胞。
3) 收集細(xì)胞后,加入預(yù)冷PBS溶液輕搖或用移液器輕柔吹打洗滌,離心收集細(xì)胞,共洗滌兩次。
4) 在細(xì)胞沉淀中加入1×Binding buffer工作液,重懸細(xì)胞,使細(xì)胞濃度達(dá)到1×106 cell/ml。
5) 吸取100μl細(xì)胞懸液(細(xì)胞總數(shù)為1×105 cell)至一新管中,加入5μl Annexin V-FITC和5-10 μl PI,輕輕混勻,室溫避光孵育15min。
2. 樣品檢測
1) 流式細(xì)胞儀檢測:
染色孵育后,每管加入400μl 1×Binding Buffer工作液,混勻后使用流式細(xì)胞儀檢測(1小時(shí)內(nèi)檢測)。
建議設(shè)置經(jīng)凋亡誘導(dǎo)的正常細(xì)胞、PI單染和Annexin V-FITC單染3個(gè)對照組,正常細(xì)胞組可作為熒光補(bǔ)償調(diào)節(jié)去除光譜重疊和設(shè)定十字門的位置。結(jié)果可用CellQuest等軟件進(jìn)行分析,繪制雙色散點(diǎn)圖(two-color dot plot),F(xiàn)ITC為橫坐標(biāo),PI為縱坐標(biāo)。Annexin V-FITC和PI聯(lián)合使用時(shí),活細(xì)胞僅有很低強(qiáng)度的背景熒光,早期凋亡細(xì)胞僅有較強(qiáng)的綠色熒光,晚期凋亡細(xì)胞有綠色和紅色雙重?zé)晒狻?/span>
2) 熒光顯微鏡檢測:
染色孵育后涂片,顯微鏡下觀察。使用熒光顯微鏡上的藍(lán)光和綠光通道分別觀察FITC和PI。被Annexin V-FITC結(jié)合的細(xì)胞顯示漿膜上有綠色光環(huán)。喪失細(xì)胞膜完整性的細(xì)胞,細(xì)胞核顯示紅色,膜上有綠色光環(huán)。
耐冷類諾卡氏菌鈣/鈣調(diào)依賴蛋白激2α抗體Human ERGIC1 ELISA Kit兔子白介3(IL-3)免疫試劑盒
紅細(xì)菌屬周期蛋白結(jié)合蛋白抗體Human EPS15R ELISA Kit兔子白介2(IL-2)免疫試劑盒
球孢白僵菌分裂周期蛋白2抗體Human ERGIC2 ELISA Kit兔子白介1可溶性受體I (IL-1sR Ⅰ)免疫試劑盒
酪丁梭菌DNA分裂周期調(diào)控蛋白45抗體Human ERBB3 ELISA Kit兔子白介1β (IL-1β)免疫試劑盒
橄欖產(chǎn)色鏈霉菌染色體相關(guān)蛋白H抗體Human ERBB4(Receptor tyrosine-protein kinase erbB-4) ELISA Kit兔子白介1α(IL-1α)免疫試劑盒
簡青霉中心體蛋白質(zhì)76抗體Human EPB41L2 ELISA Kit兔子白介18(IL-18)免疫試劑盒
Streptococcus sanguinis中心體蛋白152抗體Human ERC1 ELISA Kit兔子白介13(IL-13)免疫試劑盒
異常威克漢姆酵母酪蛋白激1γ2/casein kinase Iγ1抗體Human EPB41L3 ELISA Kit兔子白介11(IL-11)免疫試劑盒
山東糖多孢菌唇裂和腭裂相關(guān)跨膜蛋白1抗體Human EPHA6 ELISA Kit兔子白介10(IL-10)免疫試劑盒
水稻腸桿菌趨化樣因子超家族成員8抗體Human EPHA7 ELISA Kit兔子白介1(IL-1)免疫試劑盒
擬康氏木霉趨化樣因子超家族成員1抗體Human EPHX2 ELISA Kit兔子γ干擾(IFN-γ)免疫試劑盒
梭菌神經(jīng)蠟樣質(zhì)脂褐質(zhì)沉積病蛋白CLN6抗體Human EPHA8 ELISA Kit兔子β血小板球蛋白/β血栓環(huán)蛋白(β-TG)免疫試劑盒
腦膜膿性金黃桿菌甘結(jié)合蛋白抗體Human EFNB1(Ephrin B1) ELISA Kit兔子β連環(huán)蛋白/聯(lián)蛋白(β-Cat)免疫試劑盒
異常漢遜酵母異常變種多巴D1受體相互作用蛋白抗體Human EPN3 ELISA Kit兔子β4整合(ITG β4/CD104)免疫試劑盒
鏈格孢 蘋果?;?/span>Capicua蛋白抗體Human EPRS ELISA Kit兔子α干擾(IFN-α)免疫試劑盒
釀酒酵母碳酐6抗體Human EPS15R ELISA Kit兔子α2抗纖溶(α2-AP)免疫試劑盒
黑曲霉Aspergillus│niger 質(zhì)量規(guī)格:>98%,BRSyndecan-1/CD138試劑盒麥冬皂苷C
門多薩假單胞菌Pseudomonas│mendocina 質(zhì)量規(guī)格:>98%,BRSWI/SNF相關(guān), 基質(zhì)關(guān)聯(lián),肌動(dòng)蛋白依賴染色質(zhì)調(diào)控因子,亞家族c,成員1試劑盒麥冬皂苷A
糙皮側(cè)耳(平菇)Pleurotus│ostreatus 質(zhì)量規(guī)格:>98%,BRSTEAP家族成員4試劑盒馬兜鈴內(nèi)酰
CSF1R抑制劑(Ki20227)阿曲汀/英文名稱: 5-Isopropyl-2-methylphenol同源盒蛋白HOXB13抗體包裝5g
阿瑞吡坦;阿瑞匹坦英文名稱: METHYL HEPTADECANOATE磷化3磷肌依賴性蛋白激1抗體包裝1g
阿替洛爾英文名稱: 2α,5α-Epoxy-1,2-dihydroakuammilan-17-oic acid methyl ester磷化P63腫瘤抑制基因抗體包裝25g
阿托伐醌,阿托喹英文名稱: 6-HYDROXY-7-METHOXYCOUMARIN磷化p21激活激4抗體包裝5g
阿西美辛英文名稱: PIEFELTARRAENIN A磷化P73腫瘤抑制基因抗體包裝100g
埃索美拉唑鎂(三)英文名稱: Tomatidine磷化DNA修復(fù)蛋白NBS1抗體包裝25g
艾地醌英文名稱: (-)-CAMPHORp53正向凋亡調(diào)控因子抗體包裝5g
艾普拉唑/奧普拉唑英文名稱: 3-ACETYL-11-KETO-BETA-BOSWELLIC ACID磷脂C1樣蛋白抗體包裝25g
安替比林英文名稱: 3',4',5',5,7-PENTAMETHOXYFLAVONE前列腺癌和結(jié)腸癌相關(guān)蛋白包裝1g
蝶啶英文名稱: OrangeΙΙ重組蛋白G抗體包裝250mg
芬鈉英文名稱: AURAMINE O 磷脂酰肌激催化亞單位A抗體包裝1g
基比林英文名稱: Carmine蛋白質(zhì)二硫鍵異構(gòu)抗體包裝250mg
己烯英文名稱: Acid Red 51足特異蛋白抗體包裝25g
環(huán)英文名稱: Acid Red 73腫瘤抑制基因抗體(野生型P53)包裝100g
奧達(dá)唑英文名稱: Lauric acid配對盒基因7抗體包裝25g