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詳細介紹
商品介紹：
SYTO 綠色活細胞核酸染料( Ex/Em: 500/530 nm, bound to DNA)是一種具有細胞膜透性的核酸染料，其在于核酸結(jié)合之后熒光強度會得到顯著增強。SYTO 綠色活細胞核酸染料可以用于染死的或者活的真核細胞的RNA 和DNA，在革蘭氏細菌中同樣也適用。新型SYTO 綠色活細胞核酸染料具有如下重要特性： 細胞膜透性，可以穿過幾乎所有的細胞膜，包括哺乳動物細胞和細菌。 摩爾吸光系數(shù)高，可見吸收光譜消光系數(shù)> 60,000 cm-1M - 1。 極低的熒光背景，未與核酸結(jié)合時，染料的量子產(chǎn)率通常<0.01。 與核酸結(jié)合之后，量子產(chǎn)率通常> 0.4。 SYTO 綠色活細胞核酸染料可以在不同的實驗應(yīng)用中染活細胞或者固定細胞的核酸，能夠與配備了常規(guī)激光激發(fā)器或?qū)拵д彰鞴庠吹母鞣N熒光檢測設(shè)備匹配。 儲存：-20℃，避光，有效期6個月。 |
以下是細胞生物學(xué)試劑的詳細介紹：
中文名稱 | 英文名稱 | 產(chǎn)品規(guī)格 | 發(fā)貨周期 |
500μL | 1～3天 |
操作步驟：
1. 樣品染色
1) 將Binding Buffer（10×）稀釋成1×Binding buffer工作液備用（1ml Binding Buffer（10×）需加入9ml無菌去離子水）。
2) 對于懸浮細胞，500-1000g離心5min收集細胞。
對于貼壁細胞，要用不含EDTA的胰酶消化細胞，胰酶消化時間不宜過長或過短，最好是在輕輕吹打可以使貼壁細胞吹打下來時，加入細胞培養(yǎng)液，將細胞輕輕吹打下來，轉(zhuǎn)移到離心管內(nèi)，500-1000g離心5min收集細胞。
3) 收集細胞后，加入預(yù)冷PBS溶液輕搖或用移液器輕柔吹打洗滌，離心收集細胞，共洗滌兩次。
4) 在細胞沉淀中加入1×Binding buffer工作液，重懸細胞，使細胞濃度達到1×106 cell/ml。
5) 吸取100μl細胞懸液（細胞總數(shù)為1×105 cell）至一新管中，加入5μl Annexin V-FITC和5-10 μl PI，輕輕混勻，室溫避光孵育15min。
2. 樣品檢測
1) 流式細胞儀檢測：
染色孵育后，每管加入400μl 1×Binding Buffer工作液，混勻后使用流式細胞儀檢測（1小時內(nèi)檢測）。
建議設(shè)置經(jīng)凋亡誘導(dǎo)的正常細胞、PI單染和Annexin V-FITC單染3個對照組，正常細胞組可作為熒光補償調(diào)節(jié)去除光譜重疊和設(shè)定十字門的位置。結(jié)果可用CellQuest等軟件進行分析，繪制雙色散點圖（two-color dot plot），F(xiàn)ITC為橫坐標(biāo)，PI為縱坐標(biāo)。Annexin V-FITC和PI聯(lián)合使用時，活細胞僅有很低強度的背景熒光，早期凋亡細胞僅有較強的綠色熒光，晚期凋亡細胞有綠色和紅色雙重?zé)晒狻?/span>
2) 熒光顯微鏡檢測：
染色孵育后涂片，顯微鏡下觀察。使用熒光顯微鏡上的藍光和綠光通道分別觀察FITC和PI。被Annexin V-FITC結(jié)合的細胞顯示漿膜上有綠色光環(huán)。喪失細胞膜完整性的細胞，細胞核顯示紅色，膜上有綠色光環(huán)。
公司產(chǎn)品僅用于科研細胞培養(yǎng)操作規(guī)程：
一．培養(yǎng)基及培養(yǎng)凍存條件準(zhǔn)備：
1）準(zhǔn)備RPMI-1640培養(yǎng)基(RPMI-1640：GIBCO)，90%；優(yōu)質(zhì)胎牛血清，10%。
2）培養(yǎng)條件： 氣相：空氣，95%；二氧化碳，5%。 溫度：37℃，培養(yǎng)箱濕度為70%-80%。
3）凍存液：90%血清，10%DMSO，現(xiàn)用現(xiàn)配，液氮儲存。
二．細胞處理：
1）復(fù)蘇細胞：將含有1mL細胞懸液的凍存管迅速放入37℃水浴中（水面要低于凍存管蓋部）搖晃解凍，移入事先準(zhǔn)備好的含有4mL培養(yǎng)基的15ml離心管中混合均勻。在1000RPM條件下離心4分鐘，棄去上清液，加入1mL培養(yǎng)基后吹勻。然后將所有細胞懸液移入含有5ml培養(yǎng)基的培養(yǎng)瓶中培養(yǎng)過夜。第二天換液并檢查細胞密度。
2）細胞傳代：如果細胞密度達80%-90%，即可進行傳代培養(yǎng)。
對于懸浮細胞，傳代可參考以下方法：
方法一：收集細胞，1000RPM，常溫條件下離心5分鐘，棄去上清液，補加1-2mL培養(yǎng)液后吹勻，將細胞懸液按1：2到1：5的比例分到新的含8ml培養(yǎng)基的新皿中或者瓶中。
酰次烏頭原堿（標(biāo)準(zhǔn)品）英文名稱： Myokinase癌基因ERG3抗體包裝1g
?；昝仔?/span>O英文名稱： Phosphodiesterase II from Bovine Spleen豬源產(chǎn)腸性大腸桿菌K88-K99抗體包裝25g
酰芍藥苷(標(biāo)準(zhǔn)品)英文名稱： SuccinimideFAS凋亡抑制分子3抗體包裝5g
酰烏頭原堿（標(biāo)準(zhǔn)品）英文名稱： 5-Bromouridine纖維束1抗體包裝25g
酰新烏頭原堿（標(biāo)準(zhǔn)品）英文名稱： ADA buffer, disodium salt叉頭蛋白P3抗體包裝5g
酰氧化芍藥苷英文名稱： Albumin, from bovine Protease free免疫球蛋白G Fc段受體I包裝1g
比靈,右旋荷包牡丹堿（標(biāo)準(zhǔn)品）英文名稱： Aluminum stearate叉頭蛋白M1抗體包裝5g
蓽茇（標(biāo)準(zhǔn)品）英文名稱： Bismuth(III) nitrate pentahydrate磷化雷帕霉靶蛋白抗體包裝500ml
蓽澄茄（標(biāo)準(zhǔn)品）英文名稱： Calcium phosphate, dibasic, dihydrate磷化粘著斑激抗體包裝100ml
蓖麻子（標(biāo)準(zhǔn)品）英文名稱： Cerium(III) carbonate, hydrate絲聚合蛋白/中間絲蛋白抗體包裝25ml
蝙蝠葛堿(標(biāo)準(zhǔn)品)英文名稱： Chymotrypsinogen A肺鼠疫耶爾森氏菌F1莢膜蛋白抗體（C端）包裝10g
蝙蝠葛諾林堿(標(biāo)準(zhǔn)品)英文名稱： Cibacron blue 3G-A凝血因子13抗體(纖維蛋白穩(wěn)定因子)包裝50g
蝙蝠葛蘇林堿(標(biāo)準(zhǔn)品)英文名稱： DEAE Dextran濾泡樹突分泌蛋白抗體包裝25g
扁柏雙黃(標(biāo)準(zhǔn)品)英文名稱： Fluridone纖維母生長因子13抗體包裝5g
扁桃苷/苦杏仁苷(標(biāo)準(zhǔn)品)英文名稱： Histamine骨骼肌肌球蛋白輕鏈2抗體包裝100g
淺灰鏈霉菌Streptomyces│griseolus 質(zhì)量規(guī)格：>97%,BR瘦試劑盒染料木;Genistein
白乳菇Lactarius│piperatus (L.) Pers. 質(zhì)量規(guī)格：HPLC>99%,標(biāo)準(zhǔn)品受體型酪蛋白磷樣N試劑盒;
鴨瘟病毒Alphaherpesvirinae│Duck plague virus 質(zhì)量規(guī)格：≥99.0%受體TNFRSF結(jié)合絲蘇激2試劑盒七葉皂苷 IIb;Escin IIb
活細胞核酸染料-綠菁SYT黃桿 甲基四氫苯二甲酸酐(4:6)隱球Elisa
炭疽芽孢桿 1-苯基-4-甲基-3-吡唑烷酮B類清道夫受體2Elisa
盤孢屬 3,3-二甲基-2,3-二氫-1H-茚-1-酮白介28BElisa
孢小克銀漢霉原變種 溶劑橙2肽基精氨酸脫亞氨4Elisa
枯草芽孢桿 2,4-二氯吡啶微粒體甘油三酸酯轉(zhuǎn)運蛋白大亞基Elisa
泰國鹽球 對甲苯磺酰甘氨酸甲酯肝X受體βElisa
戴爾根霉 3-溴-5-氯-2-氟吡啶法尼酯X受體Elisa
泰國放線短鏈孢 鄰甲苯基縮水甘油酰基;膽固酰基轉(zhuǎn)移Elisa
根瘤 肼單鹽酸鹽趨化因子c-c-基元配體19Elisa
弗蘭克氏 異煙酰乙酸乙酯α-pro-GDNFElisa
蘇云金芽孢桿蠟螟亞種 1-酸β-pro-GDNFElisa
賴氨酸芽胞桿屬 2-溴-1-(2,4-二基)乙酮豬肉銚蟲Elisa
中華靈芝（紫芝） 5-氟-2-甲氧基煙酸著絲粒蛋白Elisa
瓶形毛殼 4-溴-3-氟苯磺酰狼瘡抗凝IgG抗體Elisa
海洋桿 α--3,4-二氯苯乙酮狼瘡抗凝IgM抗體Elisa
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