產(chǎn)品屬性:
中文名稱:p38MAPK抑制劑(SB 239063)
英文名稱:SB 239063
產(chǎn)品規(guī)格:1mL(10mM)|5mg|10mg|50mg
發(fā)貨周期:1~3天
公司產(chǎn)品僅用于科研
商品介紹:
SB239063是p38MAPK選擇性抑制劑,對(duì)p38α的IC50為44nM,比對(duì)ERK,JNK1和其它激酶的抑制性高220倍。 注:本品僅可用于科研實(shí)驗(yàn),嚴(yán)禁用于臨床醫(yī)療及其他用途! CAS號(hào):193551-21-2 純度:99.32% 分子量:368.4 儲(chǔ)存條件:-20℃,有效期2年,溶入溶劑后-20℃請(qǐng)盡量在一個(gè)月內(nèi)使用。 |
細(xì)胞生物學(xué)研究有以下幾個(gè)方面:
細(xì)胞生物學(xué)的研究?jī)?nèi)容十分廣泛,主要包括:
①細(xì)胞核、染色體以及基因表達(dá)的研究;
②生物膜與細(xì)胞器的研究;
③細(xì)胞骨架體系的研究;
④細(xì)胞增殖及其調(diào)控;
⑤細(xì)胞分化及其調(diào)控;
⑥細(xì)胞的衰老與編程性死亡(凋亡);
⑦細(xì)胞的起源與進(jìn)化;
⑧細(xì)胞工程.
實(shí)驗(yàn)報(bào)告:
一、分離與培養(yǎng):
1、無(wú)菌條件下,取出1-3d 齡SD大鼠心房組織,然后用PBS將此組織塊清洗2次,最后將1mm3左右大??;
2、往組織塊中加入4 mL酶消化液(0.1% 和0.1% I型膠原酶),混懸10s,置37℃條件下消化10min,之后用滴管吹打制成單細(xì)胞懸液,自然沉淀并收集上清,用含10% FBS培養(yǎng)基終止消化后4℃放置;
3、剩下的組織再加入3~4mL酶消化液,混懸10s,置37℃消化10 min后,按上述方法收集上清并終止消化后4℃放置,重復(fù)此步驟2-3次,直至組織*被消化;
4、用200目不銹鋼篩網(wǎng)過濾細(xì)胞消化液,1200r/min 離心10min,棄去上清,沉淀細(xì)胞用含有10% FBS DMEM/F12培養(yǎng)基混懸,接種于25cm2培養(yǎng)瓶,放置于37℃ ,5%CO2 培養(yǎng)箱中培養(yǎng);
5、差速貼壁1h后,吸出培養(yǎng)基,按實(shí)驗(yàn)需要接種于6孔板中繼續(xù)培養(yǎng);
二、免疫熒光鑒定:
1、待心房肌細(xì)胞生長(zhǎng)至80%融合時(shí),棄去培養(yǎng)基,用溫育的PBS沖洗細(xì)胞2次,每次10min,然后用4%多聚甲醛在室溫條件下固定細(xì)胞15min;
2、PBS沖洗細(xì)胞2次,每次10min,然后在4℃條件下,用0.1%Triton X-100透膜15min;
3、PBS沖洗細(xì)胞2次,每次10min,然后在室溫條件下,用4% BSA封閉細(xì)胞30min;
4、按1: 100的比例稀釋?duì)?actin一抗,然后將其放在4℃冰箱中孵育細(xì)胞過夜;
5、PBS沖洗細(xì)胞3次,每次10min,按1:150的比例稀釋抗α-actin的二抗, 37℃條件下放置1h;
6、用PBS沖洗3次,每次10min,最后在倒置熒光顯微鏡下觀察圖像并拍照。
抗生鏈霉菌間粘附分子1抗體Human ERp19 ELISA Kit兔子促卵泡(FSH)免疫試劑盒
燕麥鐮孢CD105抗體Human ESAM(Endothelial cell-selective adhesion molecule) ELISA Kit兔子促甲狀腺(TSH)免疫試劑盒
木賊鐮孢軸突蛋白5抗體Human ESCO2 ELISA Kit兔子雌二(E2)免疫試劑盒
空氣藤氏酵母轉(zhuǎn)錄因子COUP1抗體Human ESD ELISA Kit兔子腸脂肪結(jié)合蛋白(iFABP)免疫試劑盒
玫瑰黃鏈霉菌表皮生長(zhǎng)因子樣蛋白1抗體Human ESF1 ELISA Kit兔子層連蛋白/板層(LN)免疫試劑盒
運(yùn)動(dòng)節(jié)桿菌癌胚抗原相關(guān)粘附分子1抗體Human ESPN ELISA Kit兔子不對(duì)稱二甲基精(ADMA)免疫試劑盒
靈芝19號(hào)染色體開放閱讀框75抗體Human ERGIC3 ELISA Kit兔子補(bǔ)體片斷3a(C3a)免疫試劑盒
厭鹽假諾卡氏菌隱花色蛋白1抗體Human ERH ELISA Kit兔子補(bǔ)體蛋白5(C5)免疫試劑盒
大腸埃希菌隱花色蛋白2抗體Human ERI1 ELISA Kit兔子補(bǔ)體蛋白4(C4)免疫試劑盒
異常畢赤酵母鈣通道L型α2多肽抗體Human ERLIN2 ELISA Kit兔子表皮生長(zhǎng)因子(EGF)免疫試劑盒
蘇云金芽孢桿菌松球亞種L型電壓依賴型鈣通道β3(L-type Ca++ CPβ3)抗體Human Erlin-1(ERLIN1) ELISA Kit兔子白血病抑制因子受體(LIFR)免疫試劑盒
大腸埃希氏菌L型電壓依賴型鈣通道β4抗體Human ERMAP ELISA Kit兔子白三烯B4(LTB4)免疫試劑盒
聚生殼菌電壓依賴性鈣通道CACNA1G+CACNA1H抗體Human ERMP1 ELISA Kit兔子白介9(IL-9)免疫試劑盒
迪吉氏黃桿菌鈣結(jié)合蛋白1抗體Human ERCC6 ELISA Kit兔子白介8(IL-8/CXCL8)免疫試劑盒
中國(guó)臺(tái)灣芽孢桿菌神經(jīng)型一氧化氮合成結(jié)合蛋白抗體Human ERCC6L ELISA Kit兔子白介6(IL-6)免疫試劑盒
病研所芽孢桿菌蕈堿型乙酰膽堿受體M4抗體Human ERG ELISA Kit兔子白介4(IL-4)免疫試劑盒
沼澤考克氏菌Kocuria│palustris 質(zhì)量規(guī)格:>98%,BRTAR DNA結(jié)合蛋白43試劑盒麥芽糖
爪哇根霉Rhizopus│javanicus 質(zhì)量規(guī)格:>98%,植物激級(jí)s腺苷同型半胱試劑盒3-O-沒食子酰粘
核盤菌Sclerotinia│sclerotiorum 質(zhì)量規(guī)格:>98%,BRSyndecan-3/試劑盒木犀草-5-O-葡萄糖苷
p38MAPK抑制劑(SB 239063)SEA-0400英文名稱: Benzaldehyde包裝100g
TTNPB (Arotinoid Acid)英文名稱: Cavidine一種腫瘤抑制基因抗體(C端)包裝25g
Zosuquidar;LY335979英文名稱: Serotonin hydrochloride 血小板活化因子受體抗體包裝5g
阿達(dá)唑英文名稱: Evening primrose oil蛋白磷γ1抗體包裝100g
阿達(dá)帕林英文名稱: Loureirin A 核苷還原M2B抗體包裝500g
阿爾法骨化英文名稱: FRIEDELIN磷二酯4A抗體包裝100g
阿戈美拉?。?/span>II型)英文名稱: FRIEDELAN-3BETA-OL絲束蛋白T Plastin抗體包裝25g
阿戈美拉?。?/span>I型)英文名稱: (4S)-2α,3β-Dihydroxy-D:C-friedo-B':A'-neogammacer-9(11)-en-23-oic acid神經(jīng)叢蛋白A2抗體包裝100g
阿立唑英文名稱: Pyrogallol網(wǎng)蛋白抗體包裝25g
阿利多英文名稱: N-NONADECANE 前列腺腫瘤高表達(dá)蛋白1抗體包裝1g
阿利克侖-5英文名稱: N-PENTADECANE磷化腫瘤抑制基因P53抗體包裝5g
阿侖磷鈉英文名稱: ETHYL CAFFEATE嘌呤ATP受體抗體包裝1g
阿莫曲普坦蘋果鹽英文名稱: Citric acid磷化絲裂原活化蛋白激p38抗體包裝25g
阿尼西坦,回拉西坦;茴拉西坦英文名稱: Citric acid果膠抑制蛋白18抗體包裝5g
阿沙班英文名稱: Potassium sulfate α型-過氧化活化增生受體抗體(PPAR α, PPAR-α)包裝25g
操作規(guī)程
1、在96孔板加入細(xì)胞100μL/孔,通常細(xì)胞增殖實(shí)驗(yàn)每孔加入100微升2000個(gè)細(xì)胞,細(xì)胞毒性實(shí)驗(yàn)每孔加入100微升5000~10000個(gè)細(xì)胞(具體每孔所用的細(xì)胞的數(shù)目,需根據(jù)細(xì)胞的大小,細(xì)胞增殖速度的快慢等決定)。置37℃ 5%CO2細(xì)胞培養(yǎng)箱培養(yǎng)24小時(shí).
2、.加入適當(dāng)濃度的0~10μL 受試化合物。
3、將96孔板在37℃,含5% CO2空氣及100%濕度的細(xì)胞培養(yǎng)箱中孵育適當(dāng)時(shí)間。
4、將5×MTT 用稀釋液稀釋成1× MTT 溶液。
5、每孔加50μL 1× MTT 溶液,在37℃孵育4小時(shí),使MTT 還原為甲臜。
6、吸出上清液,每孔加150μL DMSO 使甲臜溶解,用平板搖床搖勻。
7、酶標(biāo)儀在570nm 波長(zhǎng)處檢測(cè)每孔的光密度(如無(wú)570nm 濾光片,可以使用560-600nm 的濾光片)。
8、結(jié)果分析
a、細(xì)胞的存活率:將各測(cè)試孔的OD 值減去本底OD 值(*培養(yǎng)基加MTT,無(wú)細(xì)胞)或空白藥物孔OD 值(*培養(yǎng)基加受試藥物的不同稀釋度加MTT,無(wú)細(xì)胞),各重復(fù)孔的OD 值取平均數(shù)±SD。細(xì)胞的存活率以T/C%表示,T 為加藥細(xì)胞的OD 值,C 為對(duì)照細(xì)胞的OD 值。細(xì)胞存活率% =(加藥細(xì)胞OD/對(duì)照細(xì)胞OD)×100
b、求出T/C = 50% 時(shí)的藥物濃度(IC50)及T/C = 10%時(shí)的藥物濃度(IC90)