Annexin V-EGFP/PI雙染細(xì)胞凋亡檢測(cè)試劑盒公司*的產(chǎn)品：Phospho-Bcl-2 (Thr56) 化Bcl-2抗體六-1,3-丁二烯 分析標(biāo)準(zhǔn)品
Phospho-Bad(Ser112) 化相關(guān)死亡促進(jìn)因子抗體正已酯 97%
Phospho-Bad(Ser136) 化相關(guān)死亡促進(jìn)因子抗體氟哌啶 98%
Phospho-Bad(Ser155) 化相關(guān)死亡促進(jìn)因子抗體N-酰

商品介紹：

產(chǎn)品屬性：

中文名稱：Annexin V-EGFP/PI雙染細(xì)胞凋亡檢測(cè)試劑盒

英文名稱：Annexin V-EGFP Apoptosis Detection Kit

產(chǎn)品規(guī)格：10T|20T|50T|100T

發(fā)貨周期：1～3天
公司產(chǎn)品僅用于科研

細(xì)胞生物學(xué)研究有以下幾個(gè)方面：

細(xì)胞生物學(xué)的研究內(nèi)容十分廣泛,主要包括：

①細(xì)胞核、染色體以及基因表達(dá)的研究；

②生物膜與細(xì)胞器的研究；

③細(xì)胞骨架體系的研究；

④細(xì)胞增殖及其調(diào)控；

⑤細(xì)胞分化及其調(diào)控；

⑥細(xì)胞的衰老與編程性死亡(凋亡)；

⑦細(xì)胞的起源與進(jìn)化；

⑧細(xì)胞工程.

實(shí)驗(yàn)報(bào)告：

一、分離與培養(yǎng)：

1、無菌條件下，取出1-3d 齡SD大鼠心房組織，然后用PBS將此組織塊清洗2次，最后將1mm3左右大??；

2、往組織塊中加入4 mL酶消化液（0.1% 和0.1% I型膠原酶），混懸10s，置37℃條件下消化10min，之后用滴管吹打制成單細(xì)胞懸液，自然沉淀并收集上清，用含10% FBS培養(yǎng)基終止消化后4℃放置；

3、剩下的組織再加入3～4mL酶消化液，混懸10s，置37℃消化10 min后，按上述方法收集上清并終止消化后4℃放置，重復(fù)此步驟2-3次，直至組織*被消化；

4、用200目不銹鋼篩網(wǎng)過濾細(xì)胞消化液，1200r/min 離心10min，棄去上清，沉淀細(xì)胞用含有10％ FBS DMEM/F12培養(yǎng)基混懸，接種于25cm2培養(yǎng)瓶，放置于37℃ ，5％CO2 培養(yǎng)箱中培養(yǎng)；

5、差速貼壁1h后，吸出培養(yǎng)基，按實(shí)驗(yàn)需要接種于6孔板中繼續(xù)培養(yǎng)；

二、免疫熒光鑒定：

1、待心房肌細(xì)胞生長至80%融合時(shí)，棄去培養(yǎng)基，用溫育的PBS沖洗細(xì)胞2次，每次10min，然后用4%多聚甲醛在室溫條件下固定細(xì)胞15min；

2、PBS沖洗細(xì)胞2次，每次10min，然后在4℃條件下，用0.1％Triton X-100透膜15min；

3、PBS沖洗細(xì)胞2次，每次10min，然后在室溫條件下，用4% BSA封閉細(xì)胞30min；

4、按1: 100的比例稀釋?duì)?actin一抗，然后將其放在4℃冰箱中孵育細(xì)胞過夜；

5、PBS沖洗細(xì)胞3次，每次10min，按1：150的比例稀釋抗α-actin的二抗， 37℃條件下放置1h；

6、用PBS沖洗3次，每次10min，最后在倒置熒光顯微鏡下觀察圖像并拍照。

操作規(guī)程

1、在96孔板加入細(xì)胞100μL/孔，通常細(xì)胞增殖實(shí)驗(yàn)每孔加入100微升2000個(gè)細(xì)胞，細(xì)胞毒性實(shí)驗(yàn)每孔加入100微升5000～10000個(gè)細(xì)胞（具體每孔所用的細(xì)胞的數(shù)目，需根據(jù)細(xì)胞的大小，細(xì)胞增殖速度的快慢等決定）。置37℃ 5%CO2細(xì)胞培養(yǎng)箱培養(yǎng)24小時(shí).

2、.加入適當(dāng)濃度的0～10μL 受試化合物。

3、將96孔板在37℃，含5% CO2空氣及100%濕度的細(xì)胞培養(yǎng)箱中孵育適當(dāng)時(shí)間。

4、將5×MTT 用稀釋液稀釋成1× MTT 溶液。

5、每孔加50μL 1× MTT 溶液，在37℃孵育4小時(shí)，使MTT 還原為甲臜。

6、吸出上清液，每孔加150μL DMSO 使甲臜溶解，用平板搖床搖勻。

7、酶標(biāo)儀在570nm 波長處檢測(cè)每孔的光密度（如無570nm 濾光片，可以使用560-600nm 的濾光片）。

8、結(jié)果分析

a、細(xì)胞的存活率：將各測(cè)試孔的OD 值減去本底OD 值（*培養(yǎng)基加MTT，無細(xì)胞）或空白藥物孔OD 值（*培養(yǎng)基加受試藥物的不同稀釋度加MTT，無細(xì)胞），各重復(fù)孔的OD 值取平均數(shù)±SD。細(xì)胞的存活率以T/C%表示，T 為加藥細(xì)胞的OD 值，C 為對(duì)照細(xì)胞的OD 值。細(xì)胞存活率% =（加藥細(xì)胞OD/對(duì)照細(xì)胞OD）×100

b、求出T/C = 50% 時(shí)的藥物濃度(IC50)及T/C = 10%時(shí)的藥物濃度(IC90)

金屬硫蛋白2(MT-2)英文名稱：MT-2 ELISA Kit去整合樣金屬蛋白12包裝250mg

金屬硫蛋白1(MT-1)英文名稱：MT-1 ELISA Kit磷化乙酰羧化1ACCα抗體包裝5g

解整合樣金屬蛋白9(ADAM9)英文名稱：ADAM9 ELISA Kit膜粘連蛋白2受體抗體包裝100ml

解整合樣金屬蛋白8(ADAM8)英文名稱：ADAM8 ELISA Kit晚期糖基化終末產(chǎn)物特異性受體抗體包裝1g

解脲脲原體抗體(UU-Ab)英文名稱：UU-Ab ELISA KitADCK5蛋白抗體包裝5g

睫狀神經(jīng)營養(yǎng)因子(CNTF)英文名稱：CNTF ELISA Kit艾滋病病復(fù)制結(jié)合蛋白抗體包裝1g

結(jié)合珠蛋白/觸珠蛋白(Hpt/HP)英文名稱：Hpt/HP ELISA KitAFP4b蛋白抗體包裝5g

結(jié)締組織生長因子(CTGF)英文名稱：CTGF ELISA KitHIV-1病復(fù)制結(jié)合蛋白2抗體包裝100g

結(jié)蛋白(Des)英文名稱：Des ELISA Kit伴侶蛋白bc1同源復(fù)合體抗體包裝25g

窖蛋白Caveolin1(Cav-1)英文名稱：Cav-1 ELISA Kit心肌錨蛋白重復(fù)結(jié)構(gòu)域1抗體包裝5g

角化細(xì)胞生長因子(KGF/FGF-7)英文名稱：KGF/FGF-7 ELISA Kit抑制蛋白結(jié)構(gòu)域蛋白1抗體包裝25g

角化細(xì)胞內(nèi)分泌因子(KAF)/雙調(diào)蛋白(AR)英文名稱：AR ELISA Kit抑制蛋白結(jié)構(gòu)域蛋白2抗體包裝5g

膠原II(Collagenase II)英文名稱：Collagenase II ELISA Kit抑制蛋白結(jié)構(gòu)域蛋白3抗體包裝1g

膠原I(Collagenase I)英文名稱：Collagenase I ELISA Kit抑制蛋白結(jié)構(gòu)域蛋白4抗體包裝5g

膠原吡啶交聯(lián)(PYD)英文名稱：PYD ELISA Kit雌二抗體包裝1g

磷化通道蛋白2抗體促腎上腺皮質(zhì)激(ACTH)Oxiracetam, a cyclic derivative of gamma-aminobutyric acid (GABA), is used as a
Annexin V-EGFP/PI雙染細(xì)胞凋亡檢測(cè)試劑盒中國臺(tái)灣根霉 3-基一磷酸腺苷檢測(cè)試劑盒

禽腺病Ⅶ型 N-丁基吡啶雙(三氟甲磺酰)亞鹽二磷酸腺苷檢測(cè)試劑盒

木賊鐮孢 O-(叔丁基)-D-絲氨酸二氫嘧啶脫氫酶檢測(cè)試劑盒

富養(yǎng)羅爾斯通氏 1-BOC-4-甲酰肼二氫嘧啶脫氫酶檢測(cè)試劑盒

芽孢桿 5-氯乙基四氮唑二氫乳清酸脫氫酶檢測(cè)試劑盒

孢吸水鏈霉 2,4-二氯噻吩[2,3-D]嘧啶二肽基肽酶Ⅳ檢測(cè)試劑盒

荷葉蘑 2-氯-3-硝基-6-苯基吡啶二氧化硫檢測(cè)試劑盒

多欄純潔桿 癸二反應(yīng)蛋白7A域檢測(cè)試劑盒

蘇云金芽孢桿庫爾斯塔克亞種 1-叔丁基-3-氨基氮雜環(huán)丁烷泛連接蛋白1檢測(cè)試劑盒

Arthrobacter 2-基-泛素檢測(cè)試劑盒

弗雷德里克斯堡假單胞 4-基肉桂酸泛素A52殘留核糖體蛋白融合產(chǎn)物1檢測(cè)試劑盒

孢小克銀漢霉 5-氨基-3-溴-2-甲基吡啶泛素C末端水解酶L1檢測(cè)試劑盒

球孢白僵 4-氟-3-羥基苯泛素蛋白D檢測(cè)試劑盒

暗灰鏈霉 5-氯-2-氟苯酚泛素連接酶檢測(cè)試劑盒

釀酒酵母 2-(2-1H-咪唑基)吡啶芳香化酶檢測(cè)試劑盒