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          MTT細(xì)胞增殖檢測(cè)試劑盒

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          • 所在地 上海市

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          更新時(shí)間:2022-04-21 14:14:02瀏覽次數(shù):257

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          產(chǎn)品簡(jiǎn)介

          供貨周期 現(xiàn)貨 規(guī)格 250次|500次
          貨號(hào) GOY-01X9744 應(yīng)用領(lǐng)域 化工
          主要用途 公司產(chǎn)品僅供科研 英文名稱 MTT Cell Proliferation and Cytotoxicity Assay Kit
          MTT細(xì)胞增殖檢測(cè)試劑盒公司*的產(chǎn)品:LAG-3/CD223 淋巴活化因-3抗體13-酰-9-羥巴卡丁III 分析標(biāo)準(zhǔn)品,≥99%
          Langerin/CD207 白分化抗原CD207抗體13-酰-9-羥巴卡丁III 99%
          LAP18/Stathmin 白血病相關(guān)蛋白18/癌蛋白18抗體10-脫酰巴卡丁 III 95%
          Phospho-Stathmin (Ser16) 化原癌因蛋白1

          詳細(xì)介紹

          產(chǎn)品屬性:

          中文名稱:MTT細(xì)胞增殖檢測(cè)試劑盒

          英文名稱:MTT Cell Proliferation and Cytotoxicity Assay Kit

          產(chǎn)品規(guī)格:250次|500次

          發(fā)貨周期:1~3天
          公司產(chǎn)品僅用于科研

          商品介紹:

          儲(chǔ)存條件:冷藏(2-8℃)避光

          概述

          MTT細(xì)胞增殖檢測(cè)試劑盒(MTT Cell Proliferation and Cytotoxicity Assay Kit)被廣泛應(yīng)用于細(xì)胞增殖和細(xì)胞毒性檢測(cè)。MTT可以被線粒體內(nèi)的一些脫氫酶還原生成結(jié)晶狀的深紫色產(chǎn)物Formazan,在特定溶劑存在的情況下,可以被*溶解,然后通過(guò)酶標(biāo)儀可以測(cè)定570nm波長(zhǎng)附近的吸光度。

          應(yīng)用

          細(xì)胞增殖與毒性檢測(cè)

          Component A:MTT;Component B:MTT Solvent;Component C:Formazan Solubilization Solution

          細(xì)胞生物學(xué)研究有以下幾個(gè)方面:

          細(xì)胞生物學(xué)的研究?jī)?nèi)容十分廣泛,主要包括:

          ①細(xì)胞核、染色體以及基因表達(dá)的研究;

          ②生物膜與細(xì)胞器的研究;

          ③細(xì)胞骨架體系的研究;

          ④細(xì)胞增殖及其調(diào)控;

          ⑤細(xì)胞分化及其調(diào)控;

          ⑥細(xì)胞的衰老與編程性死亡(凋亡);

          ⑦細(xì)胞的起源與進(jìn)化;

          ⑧細(xì)胞工程.

          實(shí)驗(yàn)報(bào)告:

          一、分離與培養(yǎng):

          1、無(wú)菌條件下,取出1-3d 齡SD大鼠心房組織,然后用PBS將此組織塊清洗2次,最后將1mm3左右大??;

          2、往組織塊中加入4 mL酶消化液(0.1% 和0.1% I型膠原酶),混懸10s,置37℃條件下消化10min,之后用滴管吹打制成單細(xì)胞懸液,自然沉淀并收集上清,用含10% FBS培養(yǎng)基終止消化后4℃放置;

          3、剩下的組織再加入3~4mL酶消化液,混懸10s,置37℃消化10 min后,按上述方法收集上清并終止消化后4℃放置,重復(fù)此步驟2-3次,直至組織*被消化;

          4、用200目不銹鋼篩網(wǎng)過(guò)濾細(xì)胞消化液,1200r/min 離心10min,棄去上清,沉淀細(xì)胞用含有10% FBS DMEM/F12培養(yǎng)基混懸,接種于25cm2培養(yǎng)瓶,放置于37℃ ,5%CO2 培養(yǎng)箱中培養(yǎng);

          5、差速貼壁1h后,吸出培養(yǎng)基,按實(shí)驗(yàn)需要接種于6孔板中繼續(xù)培養(yǎng);

          二、免疫熒光鑒定:

          1、待心房肌細(xì)胞生長(zhǎng)至80%融合時(shí),棄去培養(yǎng)基,用溫育的PBS沖洗細(xì)胞2次,每次10min,然后用4%多聚甲醛在室溫條件下固定細(xì)胞15min;

          2、PBS沖洗細(xì)胞2次,每次10min,然后在4℃條件下,用0.1%Triton X-100透膜15min;

          3、PBS沖洗細(xì)胞2次,每次10min,然后在室溫條件下,用4% BSA封閉細(xì)胞30min;

          4、按1: 100的比例稀釋?duì)?actin一抗,然后將其放在4℃冰箱中孵育細(xì)胞過(guò)夜;

          5、PBS沖洗細(xì)胞3次,每次10min,按1:150的比例稀釋抗α-actin的二抗, 37℃條件下放置1h;

          6、用PBS沖洗3次,每次10min,最后在倒置熒光顯微鏡下觀察圖像并拍照。

          卡維丁(標(biāo)準(zhǔn)品)英文名稱: Moxonidine 原癌基因蛋白/活化蛋白1抗體包裝25g

          克拉霉(標(biāo)準(zhǔn)品)英文名稱: Moxonidine 死亡活化蛋白抗體包裝5g

          克拉維英文名稱: Nepafenac角蛋白19抗體包裝100g

          克林霉磷酯(標(biāo)準(zhǔn)品)英文名稱: Nepafenac角蛋白2抗體包裝25g

          克霉唑(標(biāo)準(zhǔn)品)英文名稱: Nicarbazin 角蛋白4抗體包裝500g

          喹乙;喹酰(標(biāo)準(zhǔn)品)英文名稱: Nimustine HCl(ACNU)色b245輕鏈抗體包裝1g

          醌式利福平(標(biāo)準(zhǔn)品)英文名稱: NVP-BEZ 2355號(hào)染色體開(kāi)放閱讀框44抗體包裝5g

          拉呋替?。?biāo)準(zhǔn)品)英文名稱: Pemirolast potassium心臟特異性絲蛋白抗體包裝5g

          拉米夫定(標(biāo)準(zhǔn)品)英文名稱: Perindopril erbumine胞漿型磷脂A2抗體包裝1g

          拉米夫定(標(biāo)準(zhǔn)品)英文名稱: phenylbutazone周期及凋亡調(diào)節(jié)蛋白1抗體包裝5g

          拉莫三 (標(biāo)準(zhǔn)品)英文名稱: phenylbutazone神經(jīng)粘附分子1抗體包裝1g

          拉西地平(標(biāo)準(zhǔn)品)英文名稱: phenylbutazone Calcium緊密連接蛋白5抗體包裝1g

          來(lái)米特(標(biāo)準(zhǔn)品)英文名稱: phenylbutazone Sodium富含半胱運(yùn)動(dòng)神經(jīng)元蛋白1抗體包裝1g

          來(lái)米特雜質(zhì)I(4-三)(標(biāo)準(zhǔn)品)英文名稱: Pirfenidone角蛋白5+6抗體包裝5g

          來(lái)米特雜質(zhì)Ⅱ(標(biāo)準(zhǔn)品)英文名稱: Pirfenidonec-Myc tag標(biāo)簽抗體包裝1g

          薔薇小單孢菌Micromonospora│rosaria 質(zhì)量規(guī)格:>99.0%?;囸I試劑盒茜;Alizarin

          假諾卡氏菌Pseudonocardia│sp. 質(zhì)量規(guī)格:HPLC>98%,標(biāo)準(zhǔn)品纖維母生長(zhǎng)因子受體1癌基因伴侶試劑盒鐵冬青;Rutundic acid

          毛柄金錢菌(金針菇)Flammulina│velutipes 質(zhì)量規(guī)格:>99%,USP32纖維介蛋白試劑盒甜葉懸鉤子苷;Rubusoside
          MTT細(xì)胞增殖檢測(cè)試劑盒米根霉 芴甲氧甲?;?D-天冬氨酸Β叔丁酯抗磷脂A2受體抗體Elisa

          金針菇(黃) 3-甲基-1-苯基吡唑CD25分子Elisa

          大腸埃希 1,2,3,4-四氫苯并[b]氮雜卓-5-酮癌易感蛋白Elisa

          pCMV-Gluc 7-甲基靛紅賴氨酰氧化同系物2Elisa

          圍小叢殼 4-溴-2-氟芐單核趨化蛋白2Elisa

          粉色小菇 9-苯基-9H-咔唑-3-酸哪酯型肝炎抗體Elisa

          楚科奇海科維爾氏 咪唑[1,2-a]吡啶-2-腺苷三磷酸結(jié)合盒轉(zhuǎn)運(yùn)體A1Elisa

          豬鏈球II型 5-羥基-3-甲基烯化Elisa

          未定德研所 甲酸辛酯色P450Elisa

          黑腐皮殼屬 4-溴-2,5-二氟苯可溶性α–klotho蛋白Elisa

          弗氏檸檬酸桿 (S)-叔亮氨庚型肝炎病IgG抗體Elisa

          釀酒酵母 2,3-二氯馬來(lái)酸酐C1q腫瘤壞死因子相關(guān)蛋白12Elisa

          淺玫瑰鏈霉 3--2-甲氧基吡啶表皮生長(zhǎng)因子受體抗體Elisa

          楊鏈格孢 二環(huán)基酮周期依賴性激4Elisa

          耶納農(nóng)球 5-甲基吡啶-2,3-二甲酸二甲酯凝血因子ⅩIElisa 

          操作規(guī)程

          1、在96孔板加入細(xì)胞100μL/孔,通常細(xì)胞增殖實(shí)驗(yàn)每孔加入100微升2000個(gè)細(xì)胞,細(xì)胞毒性實(shí)驗(yàn)每孔加入100微升5000~10000個(gè)細(xì)胞(具體每孔所用的細(xì)胞的數(shù)目,需根據(jù)細(xì)胞的大小,細(xì)胞增殖速度的快慢等決定)。置37℃ 5%CO2細(xì)胞培養(yǎng)箱培養(yǎng)24小時(shí).

          2、.加入適當(dāng)濃度的0~10μL 受試化合物。

          3、將96孔板在37℃,含5% CO2空氣及100%濕度的細(xì)胞培養(yǎng)箱中孵育適當(dāng)時(shí)間。

          4、將5×MTT 用稀釋液稀釋成1× MTT 溶液。

          5、每孔加50μL 1× MTT 溶液,在37℃孵育4小時(shí),使MTT 還原為甲臜。

          6、吸出上清液,每孔加150μL DMSO 使甲臜溶解,用平板搖床搖勻。

          7、酶標(biāo)儀在570nm 波長(zhǎng)處檢測(cè)每孔的光密度(如無(wú)570nm 濾光片,可以使用560-600nm 的濾光片)。

          8、結(jié)果分析

          a、細(xì)胞的存活率:將各測(cè)試孔的OD 值減去本底OD 值(*培養(yǎng)基加MTT,無(wú)細(xì)胞)或空白藥物孔OD 值(*培養(yǎng)基加受試藥物的不同稀釋度加MTT,無(wú)細(xì)胞),各重復(fù)孔的OD 值取平均數(shù)±SD。細(xì)胞的存活率以T/C%表示,T 為加藥細(xì)胞的OD 值,C 為對(duì)照細(xì)胞的OD 值。細(xì)胞存活率% =(加藥細(xì)胞OD/對(duì)照細(xì)胞OD)×100

          b、求出T/C = 50% 時(shí)的藥物濃度(IC50)及T/C = 10%時(shí)的藥物濃度(IC90)

           


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