產(chǎn)品屬性:
中文名稱:κ-opioid激動(dòng)劑
英文名稱:Nalfurafine hydrochloride
產(chǎn)品規(guī)格:1mL(10mM)|2mg|5mg|10mg|50mg
發(fā)貨周期:1~3天
公司產(chǎn)品僅用于科研
商品介紹:
Nalfurafine hydrochloride是一種κ-opioid激動(dòng)劑,是日本批準(zhǔn)的抗瘙癢藥物。 注:本品僅可用于科研實(shí)驗(yàn),嚴(yán)禁用于臨床醫(yī)療及其他用途! CAS號(hào):152658-17-8 別名:TRK-820 hydrochloride 純度:98.27% 分子式:C??H??ClN?O? 分子量:513.03 儲(chǔ)存條件:-20℃,有效期2年,溶入溶劑后-20℃請(qǐng)盡量在一個(gè)月內(nèi)使用。 |
細(xì)胞生物學(xué)研究有以下幾個(gè)方面:
細(xì)胞生物學(xué)的研究?jī)?nèi)容十分廣泛,主要包括:
①細(xì)胞核、染色體以及基因表達(dá)的研究;
②生物膜與細(xì)胞器的研究;
③細(xì)胞骨架體系的研究;
④細(xì)胞增殖及其調(diào)控;
⑤細(xì)胞分化及其調(diào)控;
⑥細(xì)胞的衰老與編程性死亡(凋亡);
⑦細(xì)胞的起源與進(jìn)化;
⑧細(xì)胞工程.
實(shí)驗(yàn)報(bào)告:
一、分離與培養(yǎng):
1、無(wú)菌條件下,取出1-3d 齡SD大鼠心房組織,然后用PBS將此組織塊清洗2次,最后將1mm3左右大小;
2、往組織塊中加入4 mL酶消化液(0.1% 和0.1% I型膠原酶),混懸10s,置37℃條件下消化10min,之后用滴管吹打制成單細(xì)胞懸液,自然沉淀并收集上清,用含10% FBS培養(yǎng)基終止消化后4℃放置;
3、剩下的組織再加入3~4mL酶消化液,混懸10s,置37℃消化10 min后,按上述方法收集上清并終止消化后4℃放置,重復(fù)此步驟2-3次,直至組織*被消化;
4、用200目不銹鋼篩網(wǎng)過(guò)濾細(xì)胞消化液,1200r/min 離心10min,棄去上清,沉淀細(xì)胞用含有10% FBS DMEM/F12培養(yǎng)基混懸,接種于25cm2培養(yǎng)瓶,放置于37℃ ,5%CO2 培養(yǎng)箱中培養(yǎng);
5、差速貼壁1h后,吸出培養(yǎng)基,按實(shí)驗(yàn)需要接種于6孔板中繼續(xù)培養(yǎng);
二、免疫熒光鑒定:
1、待心房肌細(xì)胞生長(zhǎng)至80%融合時(shí),棄去培養(yǎng)基,用溫育的PBS沖洗細(xì)胞2次,每次10min,然后用4%多聚甲醛在室溫條件下固定細(xì)胞15min;
2、PBS沖洗細(xì)胞2次,每次10min,然后在4℃條件下,用0.1%Triton X-100透膜15min;
3、PBS沖洗細(xì)胞2次,每次10min,然后在室溫條件下,用4% BSA封閉細(xì)胞30min;
4、按1: 100的比例稀釋?duì)?actin一抗,然后將其放在4℃冰箱中孵育細(xì)胞過(guò)夜;
5、PBS沖洗細(xì)胞3次,每次10min,按1:150的比例稀釋抗α-actin的二抗, 37℃條件下放置1h;
6、用PBS沖洗3次,每次10min,最后在倒置熒光顯微鏡下觀察圖像并拍照。
芽胞桿菌ATCC 9372;(曾用名:枯草芽胞桿菌黑色變種)單酰甘油脂肪抗體Human SESN1(Sestrin-1) ELISA Kit利尿肽(KP)ELISA Kit
枯草芽孢桿菌致癌基因n-Myc抗體Human GHRH(Somatoliberin) ELISA Kit冷誘導(dǎo)RNA結(jié)合蛋白(CIRBP)ELISA Kit
戊糖乳桿菌多藥耐藥相關(guān)蛋白3抗體Human CGB(CGβ(Chorionic Gonadotrophin Beta) ELISA Kit) ELISA Kit冷球蛋白(CG)ELISA Kit
枯草芽孢桿菌線粒體轉(zhuǎn)錄終止因子1抗體Human TAGLN2(Transgelin-2) ELISA Kit類粘蛋白2(ORM2)ELISA Kit
拱狀靈芝蛋白激MST2抗體Human SFRP2(Secreted frizzled-related protein 2) ELISA Kit類粘蛋白(ORM)ELISA Kit
*灰葡萄孢DNA結(jié)合蛋白C抗體Human IFNGR1(Interferon gamma receptor 1) ELISA Kit類似60S核糖體蛋白L21(LOC382344)ELISA Kit
Chitinophagaceae sp.胃粘液抗體Human SULF2(Extracellular sulfatase Sulf-2) ELISA Kit類肌腱蛋白c(TNC)ELISA Kit
巴氏醋桿菌巴氏亞種促黑激γ抗體Human CSTA(Cystatin-A) ELISA Kit類肌腱蛋白(TN)ELISA Kit
阪崎腸桿菌抗體Human NAA20(N-alpha-acetyltransferase 20) ELISA Kit類固抗體(SCA)ELISA Kit
類干酪乳桿菌結(jié)腸癌相關(guān)蛋白MIC1抗體Human HBA1(Hemoglobin subunit alpha) ELISA Kit類風(fēng)濕因子(RF)ELISA Kit
囊狀匐柄霉組織相容性復(fù)合體β抗體Human STEAP1(Metalloreductase STEAP1) ELISA Kit類白抗原G(HLA-G)ELISA Kit
香菇Myc基因肺癌相關(guān)蛋白抗體Human HIF1AN(Hypoxia-inducible factor 1-alpha inhibitor) ELISA Kit類白抗原E(HLA-E)ELISA Kit
蘇云金芽孢桿菌糖蛋白gp330抗體Human TAGLN2(Transgelin-2) ELISA Kit類白抗原C(HLA-C)ELISA Kit
人參土地桿菌磷化肌原調(diào)節(jié)蛋白抗體Human SESN1(Sestrin-1) ELISA Kit類白抗原B27(HLA-B27)ELISA Kit
Rhizobium vitis造血祖激1抗體Human GHRH(Somatoliberin) ELISA Kit類白抗原A(HLA-A)ELISA Kit
大腸埃希氏桿菌絲裂原活化蛋白激MAP4K4抗體Human PDE4B(cAMP-specific 3′,5′-cyclic phosphodiesterase 4B) ELISA Kit雷帕霉靶蛋白(mTOR)ELISA Kit
鏈霉菌Streptomyces│sp. 質(zhì)量規(guī)格:>98%,BR楊苷
型副傷寒沙門(mén)氏菌Salmonella│paratyphiA 質(zhì)量規(guī)格:>98%,BR酚
木霉Trichoderma│sp. 質(zhì)量規(guī)格:BR,日本進(jìn)口分裝麝香
κ-opioid激動(dòng)劑FABPB 腦型脂肪結(jié)合蛋白抗體天青Ⅱ AR
factor V 5抗體鋁試劑 AR
factor VIII(FVIII) human 第八因子相關(guān)抗原抗體性鉻藍(lán)K AR
factor VIII(FVIII) 第八因子相關(guān)抗原抗體對(duì)氨-N,N-二苯硫鹽 AR,98%
factor XIII 13抗體性品紅 Indicator,pH 1.0-3.1
FADD Fas死亡結(jié)構(gòu)域相關(guān)蛋白燦爛綠 AR
phospho-FADD(Ser194) 化Fas死亡結(jié)構(gòu)域相關(guān)蛋白抗體溴酚綠 indicator (pH 3.8-5.4)
FAK 粘著斑激抗體溴百里香酚藍(lán) ACS, Dye content 95 %
操作規(guī)程
1、在96孔板加入細(xì)胞100μL/孔,通常細(xì)胞增殖實(shí)驗(yàn)每孔加入100微升2000個(gè)細(xì)胞,細(xì)胞毒性實(shí)驗(yàn)每孔加入100微升5000~10000個(gè)細(xì)胞(具體每孔所用的細(xì)胞的數(shù)目,需根據(jù)細(xì)胞的大小,細(xì)胞增殖速度的快慢等決定)。置37℃ 5%CO2細(xì)胞培養(yǎng)箱培養(yǎng)24小時(shí).
2、.加入適當(dāng)濃度的0~10μL 受試化合物。
3、將96孔板在37℃,含5% CO2空氣及100%濕度的細(xì)胞培養(yǎng)箱中孵育適當(dāng)時(shí)間。
4、將5×MTT 用稀釋液稀釋成1× MTT 溶液。
5、每孔加50μL 1× MTT 溶液,在37℃孵育4小時(shí),使MTT 還原為甲臜。
6、吸出上清液,每孔加150μL DMSO 使甲臜溶解,用平板搖床搖勻。
7、酶標(biāo)儀在570nm 波長(zhǎng)處檢測(cè)每孔的光密度(如無(wú)570nm 濾光片,可以使用560-600nm 的濾光片)。
8、結(jié)果分析
a、細(xì)胞的存活率:將各測(cè)試孔的OD 值減去本底OD 值(*培養(yǎng)基加MTT,無(wú)細(xì)胞)或空白藥物孔OD 值(*培養(yǎng)基加受試藥物的不同稀釋度加MTT,無(wú)細(xì)胞),各重復(fù)孔的OD 值取平均數(shù)±SD。細(xì)胞的存活率以T/C%表示,T 為加藥細(xì)胞的OD 值,C 為對(duì)照細(xì)胞的OD 值。細(xì)胞存活率% =(加藥細(xì)胞OD/對(duì)照細(xì)胞OD)×100
b、求出T/C = 50% 時(shí)的藥物濃度(IC50)及T/C = 10%時(shí)的藥物濃度(IC90)