商品介紹:
Odanacatib是一種有效的,選擇性的,中性的cathepsin K抑制劑,抑制人和兔的cathepsin K活性,IC50值分別為0.2nM/1nM;對其選擇性比對cathepsin B,athepsin L和athepsin S的高。 注:本品僅可用于科研實(shí)驗(yàn),嚴(yán)禁用于臨床醫(yī)療及其他用途! CAS號(hào):603139-19-1 別名:MK-0822 純度:99.80% 分子量:525.56 儲(chǔ)存條件:-20℃,有效期2年,溶入溶劑后-20℃請盡量在一個(gè)月內(nèi)使用。 |
以下是細(xì)胞生物學(xué)試劑的詳細(xì)介紹:
操作步驟:
1. 樣品染色
1) 將Binding Buffer(10×)稀釋成1×Binding buffer工作液備用(1ml Binding Buffer(10×)需加入9ml無菌去離子水)。
2) 對于懸浮細(xì)胞,500-1000g離心5min收集細(xì)胞。
對于貼壁細(xì)胞,要用不含EDTA的胰酶消化細(xì)胞,胰酶消化時(shí)間不宜過長或過短,最好是在輕輕吹打可以使貼壁細(xì)胞吹打下來時(shí),加入細(xì)胞培養(yǎng)液,將細(xì)胞輕輕吹打下來,轉(zhuǎn)移到離心管內(nèi),500-1000g離心5min收集細(xì)胞。
3) 收集細(xì)胞后,加入預(yù)冷PBS溶液輕搖或用移液器輕柔吹打洗滌,離心收集細(xì)胞,共洗滌兩次。
4) 在細(xì)胞沉淀中加入1×Binding buffer工作液,重懸細(xì)胞,使細(xì)胞濃度達(dá)到1×106 cell/ml。
5) 吸取100μl細(xì)胞懸液(細(xì)胞總數(shù)為1×105 cell)至一新管中,加入5μl Annexin V-FITC和5-10 μl PI,輕輕混勻,室溫避光孵育15min。
2. 樣品檢測
1) 流式細(xì)胞儀檢測:
染色孵育后,每管加入400μl 1×Binding Buffer工作液,混勻后使用流式細(xì)胞儀檢測(1小時(shí)內(nèi)檢測)。
建議設(shè)置經(jīng)凋亡誘導(dǎo)的正常細(xì)胞、PI單染和Annexin V-FITC單染3個(gè)對照組,正常細(xì)胞組可作為熒光補(bǔ)償調(diào)節(jié)去除光譜重疊和設(shè)定十字門的位置。結(jié)果可用CellQuest等軟件進(jìn)行分析,繪制雙色散點(diǎn)圖(two-color dot plot),F(xiàn)ITC為橫坐標(biāo),PI為縱坐標(biāo)。Annexin V-FITC和PI聯(lián)合使用時(shí),活細(xì)胞僅有很低強(qiáng)度的背景熒光,早期凋亡細(xì)胞僅有較強(qiáng)的綠色熒光,晚期凋亡細(xì)胞有綠色和紅色雙重?zé)晒狻?/span>
2) 熒光顯微鏡檢測:
染色孵育后涂片,顯微鏡下觀察。使用熒光顯微鏡上的藍(lán)光和綠光通道分別觀察FITC和PI。被Annexin V-FITC結(jié)合的細(xì)胞顯示漿膜上有綠色光環(huán)。喪失細(xì)胞膜完整性的細(xì)胞,細(xì)胞核顯示紅色,膜上有綠色光環(huán)。
公司產(chǎn)品僅用于科研細(xì)胞培養(yǎng)操作規(guī)程:
一.培養(yǎng)基及培養(yǎng)凍存條件準(zhǔn)備:
1)準(zhǔn)備RPMI-1640培養(yǎng)基(RPMI-1640:GIBCO),90%;優(yōu)質(zhì)胎牛血清,10%。
2)培養(yǎng)條件: 氣相:空氣,95%;二氧化碳,5%。 溫度:37℃,培養(yǎng)箱濕度為70%-80%。
3)凍存液:90%血清,10%DMSO,現(xiàn)用現(xiàn)配,液氮儲(chǔ)存。
二.細(xì)胞處理:
1)復(fù)蘇細(xì)胞:將含有1mL細(xì)胞懸液的凍存管迅速放入37℃水浴中(水面要低于凍存管蓋部)搖晃解凍,移入事先準(zhǔn)備好的含有4mL培養(yǎng)基的15ml離心管中混合均勻。在1000RPM條件下離心4分鐘,棄去上清液,加入1mL培養(yǎng)基后吹勻。然后將所有細(xì)胞懸液移入含有5ml培養(yǎng)基的培養(yǎng)瓶中培養(yǎng)過夜。第二天換液并檢查細(xì)胞密度。
2)細(xì)胞傳代:如果細(xì)胞密度達(dá)80%-90%,即可進(jìn)行傳代培養(yǎng)。
對于懸浮細(xì)胞,傳代可參考以下方法:
方法一:收集細(xì)胞,1000RPM,常溫條件下離心5分鐘,棄去上清液,補(bǔ)加1-2mL培養(yǎng)液后吹勻,將細(xì)胞懸液按1:2到1:5的比例分到新的含8ml培養(yǎng)基的新皿中或者瓶中。
薄層菌屬絲裂原活化蛋白激3抗體Human INPPL1 (Phosphatidylinositol 3,4,5-trisphosphate 5-phosphatase 2) ELISA KIT犬組織因子(TF)免疫試劑盒
總狀毛霉雌激受體α抗體Human HCAR3 (Hydroxycarboxylic acid receptor 3) ELISA KIT犬組(HIS)免疫試劑盒
土壤短芽胞桿菌雌激受體β 抗體Human UGT1A6(UDP-glucuronosyltransferase 1-6) ELISA Kit犬轉(zhuǎn)移生長因子β1(TGF-β1)免疫試劑盒
米根霉上皮特異性抗原抗體Human IPMK (Inositol polyphosphate multikinase) ELISA KIT犬腫瘤壞死因子α(TNF-α )免疫試劑盒
頭孢霉內(nèi)皮-1抗體Human INPPL1 (Phosphatidylinositol 3,4,5-trisphosphate 5-phosphatase 2) ELISA KIT犬脂多糖/內(nèi)(LPS)免疫試劑盒
黑曲霉天冬蛋白家族蛋白抗體Human UGT1A6(UDP-glucuronosyltransferase 1-6) ELISA Kit犬脂蛋白脂(LPL)免疫試劑盒
迂回殼囊孢蝮蛇蛇蛋白抗體Human HCAR2 (Hydroxycarboxylic acid receptor 2) ELISA KIT犬孕激/孕(PROG)免疫試劑盒
巴貝斯蟲未定種(伊寧株)轉(zhuǎn)錄因子E2F-2抗體Human HCAR3 (Hydroxycarboxylic acid receptor 3) ELISA KIT犬誘導(dǎo)型一氧化氮合成(iNOS)免疫試劑盒
天麻蜜環(huán)菌A9*內(nèi)皮受體蛋白酪激抗體Human INSM1(Insulinoma-associated protein 1) ELISA Kit犬游離脂肪(FFA)免疫試劑盒
棒彎孢酪蛋白激受體B2抗體Human HMGCS2 (Hydroxymethylglutaryl-CoA synthase, mitochondrial) ELISA KIT犬游離狀腺原(Free-T3)免疫試劑盒
蠟狀芽孢桿菌磷化雌激受體ER alpha 抗體Human INSM2 (Insulinoma-associated protein 2) ELISA KIT犬游離甲狀腺(FT4)免疫試劑盒
須芒草伯克霍爾德氏菌重組增強(qiáng)型綠色熒光蛋白抗體Human HEMK1 (HemK methyltransferase family member 1) ELISA KIT犬抑制β-B(Inhbb)免疫試劑盒
綠針假單胞菌雌激受體α抗體(用于western blot)Human HRAS(GTPase HRas) ELISA Kit犬乙型肝炎表面抗原(HBsAg)免疫試劑盒
雞葡萄球菌雌激受體α/β抗體Human HSD17B1(Estradiol 17-beta-dehydrogenase 1) ELISA Kit犬乙酰膽堿受體抗體(AChRab)免疫試劑盒
擬枝孢鐮孢自分泌運(yùn)動(dòng)因子抗體Human IL1RL2 (Interleukin-1 receptor-like 2) ELISA Kit犬胰腺甘油三酯脂(PNLIP)免疫試劑盒
平菇—紫孢側(cè)耳酪蛋白激A3受體抗體Human UGT1A1(UDP-glucuronosyltransferase 1-1) ELISA Kit犬胰高血糖樣肽1(GLP1)免疫試劑盒
釀酒酵母Saccharomyces│cerevisiae 質(zhì)量規(guī)格:分析標(biāo)準(zhǔn)品,99.5%吳茱萸總堿
假蜜環(huán)菌Armillariella│sp. 質(zhì)量規(guī)格:分析標(biāo)準(zhǔn)品,99.8%蘇糖
副溶血弧菌Vibrio│parahaemolyticus 質(zhì)量規(guī)格:分析標(biāo)準(zhǔn)品,≥98%阿卡波糖
cathepsin K抑制劑(Odanacatib)氧芐啶(標(biāo)準(zhǔn)品)英文名稱: Ketorolac分子伴侶復(fù)合體TCP-1β抗體包裝1g
氧普(標(biāo)準(zhǔn)品)英文名稱: Leflunomide分裂周期蛋白25C抗體包裝5g
異靛(標(biāo)準(zhǔn)品)英文名稱: Leflunomide過敏C4/補(bǔ)體C4抗體包裝1g
間基酚(標(biāo)準(zhǔn)品)英文名稱: Levofloxacin Hemihidrated脂肪結(jié)合蛋白3抗體包裝1g
間二酚(標(biāo)準(zhǔn)品)英文名稱: Levofloxacin Hemihidrated16號(hào)染色體開放閱讀框48抗體包裝250mg
間酚(標(biāo)準(zhǔn)品)英文名稱: Lornoxicam色P450 19抗體包裝25g
間羥基(標(biāo)準(zhǔn)品)英文名稱: LornoxicamCD28抗體包裝5g
交沙霉(標(biāo)準(zhǔn)品)英文名稱: Losartan Potassium1號(hào)染色體開放閱讀框195抗體包裝1ml
金O(標(biāo)準(zhǔn)品)英文名稱: Losartan PotassiumNK抑制性受體2DL1抗體包裝25ml
金橙II(標(biāo)準(zhǔn)品)英文名稱: Masitinib3號(hào)染色體開放閱讀框67抗體包裝5ml
金剛烷(標(biāo)準(zhǔn)品)英文名稱: Mecillinamκ-酪蛋白抗體包裝1g
金諾芬(標(biāo)準(zhǔn)品)英文名稱: Medroxyprogesterone 唾液結(jié)合性球蛋白樣凝集7抗體包裝25g
伐倫克林(標(biāo)準(zhǔn)品)英文名稱: Medroxyprogesterone Cappuccino蛋白抗體包裝5g
羅格列(標(biāo)準(zhǔn)品)英文名稱: Methimazole前列腺過氧化物合成3抗體包裝1g
美托洛爾(標(biāo)準(zhǔn)品)英文名稱: Methimazole補(bǔ)體因子H相關(guān)蛋白1抗體包裝250mg