以下是細胞生物學(xué)試劑的詳細介紹:
商品介紹:
AMG837氫氧化鈣是GPR40激動劑,EC50為13nM,具有較好的藥代動力學(xué)表現(xiàn)。 注:本品僅可用于科研實驗,嚴禁用于臨床醫(yī)療及其他用途! CAS號:1259389-38-2 純度:98.01% 分子式:C??H??F?O?- 分子量:455.45 儲存條件:-20℃,有效期2年,溶入溶劑后-20℃請盡量在一個月內(nèi)使用。 |
公司產(chǎn)品僅用于科研細胞培養(yǎng)操作規(guī)程:
一.培養(yǎng)基及培養(yǎng)凍存條件準備:
1)準備RPMI-1640培養(yǎng)基(RPMI-1640:GIBCO),90%;優(yōu)質(zhì)胎牛血清,10%。
2)培養(yǎng)條件: 氣相:空氣,95%;二氧化碳,5%。 溫度:37℃,培養(yǎng)箱濕度為70%-80%。
3)凍存液:90%血清,10%DMSO,現(xiàn)用現(xiàn)配,液氮儲存。
二.細胞處理:
1)復(fù)蘇細胞:將含有1mL細胞懸液的凍存管迅速放入37℃水浴中(水面要低于凍存管蓋部)搖晃解凍,移入事先準備好的含有4mL培養(yǎng)基的15ml離心管中混合均勻。在1000RPM條件下離心4分鐘,棄去上清液,加入1mL培養(yǎng)基后吹勻。然后將所有細胞懸液移入含有5ml培養(yǎng)基的培養(yǎng)瓶中培養(yǎng)過夜。第二天換液并檢查細胞密度。
2)細胞傳代:如果細胞密度達80%-90%,即可進行傳代培養(yǎng)。
對于懸浮細胞,傳代可參考以下方法:
方法一:收集細胞,1000RPM,常溫條件下離心5分鐘,棄去上清液,補加1-2mL培養(yǎng)液后吹勻,將細胞懸液按1:2到1:5的比例分到新的含8ml培養(yǎng)基的新皿中或者瓶中。
操作步驟:
1. 樣品染色
1) 將Binding Buffer(10×)稀釋成1×Binding buffer工作液備用(1ml Binding Buffer(10×)需加入9ml無菌去離子水)。
2) 對于懸浮細胞,500-1000g離心5min收集細胞。
對于貼壁細胞,要用不含EDTA的胰酶消化細胞,胰酶消化時間不宜過長或過短,最好是在輕輕吹打可以使貼壁細胞吹打下來時,加入細胞培養(yǎng)液,將細胞輕輕吹打下來,轉(zhuǎn)移到離心管內(nèi),500-1000g離心5min收集細胞。
3) 收集細胞后,加入預(yù)冷PBS溶液輕搖或用移液器輕柔吹打洗滌,離心收集細胞,共洗滌兩次。
4) 在細胞沉淀中加入1×Binding buffer工作液,重懸細胞,使細胞濃度達到1×106 cell/ml。
5) 吸取100μl細胞懸液(細胞總數(shù)為1×105 cell)至一新管中,加入5μl Annexin V-FITC和5-10 μl PI,輕輕混勻,室溫避光孵育15min。
2. 樣品檢測
1) 流式細胞儀檢測:
染色孵育后,每管加入400μl 1×Binding Buffer工作液,混勻后使用流式細胞儀檢測(1小時內(nèi)檢測)。
建議設(shè)置經(jīng)凋亡誘導(dǎo)的正常細胞、PI單染和Annexin V-FITC單染3個對照組,正常細胞組可作為熒光補償調(diào)節(jié)去除光譜重疊和設(shè)定十字門的位置。結(jié)果可用CellQuest等軟件進行分析,繪制雙色散點圖(two-color dot plot),F(xiàn)ITC為橫坐標,PI為縱坐標。Annexin V-FITC和PI聯(lián)合使用時,活細胞僅有很低強度的背景熒光,早期凋亡細胞僅有較強的綠色熒光,晚期凋亡細胞有綠色和紅色雙重?zé)晒狻?/span>
2) 熒光顯微鏡檢測:
染色孵育后涂片,顯微鏡下觀察。使用熒光顯微鏡上的藍光和綠光通道分別觀察FITC和PI。被Annexin V-FITC結(jié)合的細胞顯示漿膜上有綠色光環(huán)。喪失細胞膜完整性的細胞,細胞核顯示紅色,膜上有綠色光環(huán)。
旋毛殼Bipped B樣蛋白抗體Human UBA3(NEDD8-activating enzyme E1 catalytic subunit) ELISA Kit異質(zhì)型核糖核蛋白復(fù)合物/抗RA33抗體(hnRNP/RA33)ELISA Kit
莖點霉屬艾杜糖-2-硫酯抗體Human PSPC1(Paraspeckle component 1) ELISA Kit異質(zhì)核糖核蛋白Q(SYNCRIP/HNRPQ/NSAP1)ELISA Kit
鮑姆木層孔菌α-L-艾杜糖苷抗體Human PSMG3 ELISA Kit異鎖鏈(IDES)ELISA Kit
胞外多聚物鞘單胞菌纖毛內(nèi)轉(zhuǎn)運同源蛋白122抗體Human PSPH ELISA Kit異檸檬脫氫(ICD)ELISA Kit
地衣芽孢桿菌纖毛內(nèi)轉(zhuǎn)運同源蛋白140抗體Human PSMD6 ELISA Kit異常凝血原(APT)ELISA Kit
福氏志賀氏菌纖毛內(nèi)轉(zhuǎn)運同源蛋白20抗體Human PSMD7 ELISA Kit異腎上腺(iso-Hyd)ELISA Kit
稻綠核菌纖毛內(nèi)轉(zhuǎn)運同源蛋白43抗體Human PSME2 ELISA Kit乙酰乙(ACAC)ELISA Kit
葡萄座腔菌纖毛內(nèi)轉(zhuǎn)運同源蛋白80抗體Human PSME1 ELISA Kit乙酰肝(HPA)ELISA Kit
突孢毛殼CD101抗體Human PSMC4(Proteasome 26S subunit ATPase 4) ELISA Kit乙酰羧化合成(ACC)ELISA Kit
產(chǎn)黃青霉免疫球蛋白超家族成員5抗體Human PSMC6(Proteasome 26S subunit ATPase 6) ELISA Kit乙酰膽堿酯(AChE)ELISA Kit
大腸埃希菌alpha干擾誘導(dǎo)蛋白27樣蛋白2抗體Human PSMD10 ELISA Kit乙酰膽堿受體抗體(AChRab)ELISA Kit
季也蒙假絲酵母胰島抗體Human PSMD12 ELISA Kit乙酰膽堿(ACH)ELISA Kit
巴西果小克銀漢霉Human PSMD11 ELISA Kit乙脫氫18家族成員A1(ALDH18A1)ELISA Kit
Pseudomonas tremae中間絲家族孤啡肽2蛋白抗體Human PSMD14(26S proteasome non-ATPase regulatory subunit 14) ELISA Kit乙脫氫(ALDH)ELISA Kit
吉氏根瘤菌CD339抗體Human PSMB2 ELISA Kit乙肝表面抗原大蛋白(HBV-LP)ELISA Kit
洋蔥伯克霍爾德氏菌連接粘附分子1抗體Human PSMD13 ELISA Kit乙脫氫(ADH)ELISA Kit
: =AS3.870資源名稱: 黃曲霉 質(zhì)量規(guī)格:>94.0%(HPLC)對葉百部堿
根瘤菌Rhizobium│sp. 質(zhì)量規(guī)格:>98.0%(HPLC)(T)紫云英苷
花臉香蘑Lepista│sordida 質(zhì)量規(guī)格:>98.0%(T)異葒草苷
GPR40激動劑(AMG 837 calcium hydrate)CD5L/Api6 CD5L抗體四(THF) 無水級,≥99.9%, 無穩(wěn)定劑
CD6/TP120 CD6抗體三烯四 Standard for GC
CD54/ICAM-1 間粘附分子-1抗體原酯 99.8%,無水級
ICAM-2/CD102 間粘附分子-2抗體鹽硫 分析標準品
ICAM-3/CD50 間粘附分子-3抗體2,3,5-三酚 分析標準品
CD55/DAF 衰變加速因子CD55抗體1,1,1-三(羥)烷 97%
CD59 CD59抗體三氟磺酰 99%
CD56/NCAM1 CD56抗體十三 97%