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上海谷研實(shí)業(yè)有限公司 |
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| 參考價(jià) | 面議 |
更新時(shí)間：2022-04-21 10:46:00瀏覽次數(shù)：233
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| 供貨周期 | 現(xiàn)貨 | 規(guī)格 | 100次|500次 |
|---|---|---|---|
| 貨號 | GOY-01X9555 | 應(yīng)用領(lǐng)域 | 化工 |
| 主要用途 | 公司產(chǎn)品僅供科研 | 英文名稱 | Luminescent Cell Viability Assay Kit |
以下是細(xì)胞生物學(xué)試劑的詳細(xì)介紹：
中文名稱 | 英文名稱 | 產(chǎn)品規(guī)格 | 發(fā)貨周期 |
Luminescent Cell Viability Assay Kit | 100次|500次 | 1～3天 |
商品介紹：
本試劑盒是一種通過化學(xué)發(fā)光法測定細(xì)胞內(nèi)ATP含量從而來定量檢測活細(xì)胞數(shù)目的試劑盒。本試劑盒的性能和用途與Promega公司的同類產(chǎn)品基本相同，對于相同的細(xì)胞樣品本試劑盒的發(fā)光效果更強(qiáng)一些。 本試劑盒比常見的MTT、alamarBlue、Calcein-AM、WST-1、CCK-8等其它細(xì)胞活力測定方法更加簡單快捷。只需把試劑盒提供的檢測試劑與培養(yǎng)細(xì)胞等體積混合，反應(yīng)10分鐘后即可進(jìn)行化學(xué)發(fā)光檢測。無需洗滌細(xì)胞，也無需更換或去除培養(yǎng)液。并且化學(xué)發(fā)光非常穩(wěn)定，在反應(yīng)開始后的10分鐘內(nèi)無顯著變化，30分鐘內(nèi)的下降不超過10%。 本試劑盒不僅適合少量樣品的檢測，也非常適合大量樣品的高通量篩選檢測。 本試劑盒線性范圍廣，檢測靈敏度高。用96孔板進(jìn)行檢測時(shí)，本試劑盒在0-50,000個(gè)細(xì)胞/孔的細(xì)胞密度范圍內(nèi)有良好的檢測效果，并且在僅有幾百個(gè)細(xì)胞時(shí)仍有良好的線性關(guān)系。當(dāng)細(xì)胞數(shù)量僅為50個(gè)/孔時(shí)，發(fā)光強(qiáng)度可達(dá)空白孔的5倍左右。 ATP，作為重要的能量分子，在細(xì)胞的各種生理、病理過程中起著重要作用。ATP是細(xì)胞新陳代謝的一個(gè)重要指標(biāo)，也是具有代謝活性細(xì)胞的重要標(biāo)志性分子，并和活細(xì)胞數(shù)目成良好的線性關(guān)系。因此，ATP含量能很好地反應(yīng)活細(xì)胞的數(shù)目，即本試劑盒可以通過測定ATP含量來進(jìn)行細(xì)胞計(jì)數(shù)或檢測細(xì)胞活力。 本試劑盒通過ATP檢測細(xì)胞活力的原理參考下圖。借助ATP依賴的螢光素酶催化的螢光素發(fā)光反應(yīng)，ATP可以通過測定化學(xué)發(fā)光來進(jìn)行定量。由于ATP含量能很好地反映活細(xì)胞的數(shù)目，而ATP含量和發(fā)光強(qiáng)度成正比，這樣就可以簡單地通過化學(xué)發(fā)光強(qiáng)度來計(jì)算出細(xì)胞活力或細(xì)胞數(shù)目。 細(xì)胞活力檢測試劑盒(化學(xué)發(fā)光法)檢測ATP的原理圖 對于96孔板，我們推薦使用100μl細(xì)胞培養(yǎng)液和100μl的檢測試劑，總體積為200μl，此時(shí)本試劑盒可以進(jìn)行100次檢測。對于384孔板，我們推薦使用25μl細(xì)胞培養(yǎng)液和25μl的檢測試劑，總體積為50μl，此時(shí)本試劑盒可以進(jìn)行400次檢測。也可以用其它體積的試劑進(jìn)行檢測，但細(xì)胞培養(yǎng)液和檢測試劑體積的比例必須為1:1。 儲存條件：室溫，有效期2年。 |
公司產(chǎn)品僅用于科研細(xì)胞培養(yǎng)操作規(guī)程：
一．培養(yǎng)基及培養(yǎng)凍存條件準(zhǔn)備：
1）準(zhǔn)備RPMI-1640培養(yǎng)基(RPMI-1640：GIBCO)，90%；優(yōu)質(zhì)胎牛血清，10%。
2）培養(yǎng)條件： 氣相：空氣，95%；二氧化碳，5%。 溫度：37℃，培養(yǎng)箱濕度為70%-80%。
3）凍存液：90%血清，10%DMSO，現(xiàn)用現(xiàn)配，液氮儲存。
二．細(xì)胞處理：
1）復(fù)蘇細(xì)胞：將含有1mL細(xì)胞懸液的凍存管迅速放入37℃水浴中（水面要低于凍存管蓋部）搖晃解凍，移入事先準(zhǔn)備好的含有4mL培養(yǎng)基的15ml離心管中混合均勻。在1000RPM條件下離心4分鐘，棄去上清液，加入1mL培養(yǎng)基后吹勻。然后將所有細(xì)胞懸液移入含有5ml培養(yǎng)基的培養(yǎng)瓶中培養(yǎng)過夜。第二天換液并檢查細(xì)胞密度。
2）細(xì)胞傳代：如果細(xì)胞密度達(dá)80%-90%，即可進(jìn)行傳代培養(yǎng)。
對于懸浮細(xì)胞，傳代可參考以下方法：
方法一：收集細(xì)胞，1000RPM，常溫條件下離心5分鐘，棄去上清液，補(bǔ)加1-2mL培養(yǎng)液后吹勻，將細(xì)胞懸液按1：2到1：5的比例分到新的含8ml培養(yǎng)基的新皿中或者瓶中。
操作步驟：
1. 樣品染色
1) 將Binding Buffer（10×）稀釋成1×Binding buffer工作液備用（1ml Binding Buffer（10×）需加入9ml無菌去離子水）。
2) 對于懸浮細(xì)胞，500-1000g離心5min收集細(xì)胞。
對于貼壁細(xì)胞，要用不含EDTA的胰酶消化細(xì)胞，胰酶消化時(shí)間不宜過長或過短，最好是在輕輕吹打可以使貼壁細(xì)胞吹打下來時(shí)，加入細(xì)胞培養(yǎng)液，將細(xì)胞輕輕吹打下來，轉(zhuǎn)移到離心管內(nèi)，500-1000g離心5min收集細(xì)胞。
3) 收集細(xì)胞后，加入預(yù)冷PBS溶液輕搖或用移液器輕柔吹打洗滌，離心收集細(xì)胞，共洗滌兩次。
4) 在細(xì)胞沉淀中加入1×Binding buffer工作液，重懸細(xì)胞，使細(xì)胞濃度達(dá)到1×106 cell/ml。
5) 吸取100μl細(xì)胞懸液（細(xì)胞總數(shù)為1×105 cell）至一新管中，加入5μl Annexin V-FITC和5-10 μl PI，輕輕混勻，室溫避光孵育15min。
2. 樣品檢測
1) 流式細(xì)胞儀檢測：
染色孵育后，每管加入400μl 1×Binding Buffer工作液，混勻后使用流式細(xì)胞儀檢測（1小時(shí)內(nèi)檢測）。
建議設(shè)置經(jīng)凋亡誘導(dǎo)的正常細(xì)胞、PI單染和Annexin V-FITC單染3個(gè)對照組，正常細(xì)胞組可作為熒光補(bǔ)償調(diào)節(jié)去除光譜重疊和設(shè)定十字門的位置。結(jié)果可用CellQuest等軟件進(jìn)行分析，繪制雙色散點(diǎn)圖（two-color dot plot），F(xiàn)ITC為橫坐標(biāo)，PI為縱坐標(biāo)。Annexin V-FITC和PI聯(lián)合使用時(shí)，活細(xì)胞僅有很低強(qiáng)度的背景熒光，早期凋亡細(xì)胞僅有較強(qiáng)的綠色熒光，晚期凋亡細(xì)胞有綠色和紅色雙重?zé)晒狻?/span>
2) 熒光顯微鏡檢測：
染色孵育后涂片，顯微鏡下觀察。使用熒光顯微鏡上的藍(lán)光和綠光通道分別觀察FITC和PI。被Annexin V-FITC結(jié)合的細(xì)胞顯示漿膜上有綠色光環(huán)。喪失細(xì)胞膜完整性的細(xì)胞，細(xì)胞核顯示紅色，膜上有綠色光環(huán)。
可溶性核因子κB受體活化因子配基(sRANKL)英文名稱：sRANKL ELISA Kit腺苷活化蛋白激γ3抗體包裝1g
可溶性Toll樣受體9(sTLR9/sCD289)英文名稱：sTLR9/sCD289 ELISA Kit腺苷單磷活化蛋白激β2抗體包裝25g
可溶性Toll樣受體4(sTLR4)英文名稱：sTLR4 ELISA Kit磷化周期末期促進(jìn)復(fù)合蛋白APC1抗體包裝5g
可溶性Toll樣受體2(sTLR2)英文名稱：sTLR2 ELISA Kit周期末期促進(jìn)復(fù)合蛋白APC1抗體包裝5g
可溶性P選擇(sP-selectin)英文名稱：sP-selectin ELISA Kit磷化蛋白激B2抗體包裝25g
可溶性Endoglin(ENG/sCD105)英文名稱：ENG/sCD105 ELISA Kit磷化鐵蛋白Fe65抗體包裝5g
可溶性CD86(B7-2/sCD86)英文名稱：B7-2/sCD86 ELISA Kit磷化鐵蛋白Fe65抗體包裝25g
可溶性CD40配體(sCD40L)英文名稱：sCD40L ELISA Kit磷化APP淀粉樣肽前體蛋白抗體包裝5g
可溶性CD30配體(sCD30L)英文名稱：sCD30L ELISA Kit磷化APP淀粉樣肽前體蛋白抗體包裝100ml
可溶性CD30(sCD30)英文名稱：sCD30 ELISA Kit磷化活化復(fù)制因子2抗體包裝500ml
顆粒B(Gzms-B)英文名稱：Gzms-B ELISA Kit磷化活化復(fù)制因子2抗體包裝5MG
顆粒A(Gzms-A)英文名稱：Gzms-A ELISA Kit磷化周期末期促進(jìn)復(fù)合蛋白APC1抗體包裝1g
抗子宮內(nèi)膜抗體(EMAb)英文名稱：EMAb ELISA Kit發(fā)育分化增強(qiáng)因子1抗體包裝100g
抗中性粒細(xì)胞核周抗體(pANCA)英文名稱：pANCA ELISA Kit磷化發(fā)育分化增強(qiáng)因子1抗體包裝25g
抗中性粒/中心體抗體(ACA)英文名稱：ACA ELISA Kit蛋白激B3包裝25ml
磷化通道蛋白2抗體C反應(yīng)蛋白(CRP)Ruxolitinib phosphate (INCB018424 phosphate) 是一種有效的 JAK1/2 抑制劑， IC50 分別為3.3 nM/2
細(xì)胞活力檢測試劑盒(化學(xué)發(fā)光法)季也蒙邁耶氏酵母 3,5-二叔丁基苯酸膽堿酯酶檢測試劑盒
平田頭菇 4-BOC-哌-1-硫酰膽酸檢測試劑盒
釀酒酵母 (4-溴苯基)脲膽汁酸檢測試劑盒
短密木霉 4-氨基氮雜環(huán)庚烷-1-羧酸叔丁酯彈性蛋白檢測試劑盒
粘質(zhì)沙雷氏 N-Cbz-L-苯氨酸彈性蛋白酶檢測試劑盒
枯草芽孢桿 4-氯-2,6-二氟蛋白(肽酰脯氨酰順;反異構(gòu)酶)檢測試劑盒
白僵 2-溴-3-羥基苯甲蛋白C檢測試劑盒
黑曲霉 四氯鄰苯二蛋白S檢測試劑盒
糞腸球(糞鏈球) 1H-1,2,4-三氮唑-1-甲脒單鹽酸鹽蛋白Z檢測試劑盒
藤黃微球 3-甲氧基-2-甲苯蛋白Z依賴的蛋白酶抑制劑檢測試劑盒
枯草芽孢桿 硫酸鈦蛋白多糖檢測試劑盒
淺黃鏈霉 3-氯異喹啉蛋白激酶A檢測試劑盒
牛鏈球 蘭氏D群 2,3-二氟-4-溴蛋白激酶C檢測試劑盒
大腸埃希 6-溴-3H-異苯并呋喃-1-酮蛋白激酶C-β1檢測試劑盒
釀酒酵母 2-甲基-3-噻吩甲酸乙酯蛋白酪氨酸激酶檢測試劑盒
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