公司產(chǎn)品僅用于科研
細(xì)胞生物學(xué)研究有以下幾個方面:
細(xì)胞生物學(xué)的研究內(nèi)容十分廣泛,主要包括:
①細(xì)胞核、染色體以及基因表達(dá)的研究;
②生物膜與細(xì)胞器的研究;
③細(xì)胞骨架體系的研究;
④細(xì)胞增殖及其調(diào)控;
⑤細(xì)胞分化及其調(diào)控;
⑥細(xì)胞的衰老與編程性死亡(凋亡);
⑦細(xì)胞的起源與進(jìn)化;
⑧細(xì)胞工程.
產(chǎn)品屬性:
中文名稱:JC-10熒光探針
英文名稱:JC-10
產(chǎn)品規(guī)格:1mg|5mg
發(fā)貨周期:1~3天
商品介紹:
JC-10是一種廣泛用于檢測線粒體膜電位△Ψm的理想熒光探針??梢詸z測細(xì)胞、組織或純化的線粒體膜電位。在線粒體膜電位較高時,JC-10聚集在線粒體的基質(zhì)中,形成聚合物,可以產(chǎn)生紅色熒光;在線粒體膜電位較低時,JC-10不能聚集在線粒體的基質(zhì)中,此時JC-10為單體,可以產(chǎn)生綠色熒光。這樣就可以非常方便地通過熒光顏色的轉(zhuǎn)變來檢測線粒體膜電位的變化。常用紅綠熒光的相對比例來衡量線粒體去極化的比例。激發(fā)波長Ex510nm,發(fā)射波長Em525nm。 線粒體膜電位的下降是細(xì)胞凋亡早期的一個標(biāo)志性事件。通過JC-10從紅色熒光到綠色熒光的轉(zhuǎn)變可以很容易地檢測到細(xì)胞膜電位的下降,同時也可以用JC-10從紅色熒光到綠色熒光的轉(zhuǎn)變作為細(xì)胞凋亡早期的一個檢測指標(biāo)。JC-10單體的大激發(fā)波長為515nm,大發(fā)射波長為529nm;JC-10聚合物的大激發(fā)波長為585nm,大發(fā)射波長為590nm。實(shí)際觀察時,使用常規(guī)的觀察紅色熒光和綠色熒光的設(shè)置即可。 儲存條件:-20℃干燥避光保存,保質(zhì)期12個月。 |
實(shí)驗(yàn)報告:
一、分離與培養(yǎng):
1、無菌條件下,取出1-3d 齡SD大鼠心房組織,然后用PBS將此組織塊清洗2次,最后將1mm3左右大?。?/span>
2、往組織塊中加入4 mL酶消化液(0.1% 和0.1% I型膠原酶),混懸10s,置37℃條件下消化10min,之后用滴管吹打制成單細(xì)胞懸液,自然沉淀并收集上清,用含10% FBS培養(yǎng)基終止消化后4℃放置;
3、剩下的組織再加入3~4mL酶消化液,混懸10s,置37℃消化10 min后,按上述方法收集上清并終止消化后4℃放置,重復(fù)此步驟2-3次,直至組織*被消化;
4、用200目不銹鋼篩網(wǎng)過濾細(xì)胞消化液,1200r/min 離心10min,棄去上清,沉淀細(xì)胞用含有10% FBS DMEM/F12培養(yǎng)基混懸,接種于25cm2培養(yǎng)瓶,放置于37℃ ,5%CO2 培養(yǎng)箱中培養(yǎng);
5、差速貼壁1h后,吸出培養(yǎng)基,按實(shí)驗(yàn)需要接種于6孔板中繼續(xù)培養(yǎng);
二、免疫熒光鑒定:
1、待心房肌細(xì)胞生長至80%融合時,棄去培養(yǎng)基,用溫育的PBS沖洗細(xì)胞2次,每次10min,然后用4%多聚甲醛在室溫條件下固定細(xì)胞15min;
2、PBS沖洗細(xì)胞2次,每次10min,然后在4℃條件下,用0.1%Triton X-100透膜15min;
3、PBS沖洗細(xì)胞2次,每次10min,然后在室溫條件下,用4% BSA封閉細(xì)胞30min;
4、按1: 100的比例稀釋α-actin一抗,然后將其放在4℃冰箱中孵育細(xì)胞過夜;
5、PBS沖洗細(xì)胞3次,每次10min,按1:150的比例稀釋抗α-actin的二抗, 37℃條件下放置1h;
6、用PBS沖洗3次,每次10min,最后在倒置熒光顯微鏡下觀察圖像并拍照。
操作規(guī)程
1、在96孔板加入細(xì)胞100μL/孔,通常細(xì)胞增殖實(shí)驗(yàn)每孔加入100微升2000個細(xì)胞,細(xì)胞毒性實(shí)驗(yàn)每孔加入100微升5000~10000個細(xì)胞(具體每孔所用的細(xì)胞的數(shù)目,需根據(jù)細(xì)胞的大小,細(xì)胞增殖速度的快慢等決定)。置37℃ 5%CO2細(xì)胞培養(yǎng)箱培養(yǎng)24小時.
2、.加入適當(dāng)濃度的0~10μL 受試化合物。
3、將96孔板在37℃,含5% CO2空氣及100%濕度的細(xì)胞培養(yǎng)箱中孵育適當(dāng)時間。
4、將5×MTT 用稀釋液稀釋成1× MTT 溶液。
5、每孔加50μL 1× MTT 溶液,在37℃孵育4小時,使MTT 還原為甲臜。
6、吸出上清液,每孔加150μL DMSO 使甲臜溶解,用平板搖床搖勻。
7、酶標(biāo)儀在570nm 波長處檢測每孔的光密度(如無570nm 濾光片,可以使用560-600nm 的濾光片)。
8、結(jié)果分析
a、細(xì)胞的存活率:將各測試孔的OD 值減去本底OD 值(*培養(yǎng)基加MTT,無細(xì)胞)或空白藥物孔OD 值(*培養(yǎng)基加受試藥物的不同稀釋度加MTT,無細(xì)胞),各重復(fù)孔的OD 值取平均數(shù)±SD。細(xì)胞的存活率以T/C%表示,T 為加藥細(xì)胞的OD 值,C 為對照細(xì)胞的OD 值。細(xì)胞存活率% =(加藥細(xì)胞OD/對照細(xì)胞OD)×100
b、求出T/C = 50% 時的藥物濃度(IC50)及T/C = 10%時的藥物濃度(IC90)
氧芐啶(標(biāo)準(zhǔn)品)英文名稱: Ketorolac分子伴侶復(fù)合體TCP-1β抗體包裝1g
氧普(標(biāo)準(zhǔn)品)英文名稱: Leflunomide分裂周期蛋白25C抗體包裝5g
異靛(標(biāo)準(zhǔn)品)英文名稱: Leflunomide過敏C4/補(bǔ)體C4抗體包裝1g
間基酚(標(biāo)準(zhǔn)品)英文名稱: Levofloxacin Hemihidrated脂肪結(jié)合蛋白3抗體包裝1g
間二酚(標(biāo)準(zhǔn)品)英文名稱: Levofloxacin Hemihidrated16號染色體開放閱讀框48抗體包裝250mg
間酚(標(biāo)準(zhǔn)品)英文名稱: Lornoxicam色P450 19抗體包裝25g
間羥基(標(biāo)準(zhǔn)品)英文名稱: LornoxicamCD28抗體包裝5g
交沙霉(標(biāo)準(zhǔn)品)英文名稱: Losartan Potassium1號染色體開放閱讀框195抗體包裝1ml
金O(標(biāo)準(zhǔn)品)英文名稱: Losartan PotassiumNK抑制性受體2DL1抗體包裝25ml
金橙II(標(biāo)準(zhǔn)品)英文名稱: Masitinib3號染色體開放閱讀框67抗體包裝5ml
金剛烷(標(biāo)準(zhǔn)品)英文名稱: Mecillinamκ-酪蛋白抗體包裝1g
金諾芬(標(biāo)準(zhǔn)品)英文名稱: Medroxyprogesterone 唾液結(jié)合性免疫球蛋白樣凝集7抗體包裝25g
伐倫克林(標(biāo)準(zhǔn)品)英文名稱: Medroxyprogesterone Cappuccino蛋白抗體包裝5g
羅格列(標(biāo)準(zhǔn)品)英文名稱: Methimazole前列腺過氧化物合成3抗體包裝1g
美托洛爾(標(biāo)準(zhǔn)品)英文名稱: Methimazole補(bǔ)體因子H相關(guān)蛋白1抗體包裝250mg
無乳鏈球菌 蘭氏B群Streptococcus│agalactiae 質(zhì)量規(guī)格:HPLC>99%,標(biāo)準(zhǔn)品腺病IgM試劑盒甜菊雙糖苷;Steviolbioside
條紋擬盤多毛孢Pestalotiopsis│virgatula 質(zhì)量規(guī)格:≥900μg/mg,USP33,BR腺病IgG試劑盒匙羹藤I;GyMneMic acid
韓國假單胞菌Pseudomonas│koreensis 質(zhì)量規(guī)格:效價測定腺病36抗體試劑盒脫氧;Deoxyaconitine
JC-10熒光探針米曲霉 4-溴-9,9'-螺二芴抗RA33IgG抗體Elisa
Bacillus tequilensis Nα-對甲苯磺酰-L-精氨酸半胱氨酸蛋白10Elisa
科氏葡萄球科氏亞種 2,2-雙(4-氧苯基)烷基質(zhì)金屬蛋白9Elisa
水生哈薩克斯坦酵母 5,6,7,7a-四氫噻吩并[3,2-c]吡啶-2(4H)-酮鹽酸鹽碳酸酐Elisa
美味牛肝 α-(4-基)二苯甲絲氨酸脫水Elisa
大腸埃希氏 利賽膦酸鈉抗膜聯(lián)蛋白A5抗體Elisa
爪哇根霉 N-Cbz-L-蛋氨酸抗磷脂酰乙抗體Elisa
鏈格孢 3-羥基-3-甲基-2-丁酮蛋白S抗體Elisa
枯草芽胞桿 3,4-二氟苯甲蛋白C抗體Elisa
囊毛霉 4-(二甲基氨基)苯酸鹽酸鹽抗波形蛋白抗體Elisa
枯草芽孢桿 4-溴-2-氟β2糖蛋白抗體Elisa
金白F4(金針菇) 4-溴-2-氟-芐泛化蛋白Elisa
美澳型核果褐腐病 Boc-L-2,4-二氯苯氨酸載脂蛋白FElisa
季也蒙邁耶氏酵母 N-(叔丁氧羰基)-3-氟-L-苯氨酸γ-谷氨?;D(zhuǎn)氨5Elisa
嗜熱脂肪芽胞桿 D-2,4-二氯苯氨酸烯酰水合1Elisa