AO熒光染色試劑盒公司*的產(chǎn)品：TRA16 激受體相關(guān)蛋白16抗體三 Standard for GC
TRA16 激孤兒受體相關(guān)蛋白抗體4，4'-二氨二苯砜 97%
TRADD 死亡區(qū)的腫瘤壞死因子受體1相關(guān)蛋白抗體碳胍 99%
TRAF1 腫瘤壞死因子受體相關(guān)因子1抗體硫胍 99%
TRAF2 腫瘤壞死因子受體相關(guān)因子2抗體鋅粒 99.99% metals basis
TRAF

產(chǎn)品屬性：

中文名稱：AO熒光染色試劑盒

英文名稱：

產(chǎn)品規(guī)格：100T

發(fā)貨周期：1～3天
公司產(chǎn)品僅用于科研

商品介紹：

細(xì)胞生物學(xué)研究有以下幾個(gè)方面：

細(xì)胞生物學(xué)的研究?jī)?nèi)容十分廣泛,主要包括：

①細(xì)胞核、染色體以及基因表達(dá)的研究；

②生物膜與細(xì)胞器的研究；

③細(xì)胞骨架體系的研究；

④細(xì)胞增殖及其調(diào)控；

⑤細(xì)胞分化及其調(diào)控；

⑥細(xì)胞的衰老與編程性死亡(凋亡)；

⑦細(xì)胞的起源與進(jìn)化；

⑧細(xì)胞工程.

實(shí)驗(yàn)報(bào)告：

一、分離與培養(yǎng)：

1、無(wú)菌條件下，取出1-3d 齡SD大鼠心房組織，然后用PBS將此組織塊清洗2次，最后將1mm3左右大??；

2、往組織塊中加入4 mL酶消化液（0.1% 和0.1% I型膠原酶），混懸10s，置37℃條件下消化10min，之后用滴管吹打制成單細(xì)胞懸液，自然沉淀并收集上清，用含10% FBS培養(yǎng)基終止消化后4℃放置；

3、剩下的組織再加入3～4mL酶消化液，混懸10s，置37℃消化10 min后，按上述方法收集上清并終止消化后4℃放置，重復(fù)此步驟2-3次，直至組織*被消化；

4、用200目不銹鋼篩網(wǎng)過(guò)濾細(xì)胞消化液，1200r/min 離心10min，棄去上清，沉淀細(xì)胞用含有10％ FBS DMEM/F12培養(yǎng)基混懸，接種于25cm2培養(yǎng)瓶，放置于37℃ ，5％CO2 培養(yǎng)箱中培養(yǎng)；

5、差速貼壁1h后，吸出培養(yǎng)基，按實(shí)驗(yàn)需要接種于6孔板中繼續(xù)培養(yǎng)；

二、免疫熒光鑒定：

1、待心房肌細(xì)胞生長(zhǎng)至80%融合時(shí)，棄去培養(yǎng)基，用溫育的PBS沖洗細(xì)胞2次，每次10min，然后用4%多聚甲醛在室溫條件下固定細(xì)胞15min；

2、PBS沖洗細(xì)胞2次，每次10min，然后在4℃條件下，用0.1％Triton X-100透膜15min；

3、PBS沖洗細(xì)胞2次，每次10min，然后在室溫條件下，用4% BSA封閉細(xì)胞30min；

4、按1: 100的比例稀釋?duì)?actin一抗，然后將其放在4℃冰箱中孵育細(xì)胞過(guò)夜；

5、PBS沖洗細(xì)胞3次，每次10min，按1：150的比例稀釋抗α-actin的二抗， 37℃條件下放置1h；

6、用PBS沖洗3次，每次10min，最后在倒置熒光顯微鏡下觀察圖像并拍照。

去氫土莫英文名稱： DBD-ED [=4-(N,N-Dimethylaminosulfonyl)-7-(2-aminoethylamino)-2,1,3-benzoxadiazole] 鳥苷環(huán)化激活蛋白2抗體包裝100ml

去亞基小檗堿（標(biāo)準(zhǔn)品）英文名稱： AABD-SH (=4-Acetamido-7-mercapto-2,1,3-benzoxadiazole) 鳥苷環(huán)化激活蛋白3抗體包裝25g

去氧紫草(標(biāo)準(zhǔn)品)英文名稱： 9-(Bromomethyl)acridine 基合成抗體包裝5g

去乙酰車葉草酯（標(biāo)準(zhǔn)品）英文名稱： DBD-COCl [=4-(N,N-Dimethylaminosulfonyl)-7-(N-chloroformylmethyl-N-methylamino)-2,1,3-benzoxadiazole]高爾基體卷曲螺旋蛋白1抗體包裝1g

全蝎（標(biāo)準(zhǔn)品）英文名稱： NBD-COCl [=4-(N-Chloroformylmethyl-N-methylamino)-7-nitro-2,1,3-benzoxadiazole] 高爾基體卷曲螺旋蛋白2抗體包裝250mg

全葉青蘭（標(biāo)準(zhǔn)品）英文名稱： o-Phthalaldehyde 戊二酰脫氫抗體包裝5g

拳參（標(biāo)準(zhǔn)品）英文名稱： Dansyl HydrazineGTP環(huán)反饋調(diào)節(jié)蛋白抗體包裝5mg

染料木苷（標(biāo)準(zhǔn)品）英文名稱： DBD-H [=4-(N,N-Dimethylaminosulfonyl)-7-hydrazino-2,1,3-benzoxadiazole] 絨毛膜特異性轉(zhuǎn)錄因子GCM2抗體包裝25g

染料木/金雀異黃(標(biāo)準(zhǔn)品）英文名稱： NBD-H (=4-Hydrazino-7-nitro-2,1,3-benzoxadiazole Hydrazine) 廣泛控制基合成1樣蛋白1抗體包裝5g

人參（標(biāo)準(zhǔn)品）英文名稱： 1,3-Cyclohexanedioneβ1-6 N-乙?；咸烟寝D(zhuǎn)移2抗體包裝250mg

人參二(標(biāo)準(zhǔn)品)英文名稱： ABD-F [=4-(Aminosulfonyl)-7-fluoro-2,1,3-benzoxadiazole]磷化G蛋白激活內(nèi)向通道1抗體包裝100g

人參莖葉（標(biāo)準(zhǔn)品）英文名稱： Ferroceneacetic AcidG蛋白偶聯(lián)受體激相互作用蛋白2抗體包裝25g

人參蘆頭（標(biāo)準(zhǔn)品）英文名稱： (Hydrazinocarbonyl)ferrocene間隙連接蛋白10抗體包裝500g

人參三(標(biāo)準(zhǔn)品)英文名稱： Dimethyl Sulfoxide間隙連結(jié)蛋白46/白內(nèi)障相關(guān)蛋白抗體包裝1g

人參皂苷CK(標(biāo)準(zhǔn)品)英文名稱： 1,2,3,4-Tetrahydronaphthalene間隙連結(jié)蛋白50/白內(nèi)障相關(guān)蛋白抗體包裝25g

鐮孢Fusarium│sp. 質(zhì)量規(guī)格：HPLC>98%,標(biāo)準(zhǔn)品尿微量白蛋白試劑盒羅漢果苷III;Mogroside II

棒形小克銀漢霉Cunninghamella│clavata 質(zhì)量規(guī)格：>98%,USP grade尿相關(guān)蛋白C試劑盒律草;Humulone

ATCC44166=DSM2191資源名稱: 米根霉 質(zhì)量規(guī)格：HPLC≥98%,標(biāo)準(zhǔn)品尿皮龍膽;2,5-Dihydroxyben
AO熒光染色試劑盒大腸埃希 2-氟-6-甲氧基苯甲U3小核糖核蛋白IMP3Elisa

中慢生華癸根瘤 巴豆酸異丁酯畸胎瘤源性生長(zhǎng)因子Elisa

黃桿 巴豆酸異丁酯封閉蛋白5Elisa

黑木耳 4-乙基苯超敏心肌肌鈣蛋白ⅠElisa

大孢枝孢 3-氯-2-氟苯甲谷氨酰合成Elisa

大羽須瑚 2-甲硫基-4-氨基嘧啶-5-甲幽門螺桿尿抗體Elisa

枯草芽孢桿 4-甲基-3-幽門螺桿相關(guān)基因蛋白A抗體Elisa

大腸埃希 磷酸甜菜堿心營(yíng)養(yǎng)-1Elisa

冬蟲夏草 Fluvastatin Sodium組織蛋白G抗體Elisa

芽孢桿屬 5-溴-6-氯-3--β-D-吡喃葡萄糖苷θ-防御Elisa

褐囊蜜環(huán) 甲氧基酮聚乙二主鏈的IgG抗體Elisa

鮮綠青霉 2'-脫氧-5'-O-DMT-肌苷單磷酸腺苷激活蛋白Elisa

黃褐色牛桿 1,4-二乙炔基苯還原黃腺嘌呤二核苷酸Elisa

大豆慢生根瘤 1-丁基-1-甲基吡咯烷溴化物基質(zhì)金屬蛋白19Elisa

Pseudoclavibacter  caeni Srinivasan (+)-4,5-雙[羥基(二苯基)甲基]-2,2-二甲基-1,3-二氧戊環(huán)基質(zhì)金屬蛋白20Elisa 

操作規(guī)程

1、在96孔板加入細(xì)胞100μL/孔，通常細(xì)胞增殖實(shí)驗(yàn)每孔加入100微升2000個(gè)細(xì)胞，細(xì)胞毒性實(shí)驗(yàn)每孔加入100微升5000～10000個(gè)細(xì)胞（具體每孔所用的細(xì)胞的數(shù)目，需根據(jù)細(xì)胞的大小，細(xì)胞增殖速度的快慢等決定）。置37℃ 5%CO2細(xì)胞培養(yǎng)箱培養(yǎng)24小時(shí).

2、.加入適當(dāng)濃度的0～10μL 受試化合物。

3、將96孔板在37℃，含5% CO2空氣及100%濕度的細(xì)胞培養(yǎng)箱中孵育適當(dāng)時(shí)間。

4、將5×MTT 用稀釋液稀釋成1× MTT 溶液。

5、每孔加50μL 1× MTT 溶液，在37℃孵育4小時(shí)，使MTT 還原為甲臜。

6、吸出上清液，每孔加150μL DMSO 使甲臜溶解，用平板搖床搖勻。

7、酶標(biāo)儀在570nm 波長(zhǎng)處檢測(cè)每孔的光密度（如無(wú)570nm 濾光片，可以使用560-600nm 的濾光片）。

8、結(jié)果分析

a、細(xì)胞的存活率：將各測(cè)試孔的OD 值減去本底OD 值（*培養(yǎng)基加MTT，無(wú)細(xì)胞）或空白藥物孔OD 值（*培養(yǎng)基加受試藥物的不同稀釋度加MTT，無(wú)細(xì)胞），各重復(fù)孔的OD 值取平均數(shù)±SD。細(xì)胞的存活率以T/C%表示，T 為加藥細(xì)胞的OD 值，C 為對(duì)照細(xì)胞的OD 值。細(xì)胞存活率% =（加藥細(xì)胞OD/對(duì)照細(xì)胞OD）×100

b、求出T/C = 50% 時(shí)的藥物濃度(IC50)及T/C = 10%時(shí)的藥物濃度(IC90)