產(chǎn)品屬性:
中文名稱:XOR抑制劑(Topiroxostat)
英文名稱:Topiroxostat
產(chǎn)品規(guī)格:1mL(10mM)|5mg|10mg|50mg|100mg|200mg
發(fā)貨周期:1~3天
公司產(chǎn)品僅用于科研
商品介紹:
Topiroxostat(FYX-051)是huang嘌呤氧化還原酶(XOR)抑制劑,IC50為5.3nM。 注:本品僅可用于科研實(shí)驗(yàn),嚴(yán)禁用于臨床醫(yī)療及其他用途! CAS號(hào):577778-58-6 別名:FYX-051 純度:98.54% 分子式:C??H?N? 分子量:248.24 儲(chǔ)存條件:-20℃,有效期2年,溶入溶劑后-20℃請(qǐng)盡量在一個(gè)月內(nèi)使用。 |
細(xì)胞生物學(xué)研究有以下幾個(gè)方面:
細(xì)胞生物學(xué)的研究?jī)?nèi)容十分廣泛,主要包括:
①細(xì)胞核、染色體以及基因表達(dá)的研究;
②生物膜與細(xì)胞器的研究;
③細(xì)胞骨架體系的研究;
④細(xì)胞增殖及其調(diào)控;
⑤細(xì)胞分化及其調(diào)控;
⑥細(xì)胞的衰老與編程性死亡(凋亡);
⑦細(xì)胞的起源與進(jìn)化;
⑧細(xì)胞工程.
實(shí)驗(yàn)報(bào)告:
一、分離與培養(yǎng):
1、無(wú)菌條件下,取出1-3d 齡SD大鼠心房組織,然后用PBS將此組織塊清洗2次,最后將1mm3左右大小;
2、往組織塊中加入4 mL酶消化液(0.1% 和0.1% I型膠原酶),混懸10s,置37℃條件下消化10min,之后用滴管吹打制成單細(xì)胞懸液,自然沉淀并收集上清,用含10% FBS培養(yǎng)基終止消化后4℃放置;
3、剩下的組織再加入3~4mL酶消化液,混懸10s,置37℃消化10 min后,按上述方法收集上清并終止消化后4℃放置,重復(fù)此步驟2-3次,直至組織*被消化;
4、用200目不銹鋼篩網(wǎng)過(guò)濾細(xì)胞消化液,1200r/min 離心10min,棄去上清,沉淀細(xì)胞用含有10% FBS DMEM/F12培養(yǎng)基混懸,接種于25cm2培養(yǎng)瓶,放置于37℃ ,5%CO2 培養(yǎng)箱中培養(yǎng);
5、差速貼壁1h后,吸出培養(yǎng)基,按實(shí)驗(yàn)需要接種于6孔板中繼續(xù)培養(yǎng);
二、免疫熒光鑒定:
1、待心房肌細(xì)胞生長(zhǎng)至80%融合時(shí),棄去培養(yǎng)基,用溫育的PBS沖洗細(xì)胞2次,每次10min,然后用4%多聚甲醛在室溫條件下固定細(xì)胞15min;
2、PBS沖洗細(xì)胞2次,每次10min,然后在4℃條件下,用0.1%Triton X-100透膜15min;
3、PBS沖洗細(xì)胞2次,每次10min,然后在室溫條件下,用4% BSA封閉細(xì)胞30min;
4、按1: 100的比例稀釋?duì)?actin一抗,然后將其放在4℃冰箱中孵育細(xì)胞過(guò)夜;
5、PBS沖洗細(xì)胞3次,每次10min,按1:150的比例稀釋抗α-actin的二抗, 37℃條件下放置1h;
6、用PBS沖洗3次,每次10min,最后在倒置熒光顯微鏡下觀察圖像并拍照。
慢生根瘤菌胰島樣生長(zhǎng)因子結(jié)合蛋白樣1抗體Human PTBP2 ELISA Kit抑瘤M(OSM)ELISA Kit
嗜松青霉免疫球蛋白D重鏈保守區(qū)抗體Human PSTPIP1 ELISA Kit異質(zhì)性胞核核糖核蛋白R(shí)(hnRNP R)ELISA Kit
膠孢IV型己糖激抗體Human PTBP1 ELISA Kit異質(zhì)性胞核核糖核蛋白P2(hnRNP P2)ELISA Kit
大腸埃希氏菌宿主免疫球蛋白lambda樣肽1抗體Human PTCD3 ELISA Kit異質(zhì)性胞核核糖核蛋白M(hnRNP M)ELISA Kit
美澳型核果褐腐病菌NF-kappa-B抑制子beta抗體Human PTCH1 ELISA Kit異質(zhì)性胞核核糖核蛋白L(hnRNP L)ELISA Kit
灰略紅鏈霉菌NF-kappa-B抑制子epsilon抗體Human PTCH2 ELISA Kit異質(zhì)性胞核核糖核蛋白K(hnRNP K)ELISA Kit
棱柱散尾菌中華變型絲/蘇蛋白激ICK抗體Human PTAFR ELISA Kit異質(zhì)性胞核核糖核蛋白I(hnRNP I/PTB)ELISA Kit
日內(nèi)瓦毛霉纖毛內(nèi)轉(zhuǎn)運(yùn)同源蛋白172抗體Human PTBP1 ELISA Kit異質(zhì)性胞核核糖核蛋白H(hnRNP H)ELISA Kit
朱紅栓菌絲/蘇蛋白激ICK抗體Human PTBP2 ELISA Kit異質(zhì)性胞核核糖核蛋白G(hnRNP G)ELISA Kit
慢生根瘤菌肽酰tRNA水解ICT1抗體Human PTCD3 ELISA Kit異質(zhì)性胞核核糖核蛋白E(hnRNP E)ELISA Kit
解脂亞羅酵母alpha干擾誘導(dǎo)蛋白27抗體Human PTCH1 ELISA Kit異質(zhì)性胞核核糖核蛋白D(hnRNP D)ELISA Kit
弗氏檸檬桿菌纖毛內(nèi)轉(zhuǎn)運(yùn)同源蛋白81抗體Human PTCH2 ELISA Kit異質(zhì)性胞核核糖核蛋白C(hnRNP C)ELISA Kit
鴨疫里氏桿菌Gamma干擾誘導(dǎo)蛋白16抗體Human PSME4 ELISA Kit異質(zhì)性胞核核糖核蛋白A3(hnRNP A3)ELISA Kit
焦曲霉異檸檬脫氫3 beta亞基抗體Human PSME3 ELISA Kit異質(zhì)性胞核核糖核蛋白A2/B1(hnRNP A2/B1)ELISA Kit
貽貝弧菌干擾誘導(dǎo)的三角形四肽重復(fù)蛋白1抗體Human PSMF1 ELISA Kit異質(zhì)性胞核核糖核蛋白A1(hnRNP A1)ELISA Kit
蘇云金芽孢桿菌異檸檬脫氫gamma亞基抗體Human PSMG2 ELISA Kit異質(zhì)性胞核核糖核蛋白A0(hnRNP A0)ELISA Kit
: B687資源名稱: 熒光假單胞菌 質(zhì)量規(guī)格:>98.0%(HPLC)白花前胡
: T.6757F3資源名稱: 傷寒沙門氏菌 質(zhì)量規(guī)格:>95.0%(HPLC)(R型)人參皂苷Rh2
酵母菌Saccharomyces│sp. 質(zhì)量規(guī)格:用于高效液相色譜標(biāo)記仙茅苷
XOR抑制劑(Topiroxostat)CD45 CD45單克隆抗體特布他林半硫鹽 分析標(biāo)準(zhǔn)品
CD46/MCP 膜輔蛋白抗體氧化鈦(IV) 99%,325 目,粉末
CD46/MCP 膜輔蛋白抗體氧化鈦(IV),銳鈦礦 99.9% metals basis,粉末
CD45RO CD45RO抗2,3,4,6-四酚 分析標(biāo)準(zhǔn)品
CD48/SLAMF2 CD48抗體叔丁亞磺酰 97%
CD58/LFA-3 淋巴功能相關(guān)抗原-3抗體二烯四二酯 包含~0.006% 對(duì)苯二酚 穩(wěn)定劑, 90%
Integrin alpha 2/CD49b 整合α2抗體硫鏈絲菌肽 90%
CD5 CD5抗體三苯硅炔 98%
操作規(guī)程
1、在96孔板加入細(xì)胞100μL/孔,通常細(xì)胞增殖實(shí)驗(yàn)每孔加入100微升2000個(gè)細(xì)胞,細(xì)胞毒性實(shí)驗(yàn)每孔加入100微升5000~10000個(gè)細(xì)胞(具體每孔所用的細(xì)胞的數(shù)目,需根據(jù)細(xì)胞的大小,細(xì)胞增殖速度的快慢等決定)。置37℃ 5%CO2細(xì)胞培養(yǎng)箱培養(yǎng)24小時(shí).
2、.加入適當(dāng)濃度的0~10μL 受試化合物。
3、將96孔板在37℃,含5% CO2空氣及100%濕度的細(xì)胞培養(yǎng)箱中孵育適當(dāng)時(shí)間。
4、將5×MTT 用稀釋液稀釋成1× MTT 溶液。
5、每孔加50μL 1× MTT 溶液,在37℃孵育4小時(shí),使MTT 還原為甲臜。
6、吸出上清液,每孔加150μL DMSO 使甲臜溶解,用平板搖床搖勻。
7、酶標(biāo)儀在570nm 波長(zhǎng)處檢測(cè)每孔的光密度(如無(wú)570nm 濾光片,可以使用560-600nm 的濾光片)。
8、結(jié)果分析
a、細(xì)胞的存活率:將各測(cè)試孔的OD 值減去本底OD 值(*培養(yǎng)基加MTT,無(wú)細(xì)胞)或空白藥物孔OD 值(*培養(yǎng)基加受試藥物的不同稀釋度加MTT,無(wú)細(xì)胞),各重復(fù)孔的OD 值取平均數(shù)±SD。細(xì)胞的存活率以T/C%表示,T 為加藥細(xì)胞的OD 值,C 為對(duì)照細(xì)胞的OD 值。細(xì)胞存活率% =(加藥細(xì)胞OD/對(duì)照細(xì)胞OD)×100
b、求出T/C = 50% 時(shí)的藥物濃度(IC50)及T/C = 10%時(shí)的藥物濃度(IC90)