Hoechst 33258 DNA染料公司*的產(chǎn)品：Endostatin 內(nèi)皮抑/內(nèi)皮他丁抗體薄荷酯 98%
Endo G 核內(nèi)切G抗體十四 Standard for GC，≥99.5% (GC)
beta endorphin β-內(nèi)啡肽抗體十四 98%
envelope glycoprotein (Yellow fever virus) 黃熱病包膜糖蛋白抗體十四 分析標(biāo)準(zhǔn)品，≥9

商品介紹：

產(chǎn)品屬性：

中文名稱：Hoechst 33258 DNA染料

英文名稱：

產(chǎn)品規(guī)格：10mg

發(fā)貨周期：1～3天
公司產(chǎn)品僅用于科研

細(xì)胞生物學(xué)研究有以下幾個(gè)方面：

細(xì)胞生物學(xué)的研究?jī)?nèi)容十分廣泛,主要包括：

①細(xì)胞核、染色體以及基因表達(dá)的研究；

②生物膜與細(xì)胞器的研究；

③細(xì)胞骨架體系的研究；

④細(xì)胞增殖及其調(diào)控；

⑤細(xì)胞分化及其調(diào)控；

⑥細(xì)胞的衰老與編程性死亡(凋亡)；

⑦細(xì)胞的起源與進(jìn)化；

⑧細(xì)胞工程.

實(shí)驗(yàn)報(bào)告：

一、分離與培養(yǎng)：

1、無(wú)菌條件下，取出1-3d 齡SD大鼠心房組織，然后用PBS將此組織塊清洗2次，最后將1mm3左右大??；

2、往組織塊中加入4 mL酶消化液（0.1% 和0.1% I型膠原酶），混懸10s，置37℃條件下消化10min，之后用滴管吹打制成單細(xì)胞懸液，自然沉淀并收集上清，用含10% FBS培養(yǎng)基終止消化后4℃放置；

3、剩下的組織再加入3～4mL酶消化液，混懸10s，置37℃消化10 min后，按上述方法收集上清并終止消化后4℃放置，重復(fù)此步驟2-3次，直至組織*被消化；

4、用200目不銹鋼篩網(wǎng)過(guò)濾細(xì)胞消化液，1200r/min 離心10min，棄去上清，沉淀細(xì)胞用含有10％ FBS DMEM/F12培養(yǎng)基混懸，接種于25cm2培養(yǎng)瓶，放置于37℃ ，5％CO2 培養(yǎng)箱中培養(yǎng)；

5、差速貼壁1h后，吸出培養(yǎng)基，按實(shí)驗(yàn)需要接種于6孔板中繼續(xù)培養(yǎng)；

二、免疫熒光鑒定：

1、待心房肌細(xì)胞生長(zhǎng)至80%融合時(shí)，棄去培養(yǎng)基，用溫育的PBS沖洗細(xì)胞2次，每次10min，然后用4%多聚甲醛在室溫條件下固定細(xì)胞15min；

2、PBS沖洗細(xì)胞2次，每次10min，然后在4℃條件下，用0.1％Triton X-100透膜15min；

3、PBS沖洗細(xì)胞2次，每次10min，然后在室溫條件下，用4% BSA封閉細(xì)胞30min；

4、按1: 100的比例稀釋?duì)?actin一抗，然后將其放在4℃冰箱中孵育細(xì)胞過(guò)夜；

5、PBS沖洗細(xì)胞3次，每次10min，按1：150的比例稀釋抗α-actin的二抗， 37℃條件下放置1h；

6、用PBS沖洗3次，每次10min，最后在倒置熒光顯微鏡下觀察圖像并拍照。

操作規(guī)程

1、在96孔板加入細(xì)胞100μL/孔，通常細(xì)胞增殖實(shí)驗(yàn)每孔加入100微升2000個(gè)細(xì)胞，細(xì)胞毒性實(shí)驗(yàn)每孔加入100微升5000～10000個(gè)細(xì)胞（具體每孔所用的細(xì)胞的數(shù)目，需根據(jù)細(xì)胞的大小，細(xì)胞增殖速度的快慢等決定）。置37℃ 5%CO2細(xì)胞培養(yǎng)箱培養(yǎng)24小時(shí).

2、.加入適當(dāng)濃度的0～10μL 受試化合物。

3、將96孔板在37℃，含5% CO2空氣及100%濕度的細(xì)胞培養(yǎng)箱中孵育適當(dāng)時(shí)間。

4、將5×MTT 用稀釋液稀釋成1× MTT 溶液。

5、每孔加50μL 1× MTT 溶液，在37℃孵育4小時(shí)，使MTT 還原為甲臜。

6、吸出上清液，每孔加150μL DMSO 使甲臜溶解，用平板搖床搖勻。

7、酶標(biāo)儀在570nm 波長(zhǎng)處檢測(cè)每孔的光密度（如無(wú)570nm 濾光片，可以使用560-600nm 的濾光片）。

8、結(jié)果分析

a、細(xì)胞的存活率：將各測(cè)試孔的OD 值減去本底OD 值（*培養(yǎng)基加MTT，無(wú)細(xì)胞）或空白藥物孔OD 值（*培養(yǎng)基加受試藥物的不同稀釋度加MTT，無(wú)細(xì)胞），各重復(fù)孔的OD 值取平均數(shù)±SD。細(xì)胞的存活率以T/C%表示，T 為加藥細(xì)胞的OD 值，C 為對(duì)照細(xì)胞的OD 值。細(xì)胞存活率% =（加藥細(xì)胞OD/對(duì)照細(xì)胞OD）×100

b、求出T/C = 50% 時(shí)的藥物濃度(IC50)及T/C = 10%時(shí)的藥物濃度(IC90)

胱天蛋白11(CASP11)英文名稱：CASP11 ELISA KitC型凝集結(jié)構(gòu)域家族4成員C抗體包裝25mg

胱天蛋白1(CASP1)英文名稱：CASP1 ELISA KitCD226抗體包裝25g

胱硫醚β合(CβS)英文名稱：CβS ELISA KitCD26抗體包裝5g

骨形成蛋白8B(BMP8B)英文名稱：BMP8B ELISA Kit免疫球蛋白G Fc段受體Ⅱ/Fc γ RII a抗體包裝5g

骨形成蛋白6(BMP6)英文名稱：BMP6 ELISA Kit緊密連接蛋白20抗體包裝1g

骨形成蛋白1(BMP1)英文名稱：BMP1 ELISA Kit中心體蛋白135抗體包裝5g

骨骼肌特異性受體酪激(MUSK)英文名稱：MUSK ELISA Kit半胱蛋白蛋白-7抗體包裝100g

骨骼肌慢肌肌鈣蛋白T(TNNT1)英文名稱：TNNT1 ELISA Kit鈣調(diào)節(jié)抗體（鈣調(diào)蛋白/鈣調(diào)）包裝10g

骨骼肌快肌肌鈣蛋白I(TNNI2)英文名稱：TNNI2 ELISA Kit1號(hào)染色體開(kāi)放閱讀框181抗體包裝25g

骨鈣(OC)英文名稱：OC ELISA KitⅠ型補(bǔ)體受體抗體（C3b/C4b受體抗體）包裝25mg

骨成型蛋白受體Ⅱ(BMPRⅡ)英文名稱：BMPRⅡ ELISA Kit8型膠原/內(nèi)皮膠原蛋白抗體包裝1g

骨成型蛋白受體1A(BMPR1A)英文名稱：BMPR1A ELISA Kit結(jié)合轉(zhuǎn)化激活因子CITED1抗體包裝5g

骨成型蛋白7(BMP7)英文名稱：BMP7 ELISA Kit色P450 2C9抗體包裝10MG

骨成型蛋白4(BMP4)英文名稱：BMP4 ELISA Kit色P450 2D6抗體包裝100g

骨成型蛋白2(BMP2)英文名稱：BMP2 ELISA Kit血小板活化因子CTR9抗體包裝25g

特羅伊察棲砂桿菌Arenibacter│troitsensis 質(zhì)量規(guī)格：效價(jià)測(cè)定早老2試劑盒乙?；邹继J;Acetyl-trans

長(zhǎng)柄鏈格孢Alternaria│longipes 質(zhì)量規(guī)格：>98%,合物早老1試劑盒羊藿次苷II;Icarisid II

鮑希瓦氏菌Shewanella│haliotis 質(zhì)量規(guī)格：>99%,USP32,BR,可用于培養(yǎng)再生胰島衍生1α/胰石蛋白/胰線蛋白試劑盒茵芋苷;Skimmin
Hoechst 33258 DNA染料細(xì)孢毛霉 亞磷酸二異丁酯4-羥基苯酮酸雙加氧Elisa

匍枝根霉(黑根霉) 6-氨基-吡-2-羧酸甲酯COP9結(jié)構(gòu)光形態(tài)發(fā)生同源物亞基2Elisa

Aureimonas frigidaquae N-(3-氨基基)-N-甲基氨酸叔丁酯鹽酸鹽COP9結(jié)構(gòu)光形態(tài)發(fā)生同源物亞基2抗體Elisa

光帽鱗傘(滑菇) S-甲基-L-半胱氨酸CC趨化因子配體1Elisa

茶藨子葡萄座腔 4-溴-3,5-二氯三氟甲苯RIG-IElisa

釀酒酵母 N,N-雙(2-氯乙基)氨酸叔丁酯柯薩奇病B3Elisa

橄欖綠鏈霉 4-(二氟甲氧基)-3-(環(huán)氧基)苯甲DNA甲基轉(zhuǎn)移3A2Elisa

白僵 1,1,2,3,3-五氯烷雌受體γElisa

冬菇屬 膽固琥珀酸單酯柯薩奇病Elisa

米曲霉 3-(4-溴芐基)-2-丁基-5-氯-4-咪唑甲G_(i;o)蛋白Elisa

耐冷冷桿 Nα,Nε-雙(叔丁氧羰基)-L-賴氨酸二環(huán)己銨鹽蛋白聚糖AElisa

普通鏈霉 甲氧基去氧腎上腺鹽酸鹽蛋白聚糖BElisa

香菇 反式-4'-乙基-[1,1'-聯(lián)環(huán)己烷]-4-酮酪氨酸氨基轉(zhuǎn)移Elisa

Paucimonas lemoignei 5-(2-甲氧基苯氧基)-[2,2-二嘧啶]-4,6(1H,5H)-二酮谷氨酸氨基轉(zhuǎn)移Elisa

芽孢桿屬 2-(2-甲氧基苯氧基)二酸二甲酯補(bǔ)體蛋白1Elisa