商品介紹:
Parecoxib是COX-2抑制劑。 注:本品僅可用于科研實(shí)驗(yàn),嚴(yán)禁用于臨床醫(yī)療及其他用途! CAS號(hào):198470-85-8 別名:SC 69124A 純度:99.85% 分子量:392.4 儲(chǔ)存條件:-20℃,有效期2年,溶入溶劑后-20℃請(qǐng)盡量在一個(gè)月內(nèi)使用。 |
產(chǎn)品屬性:
中文名稱(chēng):COX-2抑制劑(Parecoxib Sodium)
英文名稱(chēng):Parecoxib Sodium
產(chǎn)品規(guī)格:1mL(10mM)|25mg|50mg|100mg
發(fā)貨周期:1~3天
公司產(chǎn)品僅用于科研
細(xì)胞生物學(xué)研究有以下幾個(gè)方面:
細(xì)胞生物學(xué)的研究?jī)?nèi)容十分廣泛,主要包括:
①細(xì)胞核、染色體以及基因表達(dá)的研究;
②生物膜與細(xì)胞器的研究;
③細(xì)胞骨架體系的研究;
④細(xì)胞增殖及其調(diào)控;
⑤細(xì)胞分化及其調(diào)控;
⑥細(xì)胞的衰老與編程性死亡(凋亡);
⑦細(xì)胞的起源與進(jìn)化;
⑧細(xì)胞工程.
實(shí)驗(yàn)報(bào)告:
一、分離與培養(yǎng):
1、無(wú)菌條件下,取出1-3d 齡SD大鼠心房組織,然后用PBS將此組織塊清洗2次,最后將1mm3左右大??;
2、往組織塊中加入4 mL酶消化液(0.1% 和0.1% I型膠原酶),混懸10s,置37℃條件下消化10min,之后用滴管吹打制成單細(xì)胞懸液,自然沉淀并收集上清,用含10% FBS培養(yǎng)基終止消化后4℃放置;
3、剩下的組織再加入3~4mL酶消化液,混懸10s,置37℃消化10 min后,按上述方法收集上清并終止消化后4℃放置,重復(fù)此步驟2-3次,直至組織*被消化;
4、用200目不銹鋼篩網(wǎng)過(guò)濾細(xì)胞消化液,1200r/min 離心10min,棄去上清,沉淀細(xì)胞用含有10% FBS DMEM/F12培養(yǎng)基混懸,接種于25cm2培養(yǎng)瓶,放置于37℃ ,5%CO2 培養(yǎng)箱中培養(yǎng);
5、差速貼壁1h后,吸出培養(yǎng)基,按實(shí)驗(yàn)需要接種于6孔板中繼續(xù)培養(yǎng);
二、免疫熒光鑒定:
1、待心房肌細(xì)胞生長(zhǎng)至80%融合時(shí),棄去培養(yǎng)基,用溫育的PBS沖洗細(xì)胞2次,每次10min,然后用4%多聚甲醛在室溫條件下固定細(xì)胞15min;
2、PBS沖洗細(xì)胞2次,每次10min,然后在4℃條件下,用0.1%Triton X-100透膜15min;
3、PBS沖洗細(xì)胞2次,每次10min,然后在室溫條件下,用4% BSA封閉細(xì)胞30min;
4、按1: 100的比例稀釋?duì)?actin一抗,然后將其放在4℃冰箱中孵育細(xì)胞過(guò)夜;
5、PBS沖洗細(xì)胞3次,每次10min,按1:150的比例稀釋抗α-actin的二抗, 37℃條件下放置1h;
6、用PBS沖洗3次,每次10min,最后在倒置熒光顯微鏡下觀察圖像并拍照。
操作規(guī)程
1、在96孔板加入細(xì)胞100μL/孔,通常細(xì)胞增殖實(shí)驗(yàn)每孔加入100微升2000個(gè)細(xì)胞,細(xì)胞毒性實(shí)驗(yàn)每孔加入100微升5000~10000個(gè)細(xì)胞(具體每孔所用的細(xì)胞的數(shù)目,需根據(jù)細(xì)胞的大小,細(xì)胞增殖速度的快慢等決定)。置37℃ 5%CO2細(xì)胞培養(yǎng)箱培養(yǎng)24小時(shí).
2、.加入適當(dāng)濃度的0~10μL 受試化合物。
3、將96孔板在37℃,含5% CO2空氣及100%濕度的細(xì)胞培養(yǎng)箱中孵育適當(dāng)時(shí)間。
4、將5×MTT 用稀釋液稀釋成1× MTT 溶液。
5、每孔加50μL 1× MTT 溶液,在37℃孵育4小時(shí),使MTT 還原為甲臜。
6、吸出上清液,每孔加150μL DMSO 使甲臜溶解,用平板搖床搖勻。
7、酶標(biāo)儀在570nm 波長(zhǎng)處檢測(cè)每孔的光密度(如無(wú)570nm 濾光片,可以使用560-600nm 的濾光片)。
8、結(jié)果分析
a、細(xì)胞的存活率:將各測(cè)試孔的OD 值減去本底OD 值(*培養(yǎng)基加MTT,無(wú)細(xì)胞)或空白藥物孔OD 值(*培養(yǎng)基加受試藥物的不同稀釋度加MTT,無(wú)細(xì)胞),各重復(fù)孔的OD 值取平均數(shù)±SD。細(xì)胞的存活率以T/C%表示,T 為加藥細(xì)胞的OD 值,C 為對(duì)照細(xì)胞的OD 值。細(xì)胞存活率% =(加藥細(xì)胞OD/對(duì)照細(xì)胞OD)×100
b、求出T/C = 50% 時(shí)的藥物濃度(IC50)及T/C = 10%時(shí)的藥物濃度(IC90)
大腸埃希菌趨化因子受體1抗體Human TPPP(Tubulin Polymerization Promoting Protein) ELISA Kit人無(wú)花果2(FCN2)免疫試劑盒
米曲霉磷化原癌基因c-Raf抗體Human TrxR1(Thioredoxin Reductase 1) ELISA Kit人烏頭2(ACO-2)免疫試劑盒
產(chǎn)氣莢膜梭菌 D型磷化致癌基因C-Myc抗體Human TRY(Trypsin) ELISA Kit人蝸牛同源物2(SNAI2)免疫試劑盒
薄邊蜂窩孔菌CD33抗體Human TSHRAb(Thyroid Stimulating Hormone Receptor Antidoby) ELISA Kit人蝸牛同源物1(果蠅)樣1蛋白(SNAIL1)免疫試劑盒
黑曲霉磷化原癌基因c-kit抗體Human TSP-1(Thrombospondin-1) ELISA Kit人胃粘膜相關(guān)淋巴樣組織淋巴瘤抗體(MALT Lymphoma Ab)免疫試劑盒
銅綠假單胞菌磷化原癌基因c-Jun抗體Human ucOC(Undercarboxylated Osteocalcin) ELISA Kit人胃內(nèi)因子(GIF)免疫試劑盒
果生鏈核盤(pán)菌氯離子通道蛋白3抗體Human UBE1L(Ubiquitin Activating Enzyme E1 Like Protein) ELISA Kit人胃泌調(diào)節(jié)免疫試劑盒
四川散斑殼磷化周期E抗體Human TP63(Tumor Protein p63) ELISA Kit人胃泌抗體(GCA)免疫試劑盒
針層孔菌屬磷化分裂周期蛋白25C抗體Human UBD(Ubiquitin D) ELISA Kit人胃泌釋放肽前體(ProGRP)免疫試劑盒
擬可可毛球二孢磷化周期依賴(lài)性激9抗體Human tPA(Plasminogen Activator, Tissue) ELISA Kit人胃泌釋放多肽(GRP)免疫試劑盒
乳乳球菌乳脂亞種磷化Connexin 43蛋白抗體Human TPA(Tissue Polypeptide Antigen) ELISA Kit人胃泌(Gastrin)免疫試劑盒
釀酒酵母絲切蛋白抗體Human TrxR1(Thioredoxin Reductase 1) ELISA Kit人胃動(dòng)(MTL)免疫試劑盒
藤黃微球菌磷化皮層肌動(dòng)蛋白抗體Human TPS(Tryptase) ELISA Kit人胃動(dòng)蛋白2(GKN2)免疫試劑盒
土生哈薩克斯坦酵母磷化周期B1抗體Human TNPO2(Transportin 2) ELISA Kit人胃蛋白原II 免疫試劑盒
短波單胞菌磷化周期B1抗體Human TPPP(Tubulin Polymerization Promoting Protein) ELISA Kit人胃蛋白原I 免疫試劑盒
凍土毛霉磷化cyclin D1抗體Human TNX(Tenascin X) ELISA Kit人胃蛋白原C(PG-C)免疫試劑盒
暫無(wú)Paenisporosarcina│macmurdoensis 質(zhì)量規(guī)格:>98%,BRDAB2互作蛋白試劑盒格列脲
毛柄金錢(qián)菌(金針菇)Flammulina│velutipes 質(zhì)量規(guī)格:BRC型凝集結(jié)構(gòu)域家族4成員E試劑盒高車(chē)前苷
黑木耳Auricularia│auricula-judae 質(zhì)量規(guī)格:>98%,分子生物學(xué)級(jí)C肽試劑盒佛手柑
COX-2抑制劑(Parecoxib Sodium)PCID2蛋白抗體包裝5ml
腺苷硫激1抗體包裝5g
腺苷硫激2抗體包裝25g
蛋白激活受體3抗體包裝5g
MAWD結(jié)合蛋白抗體包裝100g
PCID1蛋白抗體包裝25g
PDZ結(jié)構(gòu)域PDZK6蛋白抗體包裝500g
吡哆激抗體包裝25g
PDZ結(jié)構(gòu)域PDZK1蛋白抗體包裝5g
前列腺癌激活蛋白抗體包裝100g
PDZ結(jié)構(gòu)域PDZK4蛋白抗體包裝25g
PDZ結(jié)構(gòu)域PDZK7蛋白抗體包裝5g
PDZ結(jié)構(gòu)域PDZK8蛋白抗體包裝1g
磷化蛋白酪激9抗體包裝5g
過(guò)氧化還原5/6抗體包裝100g