詳細介紹
以下是細胞生物學(xué)試劑的詳細介紹:
中文名稱 | 英文名稱 | 產(chǎn)品規(guī)格 | 發(fā)貨周期 |
10ml | 1~3天 |
公司產(chǎn)品僅用于科研細胞培養(yǎng)操作規(guī)程:
一.培養(yǎng)基及培養(yǎng)凍存條件準(zhǔn)備:
1)準(zhǔn)備RPMI-1640培養(yǎng)基(RPMI-1640:GIBCO),90%;優(yōu)質(zhì)胎牛血清,10%。
2)培養(yǎng)條件: 氣相:空氣,95%;二氧化碳,5%。 溫度:37℃,培養(yǎng)箱濕度為70%-80%。
3)凍存液:90%血清,10%DMSO,現(xiàn)用現(xiàn)配,液氮儲存。
二.細胞處理:
1)復(fù)蘇細胞:將含有1mL細胞懸液的凍存管迅速放入37℃水浴中(水面要低于凍存管蓋部)搖晃解凍,移入事先準(zhǔn)備好的含有4mL培養(yǎng)基的15ml離心管中混合均勻。在1000RPM條件下離心4分鐘,棄去上清液,加入1mL培養(yǎng)基后吹勻。然后將所有細胞懸液移入含有5ml培養(yǎng)基的培養(yǎng)瓶中培養(yǎng)過夜。第二天換液并檢查細胞密度。
2)細胞傳代:如果細胞密度達80%-90%,即可進行傳代培養(yǎng)。
對于懸浮細胞,傳代可參考以下方法:
方法一:收集細胞,1000RPM,常溫條件下離心5分鐘,棄去上清液,補加1-2mL培養(yǎng)液后吹勻,將細胞懸液按1:2到1:5的比例分到新的含8ml培養(yǎng)基的新皿中或者瓶中。
商品介紹:
用途: 流式細胞術(shù)檢測細胞DNA含量,通過染色定量分析DNA,亦可通過熒光顯微鏡觀察形態(tài)變化。 注意事項: AO(Acridine Orange)在低濃度下與DNA結(jié)合較佳,工作濃度8.5ug/ml 儲存條件:4℃,避光,12個月 |
操作步驟:
1. 樣品染色
1) 將Binding Buffer(10×)稀釋成1×Binding buffer工作液備用(1ml Binding Buffer(10×)需加入9ml無菌去離子水)。
2) 對于懸浮細胞,500-1000g離心5min收集細胞。
對于貼壁細胞,要用不含EDTA的胰酶消化細胞,胰酶消化時間不宜過長或過短,最好是在輕輕吹打可以使貼壁細胞吹打下來時,加入細胞培養(yǎng)液,將細胞輕輕吹打下來,轉(zhuǎn)移到離心管內(nèi),500-1000g離心5min收集細胞。
3) 收集細胞后,加入預(yù)冷PBS溶液輕搖或用移液器輕柔吹打洗滌,離心收集細胞,共洗滌兩次。
4) 在細胞沉淀中加入1×Binding buffer工作液,重懸細胞,使細胞濃度達到1×106 cell/ml。
5) 吸取100μl細胞懸液(細胞總數(shù)為1×105 cell)至一新管中,加入5μl Annexin V-FITC和5-10 μl PI,輕輕混勻,室溫避光孵育15min。
2. 樣品檢測
1) 流式細胞儀檢測:
染色孵育后,每管加入400μl 1×Binding Buffer工作液,混勻后使用流式細胞儀檢測(1小時內(nèi)檢測)。
建議設(shè)置經(jīng)凋亡誘導(dǎo)的正常細胞、PI單染和Annexin V-FITC單染3個對照組,正常細胞組可作為熒光補償調(diào)節(jié)去除光譜重疊和設(shè)定十字門的位置。結(jié)果可用CellQuest等軟件進行分析,繪制雙色散點圖(two-color dot plot),F(xiàn)ITC為橫坐標(biāo),PI為縱坐標(biāo)。Annexin V-FITC和PI聯(lián)合使用時,活細胞僅有很低強度的背景熒光,早期凋亡細胞僅有較強的綠色熒光,晚期凋亡細胞有綠色和紅色雙重?zé)晒狻?/span>
2) 熒光顯微鏡檢測:
染色孵育后涂片,顯微鏡下觀察。使用熒光顯微鏡上的藍光和綠光通道分別觀察FITC和PI。被Annexin V-FITC結(jié)合的細胞顯示漿膜上有綠色光環(huán)。喪失細胞膜完整性的細胞,細胞核顯示紅色,膜上有綠色光環(huán)。
去斑蝥鈉(標(biāo)準(zhǔn)品)英文名稱: 1-Tridecene γ-微管蛋白GCP4抗體包裝5g
去烏藥堿鹽鹽(標(biāo)準(zhǔn)品)英文名稱: 1-Tetradeceneγ-微管蛋白GCP6抗體包裝500g
去氧基姜黃英文名稱: 1-Pentadeceneβ-葡萄糖苷1抗體包裝100ml
去氧基姜黃(標(biāo)準(zhǔn)品)英文名稱: 1-Hexadecene甘裂解系統(tǒng)H蛋白抗體包裝25ml
去氧基麻醉椒英文名稱: 1-Heptadecene15號染色體開放閱讀框58抗體包裝25g
去異波爾定(標(biāo)準(zhǔn)品)英文名稱: 1-Nonadecene淀粉結(jié)合域蛋白1抗體包裝5g
去澤拉木(標(biāo)準(zhǔn)品)英文名稱: 2-Bromo-4'-phenylacetophenone延伸因子G1抗體包裝100g
去芹菜糖桔梗皂苷D(標(biāo)準(zhǔn)品)英文名稱: Dabsyl Chloride β葡萄糖苷2抗體包裝25g
去芹糖桔梗皂苷D3英文名稱: O-4-Nitrobenzylhydroxylamine Hydrochlorideβ葡萄糖苷3抗體包裝100g
去氫厄弗酚英文名稱: 7-Acetoxy-4-bromomethylcoumarin膠質(zhì)母瘤相關(guān)蛋白GBAS抗體包裝1g
去氫二異丁香酚(標(biāo)準(zhǔn)品)英文名稱: Br-Mmc (=4-Bromomethyl-7-methoxycoumarin)紅糖苷α1抗體包裝25g
去氫茯苓英文名稱: 3-Bromomethyl-7-methoxy-1,4-benzoxazin-2-one G蛋白結(jié)合蛋白1抗體包裝5g
去氫鉤藤堿(標(biāo)準(zhǔn)品)英文名稱: 4-Bromomethyl-6,7-dimethoxycoumarin G蛋白結(jié)合蛋白4抗體包裝1g
去氫毛鉤藤堿英文名稱: DBD-CO-Hz [=4-(N,N-Dimethylaminosulfonyl)-7-(N-hydrazinocarbonylmethyl-N-methyl)amino-2,1,3-benzoxadiazole] G蛋白結(jié)合蛋白6體包裝25g
去氫木香內(nèi)酯(標(biāo)準(zhǔn)品)英文名稱: NBD-CO-Hz [=4-(N-Hydrazinocarbonylmethyl-N-methylamino)-7-nitro-2,1,3-benzoxadiazole] 鳥苷環(huán)化激活蛋白1抗體包裝5g
結(jié)核分枝桿菌Mycobacterium│tuberculosis 質(zhì)量規(guī)格:>99%,標(biāo)準(zhǔn)品,一合物凝溶膠蛋白試劑盒木蝴蝶苷A;Oroxin A
皺蓋假芝(血芝)Amauroderma│rude 質(zhì)量規(guī)格:>99%,BR,一合物凝聚試劑盒漏蘆甾;Rhapontisterone
斜臥青霉Penicillium│decumbens 質(zhì)量規(guī)格:>99%,USP31,可用于培養(yǎng)檸檬合成,線粒體試劑盒羅漢果甜IV;Mogroside IV
AO染色液(1mg/ml)暗蓋淡鵝膏 1,3-二甲基尿酸彈性蛋白抑制劑Elisa
巨大芽胞桿 3-氨基-2-羥基吡啶甲胎蛋白異質(zhì)體Elisa
耐久腸球 2-氨基-5-PSD95Elisa
塔賓曲霉 4-溴叔丁酯核心結(jié)合因子β亞基Elisa
分枝節(jié)桿 Chloro[(S)-(-)-5,5'-bis(diphenylphosphino)-4,4'-bi磷酸化蛋白酪氨酸激JAK-2Elisa
淺天青鏈霉 3-溴-1-苯并呋喃髓觸發(fā)受體2Elisa
Sporosarcina 4-乙酸乙酯白血病抑制因子受體Elisa
盤長孢狀盤孢 米索前列固調(diào)節(jié)因子結(jié)合蛋白2Elisa
淺白隱球酵母 8-溴-4-羥基-2-三氟甲基喹啉周期I2Elisa
豌豆根瘤 甲基4-乙酰-2-乙氧基苯甲脂周期蛋白E2Elisa
棉阿舒囊霉 6-溴-1-甲基吲唑C反應(yīng)蛋白單體Elisa
Lactobacillus brevis 3-溴-2-三氟甲基吡啶雙烯雌酚Elisa
檸檬色短小桿 2-巰基-S-硫代苯甲酰乙酸己烷雌酚Elisa
游動放線* 酸-S-糠基硫代酯假尿苷酸合1Elisa
格氏嗜鹽堿桿 2-氨基-4-氯苯甲酰β-羥基類固脫氫2Elisa