商品介紹:
JZL184是MAGL的有效選擇性抑制劑,IC50值為8nM,對(duì)FAAH的IC50值為4uM。 注:本品僅可用于科研實(shí)驗(yàn),嚴(yán)禁用于臨床醫(yī)療及其他用途! CAS號(hào):1101854-58-3 純度:98.82% 分子式:C??H??N?O? 分子量:520.49 儲(chǔ)存條件:-20℃,有效期2年,溶入溶劑后-20℃請(qǐng)盡量在一個(gè)月內(nèi)使用。 |
以下是細(xì)胞生物學(xué)試劑的詳細(xì)介紹:
中文名稱 | 英文名稱 | 產(chǎn)品規(guī)格 | 發(fā)貨周期 |
MAGL抑制劑(JZL 184) | JZL 184 | 1mL(10mM)|10mg|50mg|100mg | 1~3天 |
操作步驟:
1. 樣品染色
1) 將Binding Buffer(10×)稀釋成1×Binding buffer工作液備用(1ml Binding Buffer(10×)需加入9ml無(wú)菌去離子水)。
2) 對(duì)于懸浮細(xì)胞,500-1000g離心5min收集細(xì)胞。
對(duì)于貼壁細(xì)胞,要用不含EDTA的胰酶消化細(xì)胞,胰酶消化時(shí)間不宜過(guò)長(zhǎng)或過(guò)短,最好是在輕輕吹打可以使貼壁細(xì)胞吹打下來(lái)時(shí),加入細(xì)胞培養(yǎng)液,將細(xì)胞輕輕吹打下來(lái),轉(zhuǎn)移到離心管內(nèi),500-1000g離心5min收集細(xì)胞。
3) 收集細(xì)胞后,加入預(yù)冷PBS溶液輕搖或用移液器輕柔吹打洗滌,離心收集細(xì)胞,共洗滌兩次。
4) 在細(xì)胞沉淀中加入1×Binding buffer工作液,重懸細(xì)胞,使細(xì)胞濃度達(dá)到1×106 cell/ml。
5) 吸取100μl細(xì)胞懸液(細(xì)胞總數(shù)為1×105 cell)至一新管中,加入5μl Annexin V-FITC和5-10 μl PI,輕輕混勻,室溫避光孵育15min。
2. 樣品檢測(cè)
1) 流式細(xì)胞儀檢測(cè):
染色孵育后,每管加入400μl 1×Binding Buffer工作液,混勻后使用流式細(xì)胞儀檢測(cè)(1小時(shí)內(nèi)檢測(cè))。
建議設(shè)置經(jīng)凋亡誘導(dǎo)的正常細(xì)胞、PI單染和Annexin V-FITC單染3個(gè)對(duì)照組,正常細(xì)胞組可作為熒光補(bǔ)償調(diào)節(jié)去除光譜重疊和設(shè)定十字門的位置。結(jié)果可用CellQuest等軟件進(jìn)行分析,繪制雙色散點(diǎn)圖(two-color dot plot),F(xiàn)ITC為橫坐標(biāo),PI為縱坐標(biāo)。Annexin V-FITC和PI聯(lián)合使用時(shí),活細(xì)胞僅有很低強(qiáng)度的背景熒光,早期凋亡細(xì)胞僅有較強(qiáng)的綠色熒光,晚期凋亡細(xì)胞有綠色和紅色雙重?zé)晒狻?/span>
2) 熒光顯微鏡檢測(cè):
染色孵育后涂片,顯微鏡下觀察。使用熒光顯微鏡上的藍(lán)光和綠光通道分別觀察FITC和PI。被Annexin V-FITC結(jié)合的細(xì)胞顯示漿膜上有綠色光環(huán)。喪失細(xì)胞膜完整性的細(xì)胞,細(xì)胞核顯示紅色,膜上有綠色光環(huán)。
公司產(chǎn)品僅用于科研細(xì)胞培養(yǎng)操作規(guī)程:
一.培養(yǎng)基及培養(yǎng)凍存條件準(zhǔn)備:
1)準(zhǔn)備RPMI-1640培養(yǎng)基(RPMI-1640:GIBCO),90%;優(yōu)質(zhì)胎牛血清,10%。
2)培養(yǎng)條件: 氣相:空氣,95%;二氧化碳,5%。 溫度:37℃,培養(yǎng)箱濕度為70%-80%。
3)凍存液:90%血清,10%DMSO,現(xiàn)用現(xiàn)配,液氮儲(chǔ)存。
二.細(xì)胞處理:
1)復(fù)蘇細(xì)胞:將含有1mL細(xì)胞懸液的凍存管迅速放入37℃水浴中(水面要低于凍存管蓋部)搖晃解凍,移入事先準(zhǔn)備好的含有4mL培養(yǎng)基的15ml離心管中混合均勻。在1000RPM條件下離心4分鐘,棄去上清液,加入1mL培養(yǎng)基后吹勻。然后將所有細(xì)胞懸液移入含有5ml培養(yǎng)基的培養(yǎng)瓶中培養(yǎng)過(guò)夜。第二天換液并檢查細(xì)胞密度。
2)細(xì)胞傳代:如果細(xì)胞密度達(dá)80%-90%,即可進(jìn)行傳代培養(yǎng)。
對(duì)于懸浮細(xì)胞,傳代可參考以下方法:
方法一:收集細(xì)胞,1000RPM,常溫條件下離心5分鐘,棄去上清液,補(bǔ)加1-2mL培養(yǎng)液后吹勻,將細(xì)胞懸液按1:2到1:5的比例分到新的含8ml培養(yǎng)基的新皿中或者瓶中。
類干酪乳桿菌凋亡信號(hào)調(diào)節(jié)激1抗體Human NUDCD3 ELISA Kit軟骨糖蛋白39(HC gp-39)ELISA Kit
抗生鏈霉菌NFKB激活蛋白1抗體Human GNRH1(Progonadoliberin-1) ELISA Kit軟骨寡聚基質(zhì)蛋白(COMP)ELISA Kit
熒光假單胞菌磷化Myc基因相關(guān)X因子抗體Human NUDT10 ELISA Kit軟骨寡聚蛋白(COMP)ELISA Kit
出芽短梗霉亞甲基四氫葉還原MTHFR抗體Human NUDT11(Diphosphoinositol polyphosphate phosphohydrolase 3-beta) ELISA Kit乳脂肪球EGF因子蛋白(MFGE8)ELISA Kit
香菇MEK1/MAPKK1抗體(N-端)Human NUDT16 ELISA Kit癌易感蛋白2(BRCA-2)ELISA Kit
三隔鐮刀菌褪黑受體1B抗體Human NUDT12 ELISA Kit癌易感蛋白1(BRCA-1)ELISA Kit
天格爾黃桿菌多藥耐藥相關(guān)蛋白4抗體Human NUDT19 ELISA Kit乳鐵蛋白(LTF)ELISA Kit
柑橘藻斑病*多藥耐藥相關(guān)蛋白5抗體Human NUDT2 ELISA Kit乳鐵傳遞蛋白/乳鐵蛋白抗體IgG(LF/LTF Ab-Ig)ELISA Kit
紡錘形賴芽孢桿菌線粒體內(nèi)膜蛋白抗體Human NUDT2 ELISA Kit乳鐵傳遞蛋白/乳鐵蛋白(LF/LTF)ELISA Kit
空泡單胞菌基質(zhì)金屬蛋白-8/膠原2抗體Human NUDT16 ELISA Kit乳糖凝集8(LGALS8)ELISA Kit
地衣芽孢桿菌基質(zhì)金屬蛋白11抗體Human NUAK2 ELISA Kit乳脫氫A(LDHA)ELISA Kit
食蔗糖葡糖醋桿菌基質(zhì)金屬蛋白-12抗體Human NUAK2 ELISA Kit乳脫氫(LDH)ELISA Kit
釀酒酵母基質(zhì)金屬蛋白-15抗體Human NUDT19 ELISA Kit乳清磷核糖轉(zhuǎn)移(OPRT)ELISA Kit
炭疽沉淀血清基質(zhì)金屬蛋白-16抗體Human NUB1 ELISA Kit乳過(guò)氧化物(LPO)ELISA Kit
膠胞(可訂購(gòu))基質(zhì)金屬蛋白-17抗體Human NUDT21 ELISA Kit肉瘤抗原1(SAGE1)ELISA Kit
皮落青霉膜突蛋白抗體Human NUBP2(Nucleotide-binding protein 2) ELISA Kit肉堿脂酰轉(zhuǎn)移(CACT)ELISA Kit
嗜熱脂肪地芽抱桿菌Geobacillus│stearothermophilus 質(zhì)量規(guī)格:藥物研究配體五味子
南瓜細(xì)基格孢Ulocladium│cucurbitae 質(zhì)量規(guī)格:藥物研究配體五味子乙
傳染性支氣管炎病毒Coronavirus│Infectious bronchitis virus 質(zhì)量規(guī)格:>98.0%(N)五味子
MAGL抑制劑(JZL 184)DcR1/TNFRSF10C 腫瘤壞死因子配體超家族成員10C丁酯 分析標(biāo)準(zhǔn)品
DcR2/CD264/TNFRSF10D 誘捕受體2抗體酯 GCS,≥99.5% (GC)
TNFRSF12A 腫瘤壞死因子配體超家族成員12A抗體酯 CP,98%
DcR3/TR6 誘捕受體3抗體酯 AR,99%
DDAH-II 雙精氨水解2抗體酯 ≥99.7% (GC)
D-DIMER 交聯(lián)纖維蛋白二聚體抗體酯 ≥98%, FCC, FG
DDX58 DDX58抗體酯 GCS,≥99.5% (GC)
DDB1 損傷DNA結(jié)合蛋白1抗體酯 99%