以下是細(xì)胞生物學(xué)試劑的詳細(xì)介紹:
商品介紹:
BVT2733是11_beta_-HSD1脫氫酶抑制劑。 注:本品僅可用于科研實(shí)驗(yàn),嚴(yán)禁用于臨床醫(yī)療及其他用途! CAS號(hào):376640-41-4 分子量:428.96 儲(chǔ)存條件:-20℃,有效期2年,溶入溶劑后-20℃請(qǐng)盡量在一個(gè)月內(nèi)使用。 |
公司產(chǎn)品僅用于科研細(xì)胞培養(yǎng)操作規(guī)程:
一.培養(yǎng)基及培養(yǎng)凍存條件準(zhǔn)備:
1)準(zhǔn)備RPMI-1640培養(yǎng)基(RPMI-1640:GIBCO),90%;優(yōu)質(zhì)胎牛血清,10%。
2)培養(yǎng)條件: 氣相:空氣,95%;二氧化碳,5%。 溫度:37℃,培養(yǎng)箱濕度為70%-80%。
3)凍存液:90%血清,10%DMSO,現(xiàn)用現(xiàn)配,液氮儲(chǔ)存。
二.細(xì)胞處理:
1)復(fù)蘇細(xì)胞:將含有1mL細(xì)胞懸液的凍存管迅速放入37℃水浴中(水面要低于凍存管蓋部)搖晃解凍,移入事先準(zhǔn)備好的含有4mL培養(yǎng)基的15ml離心管中混合均勻。在1000RPM條件下離心4分鐘,棄去上清液,加入1mL培養(yǎng)基后吹勻。然后將所有細(xì)胞懸液移入含有5ml培養(yǎng)基的培養(yǎng)瓶中培養(yǎng)過(guò)夜。第二天換液并檢查細(xì)胞密度。
2)細(xì)胞傳代:如果細(xì)胞密度達(dá)80%-90%,即可進(jìn)行傳代培養(yǎng)。
對(duì)于懸浮細(xì)胞,傳代可參考以下方法:
方法一:收集細(xì)胞,1000RPM,常溫條件下離心5分鐘,棄去上清液,補(bǔ)加1-2mL培養(yǎng)液后吹勻,將細(xì)胞懸液按1:2到1:5的比例分到新的含8ml培養(yǎng)基的新皿中或者瓶中。
操作步驟:
1. 樣品染色
1) 將Binding Buffer(10×)稀釋成1×Binding buffer工作液備用(1ml Binding Buffer(10×)需加入9ml無(wú)菌去離子水)。
2) 對(duì)于懸浮細(xì)胞,500-1000g離心5min收集細(xì)胞。
對(duì)于貼壁細(xì)胞,要用不含EDTA的胰酶消化細(xì)胞,胰酶消化時(shí)間不宜過(guò)長(zhǎng)或過(guò)短,最好是在輕輕吹打可以使貼壁細(xì)胞吹打下來(lái)時(shí),加入細(xì)胞培養(yǎng)液,將細(xì)胞輕輕吹打下來(lái),轉(zhuǎn)移到離心管內(nèi),500-1000g離心5min收集細(xì)胞。
3) 收集細(xì)胞后,加入預(yù)冷PBS溶液輕搖或用移液器輕柔吹打洗滌,離心收集細(xì)胞,共洗滌兩次。
4) 在細(xì)胞沉淀中加入1×Binding buffer工作液,重懸細(xì)胞,使細(xì)胞濃度達(dá)到1×106 cell/ml。
5) 吸取100μl細(xì)胞懸液(細(xì)胞總數(shù)為1×105 cell)至一新管中,加入5μl Annexin V-FITC和5-10 μl PI,輕輕混勻,室溫避光孵育15min。
2. 樣品檢測(cè)
1) 流式細(xì)胞儀檢測(cè):
染色孵育后,每管加入400μl 1×Binding Buffer工作液,混勻后使用流式細(xì)胞儀檢測(cè)(1小時(shí)內(nèi)檢測(cè))。
建議設(shè)置經(jīng)凋亡誘導(dǎo)的正常細(xì)胞、PI單染和Annexin V-FITC單染3個(gè)對(duì)照組,正常細(xì)胞組可作為熒光補(bǔ)償調(diào)節(jié)去除光譜重疊和設(shè)定十字門(mén)的位置。結(jié)果可用CellQuest等軟件進(jìn)行分析,繪制雙色散點(diǎn)圖(two-color dot plot),F(xiàn)ITC為橫坐標(biāo),PI為縱坐標(biāo)。Annexin V-FITC和PI聯(lián)合使用時(shí),活細(xì)胞僅有很低強(qiáng)度的背景熒光,早期凋亡細(xì)胞僅有較強(qiáng)的綠色熒光,晚期凋亡細(xì)胞有綠色和紅色雙重?zé)晒狻?/span>
2) 熒光顯微鏡檢測(cè):
染色孵育后涂片,顯微鏡下觀察。使用熒光顯微鏡上的藍(lán)光和綠光通道分別觀察FITC和PI。被Annexin V-FITC結(jié)合的細(xì)胞顯示漿膜上有綠色光環(huán)。喪失細(xì)胞膜完整性的細(xì)胞,細(xì)胞核顯示紅色,膜上有綠色光環(huán)。
白僵菌21號(hào)染色體開(kāi)放閱讀框62抗體Human VACM-1(Cullin 5) ELISA Kit人血管緊張1-7(Ang1-7)免疫試劑盒
傳染性喉氣管炎病磷化胞漿型磷脂A2抗體Human TSC2(Tuberous Sclerosis Protein 2) ELISA Kit人血管活性腸肽(VIP)免疫試劑盒
釀酒酵母9號(hào)染色體開(kāi)放閱讀框46抗體Human Rbx2(RNF7) ELISA Kit人血管動(dòng)蛋白(AMOT)免疫試劑盒
矩圓黑盤(pán)孢20號(hào)染色體開(kāi)放閱讀框103抗體Human CD72(B-cell differentiation antigen) ELISA Kit人旋毛蟲(chóng)抗體(Trichinella Ab)免疫試劑盒
硬水黃桿菌9號(hào)染色體開(kāi)放閱讀框86抗體Human anti 21-OH Ab(anti 21-hydroxylase antibody) ELISA Kit人溴脫氧核苷尿(BrdU)免疫試劑盒
中型艾美耳球蟲(chóng)鈣粘附分子18抗體Human Asprosin ELISA Kit人雄烯二(ASD)免疫試劑盒
平菇CD276抗體Human 8-iso-PGF2α(8-isoprostane) ELISA Kit人雄烯二免疫試劑盒
粘質(zhì)沙21號(hào)染色體開(kāi)放閱讀框25抗體Human anti-EPO antibody(anti-Erythropoietin antibody) ELISA Kit人雄激受體(AR)免疫試劑盒
球孢白僵菌22號(hào)染色體開(kāi)放閱讀框36抗體Human fFN(fetal Fibronectin) ELISA Kit人胸腺依賴性抗原(TD-Ag)免疫試劑盒
假蜜環(huán)菌(亮菌)補(bǔ)體組分1q子成分樣蛋白1抗體Human LIPE(Hormone-sensitive lipase) ELISA Kit人胸腺五肽(TP-5)免疫試劑盒
1B2A3 CD44抗體Human 2, 5-OAS(2, 5-oligoadenylate synthetase) ELISA Kit人胸腺肽β4(Thymosin β4)免疫試劑盒
黃薄芝9號(hào)染色體開(kāi)放閱讀框114抗體Human MDA(Malonyldehyde) ELISA Kit人胸腺肽α1(Thymosin α1)免疫試劑盒
大腸桿菌CD8β鏈(CD8-β)抗體Human IL-12RB1(Interleukin-12 receptor subunit beta-1 78) ELISA Kit人胸腺嘧啶核苷磷化(TP)免疫試劑盒
銅綠假單胞菌(綠膿桿菌)6號(hào)染色體開(kāi)放閱讀框1抗體Human NPTN(Neuroplastin) ELISA Kit人胸腺基質(zhì)淋巴生成(TSLP)免疫試劑盒
考克氏菌γ晶狀體蛋白S/γS-crystallin抗體Human AP12(Apelin 12) ELISA Kit人胸腺活化調(diào)節(jié)趨化因子(TARC/CCL17)免疫試劑盒
解脂假絲酵母解脂變種9號(hào)染色體開(kāi)放閱讀框72抗體Human HGS(Hepatocyte growth factor-regulated tyrosine kinase substRate) ELISA Kit人胸腺非依賴性抗原(TI-Ag)免疫試劑盒
勞地毛霉Mucor│lausannensis 質(zhì)量規(guī)格:>98%,BREB病衣殼抗原試劑盒4-磺酰基肼鹽鹽
小孢矛束霉Doratomyces│microsporus 質(zhì)量規(guī)格:>98%,進(jìn)分EB病衣殼抗原試劑盒茴香腦
#膠質(zhì)芽孢桿菌Bacillus│mucilaginosus Avakyan et al 1998 質(zhì)量規(guī)格:>98%(HPLC),BREB病核抗原3A抗體試劑盒高熊果酚苷
11 beta-HSD1脫氫酶抑制劑(BVT 2733)2,2'-聯(lián)四唑-1,1'-二基(洛沙坦雜質(zhì))英文名稱: 1-BromopyreneT凋亡相關(guān)蛋白TDAG51抗體包裝500g
2,2-二基-4-異基-1,3-并二茂英文名稱: 4-Bromopyrene蛋白調(diào)解因子9抗體包裝25g
2,3,4-三-O-酰-泊酚-β-D-葡萄糖苷...英文名稱: 1,6-Diaminopyrene胰腺抗體包裝5g
2,3-去亞異基托吡酯英文名稱: 1,3-Diaminopyrene纖溶相關(guān)蛋白B2抗體包裝1g
2,3-脫氫辛伐他汀鈉鹽英文名稱: 2,7-Di-tert-butylpyrene多聚合α/β/γ抗體包裝5g
2,4-二(三基硅烷基)-5-尿嘧啶英文名稱: 1-Nitropyrene含脯突觸相關(guān)蛋白相互作用蛋白1抗體包裝1g
2,4-二基-6-基-7-蝶啶英文名稱: 4-Nitropyrene外周蛋白2抗體包裝5g
2-(R)-[1-(R)-(3,5-二(三基)基...英文名稱: 2-Aminofluorene區(qū)帶蛋白PZP抗體包裝100mg
2-[(2,6-二)基]英文名稱: 2-Amino-9-fluorenone蛋白香葉烯基轉(zhuǎn)移1β(FTβ)抗體包裝1g
2-(巰基)腺苷 5'-三磷四鈉鹽合物英文名稱: 2-Amino-9,9-dimethylfluorene原鈣粘蛋白15抗體包裝250mg
2-基-5,6-二-3(4H)-喹唑啉醋(阿那格...英文名稱: 9-Bromofluorene原鈣粘蛋白β2抗體包裝1g
2-基-6,8-二羥基嘌呤鹽鹽英文名稱: 2-Bromofluorene原鈣粘蛋白β4抗體包裝25g
2-基-6-羥基-8-巰基嘌呤英文名稱: 2-Bromo-9-fluorenone原鈣粘蛋白γ10抗體包裝5g
2-基-6-巰基嘌呤-9-D-核苷合物英文名稱: 2-Bromo-9,9-dimethylfluorene原鈣粘蛋白γA4抗體包裝1g
2-基腺苷英文名稱: 2,7-Diaminofluorene原鈣粘蛋白γA2抗體包裝25g