S1P1激動劑(AKP-11)公司正在出售的產(chǎn)品：Anti-DCP /HRP 辣根過氧化物酶標(biāo)記異常凝血酶原/脫-γ-羧基凝血酶原抗體IgGMulti-class antibodies規(guī)格： 0.2ml
Anti-MAFbx/Fbx32/Atrogin-1/FITC 熒光素標(biāo)記泛素蛋白連接酶抗體IgGMulti-class antibodies規(guī)格： 0.2ml
Rhesus antibody R

以下是細(xì)胞生物學(xué)試劑的詳細(xì)介紹：

 

公司產(chǎn)品僅用于科研細(xì)胞培養(yǎng)操作規(guī)程：

一．培養(yǎng)基及培養(yǎng)凍存條件準(zhǔn)備：

1）準(zhǔn)備RPMI-1640培養(yǎng)基(RPMI-1640：GIBCO)，90%；優(yōu)質(zhì)胎牛血清，10%。

2）培養(yǎng)條件： 氣相：空氣，95%；二氧化碳，5%。 溫度：37℃，培養(yǎng)箱濕度為70%-80%。

3）凍存液：90%血清，10%DMSO，現(xiàn)用現(xiàn)配，液氮儲存。

二．細(xì)胞處理：

1）復(fù)蘇細(xì)胞：將含有1mL細(xì)胞懸液的凍存管迅速放入37℃水浴中（水面要低于凍存管蓋部）搖晃解凍，移入事先準(zhǔn)備好的含有4mL培養(yǎng)基的15ml離心管中混合均勻。在1000RPM條件下離心4分鐘，棄去上清液，加入1mL培養(yǎng)基后吹勻。然后將所有細(xì)胞懸液移入含有5ml培養(yǎng)基的培養(yǎng)瓶中培養(yǎng)過夜。第二天換液并檢查細(xì)胞密度。

2）細(xì)胞傳代：如果細(xì)胞密度達(dá)80%-90%，即可進(jìn)行傳代培養(yǎng)。

對于懸浮細(xì)胞，傳代可參考以下方法：

方法一：收集細(xì)胞，1000RPM，常溫條件下離心5分鐘，棄去上清液，補(bǔ)加1-2mL培養(yǎng)液后吹勻，將細(xì)胞懸液按1：2到1：5的比例分到新的含8ml培養(yǎng)基的新皿中或者瓶中。
商品介紹：

操作步驟：

1. 樣品染色

1) 將Binding Buffer（10×）稀釋成1×Binding buffer工作液備用（1ml Binding Buffer（10×）需加入9ml無菌去離子水）。

2) 對于懸浮細(xì)胞，500-1000g離心5min收集細(xì)胞。

對于貼壁細(xì)胞，要用不含EDTA的胰酶消化細(xì)胞，胰酶消化時間不宜過長或過短，最好是在輕輕吹打可以使貼壁細(xì)胞吹打下來時，加入細(xì)胞培養(yǎng)液，將細(xì)胞輕輕吹打下來，轉(zhuǎn)移到離心管內(nèi)，500-1000g離心5min收集細(xì)胞。

3) 收集細(xì)胞后，加入預(yù)冷PBS溶液輕搖或用移液器輕柔吹打洗滌，離心收集細(xì)胞，共洗滌兩次。

4) 在細(xì)胞沉淀中加入1×Binding buffer工作液，重懸細(xì)胞，使細(xì)胞濃度達(dá)到1×106 cell/ml。

5) 吸取100μl細(xì)胞懸液（細(xì)胞總數(shù)為1×105 cell）至一新管中，加入5μl Annexin V-FITC和5-10 μl PI，輕輕混勻，室溫避光孵育15min。

2. 樣品檢測

1) 流式細(xì)胞儀檢測：

染色孵育后，每管加入400μl 1×Binding Buffer工作液，混勻后使用流式細(xì)胞儀檢測（1小時內(nèi)檢測）。

建議設(shè)置經(jīng)凋亡誘導(dǎo)的正常細(xì)胞、PI單染和Annexin V-FITC單染3個對照組，正常細(xì)胞組可作為熒光補(bǔ)償調(diào)節(jié)去除光譜重疊和設(shè)定十字門的位置。結(jié)果可用CellQuest等軟件進(jìn)行分析，繪制雙色散點圖（two-color dot plot），F(xiàn)ITC為橫坐標(biāo)，PI為縱坐標(biāo)。Annexin V-FITC和PI聯(lián)合使用時，活細(xì)胞僅有很低強(qiáng)度的背景熒光，早期凋亡細(xì)胞僅有較強(qiáng)的綠色熒光，晚期凋亡細(xì)胞有綠色和紅色雙重?zé)晒狻?/span>

2) 熒光顯微鏡檢測：

染色孵育后涂片，顯微鏡下觀察。使用熒光顯微鏡上的藍(lán)光和綠光通道分別觀察FITC和PI。被Annexin V-FITC結(jié)合的細(xì)胞顯示漿膜上有綠色光環(huán)。喪失細(xì)胞膜完整性的細(xì)胞，細(xì)胞核顯示紅色，膜上有綠色光環(huán)。

微小桿菌屬FAM135B蛋白抗體Human ZNF174 ELISA Kit雞糖皮質(zhì)激(GC)免疫試劑盒

Pseudofusicoccum stromaticum“衰老關(guān)鍵蛋白"抗體Human ZNF259 ELISA Kit雞碳酐(CA)免疫試劑盒

米色擲孢酵母促卵泡激受體抗體Human ZNF18 ELISA Kit雞髓磷脂堿性蛋白(MBP)免疫試劑盒

釀酒酵母成纖維生長因子12抗體Human ZNF271 ELISA Kit雞瘦(LEP)免疫試劑盒

瑟氏泰勒蟲（兩當(dāng)株）成纖維生長因子14抗體Human ZNF2 ELISA Kit雞生長激(GH)免疫試劑盒

淡紫灰鏈霉菌產(chǎn)褐色變種腦型脂肪結(jié)合蛋白抗體Human ZNF277 ELISA Kit雞腎(Renin)免疫試劑盒

藤倉鐮孢FAM96B蛋白抗體Human ZNF195 ELISA Kit雞腎上腺髓質(zhì)(ADM)免疫試劑盒

Flavihumibacter腦胚胎鋅指樣蛋白1抗體Human ZNF284 ELISA Kit雞腎上腺(EPI)免疫試劑盒

枯草芽孢桿菌FAM29蛋白抗體Human TYR(Tyrosinase) ELISA Kit雞神經(jīng)膠質(zhì)纖維性蛋白(GFAP)免疫試劑盒

金針菇MaFF相關(guān)蛋白抗體Human ZNF211 ELISA Kit雞神經(jīng)調(diào)節(jié)蛋白1(NRG1)免疫試劑盒

茶擬盤多毛孢7抗體Human ZNF287 ELISA Kit雞狀腺原(T3)免疫試劑盒

西唐氏鏈霉菌FEM1B抗體Human ZNF215 ELISA Kit雞溶菌(LZM)免疫試劑盒

胡椒枯萎病纖維母生長因子3抗體Human ZNF3 ELISA Kit雞熱休克蛋白90(HSP-90)免疫試劑盒

地衣芽孢桿菌纖維母生長因子4抗體Human ZNF23 ELISA Kit雞熱休克蛋白72(HSP-72)免疫試劑盒

串珠鐮孢菌FRA-1蛋白抗體Human ZNF232 ELISA Kit雞熱休克蛋白70(HSP-70)免疫試劑盒

繩狀籃狀菌精神發(fā)育遲滯相關(guān)蛋白抗體Human ZNF238 ELISA Kit雞熱休克蛋白60(Hsp-60)免疫試劑盒

地芽孢桿菌Geobacillus│sp. 質(zhì)量規(guī)格：1000μg/ml,基體:1.0 mol/L HNO3Lup-20(29)-en-28-oic

根瘤菌Rhizobium│sp. 質(zhì)量規(guī)格：100µg/mL,基體:1%HNO3常春藤苷H;灰氈毛忍冬次皂苷

蠟狀芽孢桿菌Bacillus│cereus 質(zhì)量規(guī)格：1000μg/mlHederacolchiside A1
S1P1激動劑(AKP-11)鹽恩諾沙星（標(biāo)準(zhǔn)品）英文名稱： Parthenolide蓬亂蛋白1抗體包裝5g

鹽二弗林（標(biāo)準(zhǔn)品）英文名稱： Parthenolide肌Dystrobrevin β蛋白抗體包裝1g

鹽二雙胍(標(biāo)準(zhǔn)品)英文名稱： Rizatriptan異常凝血原/脫-γ-羧基凝血原抗體包裝5g

鹽二雙胍（標(biāo)準(zhǔn)品）英文名稱： Darunavir Ethanolate結(jié)蛋白抗體包裝1g

鹽二氧（標(biāo)準(zhǔn)品）英文名稱： VilazodoneDISC1 C端抗體包裝5g

鹽伐昔洛韋/鹽萬乃洛韋（標(biāo)準(zhǔn)品）英文名稱： DabigatranDISC1 N端抗體包裝100g

鹽非那吡啶（標(biāo)準(zhǔn)品）英文名稱： Repaglinide多能發(fā)育相關(guān)基因2抗體包裝25g

鹽非索非那定（標(biāo)準(zhǔn)品）英文名稱： Repaglinide結(jié)腸直腸癌缺失基因抗體包裝5g

鹽芬戈莫德(標(biāo)準(zhǔn)品)英文名稱： D-(-)-Arabinose 多巴脫羧抗體包裝1g

鹽酚芐明（標(biāo)準(zhǔn)品）英文名稱： D-arabinose防御β1/Defensin β1抗體包裝5g

鹽呋喃它(標(biāo)準(zhǔn)品)英文名稱： Ferulic acid抗體包裝100g

鹽（標(biāo)準(zhǔn)品）英文名稱： Ferulic acidDLX4抗體包裝25g

鹽桂利（標(biāo)準(zhǔn)品）英文名稱： Punicalagin (40%)DTX1抗體包裝100ml

鹽（標(biāo)準(zhǔn)品）英文名稱： Punicalagin絲裂原活化蛋白激磷-1抗體包裝250ml

鹽雜質(zhì) C（標(biāo)準(zhǔn)品）英文名稱： Rosiglitazone HCL 絲裂原活化蛋白激磷-2抗體包裝100g