商品介紹:
Skepinone-L是選擇性p38MAPK抑制劑。 注:本品僅可用于科研實(shí)驗(yàn),嚴(yán)禁用于臨床醫(yī)療及其他用途! CAS號:1221485-83-1 別名:Skepinone L 純度:98.99% 分子量:425.42 儲存條件:-20℃,有效期2年,溶入溶劑后-20℃請盡量在一個(gè)月內(nèi)使用。 |
以下是細(xì)胞生物學(xué)試劑的詳細(xì)介紹:
操作步驟:
1. 樣品染色
1) 將Binding Buffer(10×)稀釋成1×Binding buffer工作液備用(1ml Binding Buffer(10×)需加入9ml無菌去離子水)。
2) 對于懸浮細(xì)胞,500-1000g離心5min收集細(xì)胞。
對于貼壁細(xì)胞,要用不含EDTA的胰酶消化細(xì)胞,胰酶消化時(shí)間不宜過長或過短,最好是在輕輕吹打可以使貼壁細(xì)胞吹打下來時(shí),加入細(xì)胞培養(yǎng)液,將細(xì)胞輕輕吹打下來,轉(zhuǎn)移到離心管內(nèi),500-1000g離心5min收集細(xì)胞。
3) 收集細(xì)胞后,加入預(yù)冷PBS溶液輕搖或用移液器輕柔吹打洗滌,離心收集細(xì)胞,共洗滌兩次。
4) 在細(xì)胞沉淀中加入1×Binding buffer工作液,重懸細(xì)胞,使細(xì)胞濃度達(dá)到1×106 cell/ml。
5) 吸取100μl細(xì)胞懸液(細(xì)胞總數(shù)為1×105 cell)至一新管中,加入5μl Annexin V-FITC和5-10 μl PI,輕輕混勻,室溫避光孵育15min。
2. 樣品檢測
1) 流式細(xì)胞儀檢測:
染色孵育后,每管加入400μl 1×Binding Buffer工作液,混勻后使用流式細(xì)胞儀檢測(1小時(shí)內(nèi)檢測)。
建議設(shè)置經(jīng)凋亡誘導(dǎo)的正常細(xì)胞、PI單染和Annexin V-FITC單染3個(gè)對照組,正常細(xì)胞組可作為熒光補(bǔ)償調(diào)節(jié)去除光譜重疊和設(shè)定十字門的位置。結(jié)果可用CellQuest等軟件進(jìn)行分析,繪制雙色散點(diǎn)圖(two-color dot plot),F(xiàn)ITC為橫坐標(biāo),PI為縱坐標(biāo)。Annexin V-FITC和PI聯(lián)合使用時(shí),活細(xì)胞僅有很低強(qiáng)度的背景熒光,早期凋亡細(xì)胞僅有較強(qiáng)的綠色熒光,晚期凋亡細(xì)胞有綠色和紅色雙重?zé)晒狻?/span>
2) 熒光顯微鏡檢測:
染色孵育后涂片,顯微鏡下觀察。使用熒光顯微鏡上的藍(lán)光和綠光通道分別觀察FITC和PI。被Annexin V-FITC結(jié)合的細(xì)胞顯示漿膜上有綠色光環(huán)。喪失細(xì)胞膜完整性的細(xì)胞,細(xì)胞核顯示紅色,膜上有綠色光環(huán)。
公司產(chǎn)品僅用于科研細(xì)胞培養(yǎng)操作規(guī)程:
一.培養(yǎng)基及培養(yǎng)凍存條件準(zhǔn)備:
1)準(zhǔn)備RPMI-1640培養(yǎng)基(RPMI-1640:GIBCO),90%;優(yōu)質(zhì)胎牛血清,10%。
2)培養(yǎng)條件: 氣相:空氣,95%;二氧化碳,5%。 溫度:37℃,培養(yǎng)箱濕度為70%-80%。
3)凍存液:90%血清,10%DMSO,現(xiàn)用現(xiàn)配,液氮儲存。
二.細(xì)胞處理:
1)復(fù)蘇細(xì)胞:將含有1mL細(xì)胞懸液的凍存管迅速放入37℃水浴中(水面要低于凍存管蓋部)搖晃解凍,移入事先準(zhǔn)備好的含有4mL培養(yǎng)基的15ml離心管中混合均勻。在1000RPM條件下離心4分鐘,棄去上清液,加入1mL培養(yǎng)基后吹勻。然后將所有細(xì)胞懸液移入含有5ml培養(yǎng)基的培養(yǎng)瓶中培養(yǎng)過夜。第二天換液并檢查細(xì)胞密度。
2)細(xì)胞傳代:如果細(xì)胞密度達(dá)80%-90%,即可進(jìn)行傳代培養(yǎng)。
對于懸浮細(xì)胞,傳代可參考以下方法:
方法一:收集細(xì)胞,1000RPM,常溫條件下離心5分鐘,棄去上清液,補(bǔ)加1-2mL培養(yǎng)液后吹勻,將細(xì)胞懸液按1:2到1:5的比例分到新的含8ml培養(yǎng)基的新皿中或者瓶中。
釀酒酵母血栓合成抗體Human AQP9(Aquaporin-9) ELISA Kit人甲狀腺激免疫球蛋白(TSI)免疫試劑盒
粘狀曲霉多癌基因下調(diào)蛋白抗體Human AKR1B1(Aldose reductase) ELISA Kit人甲狀旁腺激相關(guān)蛋白(PTHrP)免疫試劑盒
白僵菌色C氧化蛋白5B抗體Human ADIPOR1(Adiponectin receptor protein 1) ELISA Kit人甲狀旁腺激1受體(PTH1R)免疫試劑盒
玫瑰考克氏菌色C氧化亞基3抗體Human GP6(Plaet glycoprotein VI) ELISA Kit人甲狀旁腺激1-34(PTH 1-34)抗體免疫試劑盒
棲熱菌屬色C氧化亞基6B抗體Human SOD3(Extracellular superoxide dismutase [Cu-Zn]) ELISA Kit人甲狀旁腺激1-34(PTH 1-34)免疫試劑盒
紫紅曲霉磷化致癌基因C-Myc抗體Human PRDX1(Peroxiredoxin-1) ELISA Kit人甲狀旁腺激(PTH)免疫試劑盒
枯草芽孢桿菌磷化致癌基因C-Myc抗體Human LPCAT3(Lysophospholipid acyltransferase 5) ELISA Kit人甲酰甲硫(fMet)免疫試劑盒
短裙竹蓀1-2色P450 11B1抗體Human OXM(Oxyntomodulin) ELISA Kit人甲肟前列腺D2(PGD2-MOX)免疫試劑盒
麗齒菌屬環(huán)磷鳥苷抗體Human SMAD2(Mothers against decapentaplegic homolog 2) ELISA Kit人甲基化DNA[蛋白]半胱S甲基轉(zhuǎn)移免疫試劑盒
多主葡萄殼菌內(nèi)皮因子維生B12受體抗體Human WNT3A(Protein Wnt-3a) ELISA Kit人甲基化CpG結(jié)合蛋白2(MECP2)免疫試劑盒
喜鹽裸囊菌原癌基因cMAF抗體Human Smad3/MADH3(Mothers Against Decapentaplegic Homolog 3) ELISA Kit人脊髓灰質(zhì)炎病抗原(PV)免疫試劑盒
沙鏈霉菌18號染色體開放閱讀框56抗體Human RPESP(RPE-spondin) ELISA Kit人脊髓灰質(zhì)炎病(PV)抗體(IgG)免疫試劑盒
葡萄座腔菌3號染色體開放閱讀框22抗體Human SEMA3G(Semaphorin-3G) ELISA Kit人己糖激3(HK3)免疫試劑盒
出芽短梗霉19號染色體開放閱讀框46抗體Human OXM(Oxyntomodulin) ELISA Kit人己糖激(HK)免疫試劑盒
微型離心機(jī) (便攜式)原癌基因cMAF抗體Human WNT3A(Protein Wnt-3a) ELISA Kit人幾丁質(zhì)3樣蛋白1(YKL-40/CHI3L1)免疫試劑盒
產(chǎn)短桿菌電壓依賴性鈣通道Cav2.1抗體Human Smad3/MADH3(Mothers Against Decapentaplegic Homolog 3) ELISA Kit人幾丁質(zhì)1(殼三糖)(CHIT1)免疫試劑盒
: =DSM20481=ATCC19435=CCM1877=NCDO604=NCIB6681=NCTC6681資源名稱: 乳鏈球菌 質(zhì)量規(guī)格:IND益母草苷
: HBUM171193資源名稱: 鏈霉菌 質(zhì)量規(guī)格:ACS乙龍腦酯
: Ye845資源名稱: 小腸結(jié)腸炎耶爾森氏菌 質(zhì)量規(guī)格:BSα-亞麻
p38MAPK抑制劑(Skepinone-L)抗內(nèi)皮細(xì)胞抗體(AECA)檢測試劑盒英文名稱:AECA ELISA Kit載脂蛋白樣蛋白6抗體包裝5g
抗利尿/血管加壓/精加壓(ADH/VP/AVP)檢測試劑盒英文名稱:ADH/VP/AVP ELISA Kit凋亡相關(guān)蛋白TGFb信號抗體包裝100g
抗酒石性磷5b(TRACP-5b)檢測試劑盒英文名稱:TRACP-5b ELISA KitA2LD1蛋白抗體包裝25g
抗酒石性磷5b(TRACP5b)檢測試劑盒英文名稱:TRACP5b ELISA Kitα1,4-N-乙酰葡糖轉(zhuǎn)移α4Gn-T抗體包裝5g
抗酒石性磷(TRACP)檢測試劑盒英文名稱:TRACP ELISA Kit芳香乙酰脫乙?;贵w包裝10ml
抗抗體(AsAb)檢測試劑盒英文名稱:AsAb ELISA Kit芳香乙酰脫乙?;鶚拥鞍?抗體包裝1g
抗?fàn)钕偾虻鞍卓贵w(ATGA/TGAB)檢測試劑盒英文名稱:ATGA/TGAB ELISA Kit基乙二半脫氫磷泛酰巰基乙轉(zhuǎn)移抗體包裝25g
抗?fàn)钕龠^氧化物抗體(TPO-Ab)檢測試劑盒英文名稱:TPO-Ab ELISA Kit賴戊二還原抗體包裝5g
抗肌內(nèi)膜抗體IgA(EMA IgA)檢測試劑盒英文名稱:EMA IgA ELISA Kit錨蛋白重復(fù)域6抗體包裝25g
抗環(huán)胍肽抗體(Anti-CCP-antibody)檢測試劑盒英文名稱:Anti-CCP-antibody ELISA Kit精2抗體包裝5g
抗紅細(xì)胞抗體(RBC)檢測試劑盒英文名稱:RBC ELISA Kit固還原家族1成員C3抗體包裝1g
抗核膜糖蛋白210抗體(gp210)檢測試劑盒英文名稱:gp210 ELISA Kit促腎上腺皮質(zhì)受體包裝5g
(ANA)檢測試劑盒英文名稱:ANA ELISA Kit褐黑相關(guān)蛋白ART抗體包裝1g
抗單鏈DNA抗體/變性DNA抗體(ssDNA)檢測試劑盒英文名稱:ssDNA ELISA Kit腎上腺皮質(zhì)線粒體鐵氧還蛋白抗體包裝250mg
抗單核細(xì)胞抗體(AMA)檢測試劑盒英文名稱:AMA ELISA KitAllgrove綜合征相關(guān)蛋白抗體包裝5g