真菌保存液Ⅱ公司正在出售的產(chǎn)品：OPN/FITC 熒光標(biāo)記骨橋蛋白抗體IgG氫氟 GR,40.0%
ORX-A/FITC 熒光標(biāo)記增食欲-A/欲激AIgG6-己 97%
Osx /FITC 熒光標(biāo)記成骨相關(guān)轉(zhuǎn)錄因子抗體IgG4-溴丁 98%
Os05g/0477200 protein /FITC 熒光標(biāo)記抗水稻白葉枯病菌Os05g0477200蛋白抗體IgG4-溴丁酯 95%
OTR/FI

以下是細(xì)胞生物學(xué)試劑的詳細(xì)介紹：

 

公司產(chǎn)品僅用于科研細(xì)胞培養(yǎng)操作規(guī)程：

一．培養(yǎng)基及培養(yǎng)凍存條件準(zhǔn)備：

1）準(zhǔn)備RPMI-1640培養(yǎng)基(RPMI-1640：GIBCO)，90%；優(yōu)質(zhì)胎牛血清，10%。

2）培養(yǎng)條件： 氣相：空氣，95%；二氧化碳，5%。 溫度：37℃，培養(yǎng)箱濕度為70%-80%。

3）凍存液：90%血清，10%DMSO，現(xiàn)用現(xiàn)配，液氮儲(chǔ)存。

二．細(xì)胞處理：

1）復(fù)蘇細(xì)胞：將含有1mL細(xì)胞懸液的凍存管迅速放入37℃水浴中（水面要低于凍存管蓋部）搖晃解凍，移入事先準(zhǔn)備好的含有4mL培養(yǎng)基的15ml離心管中混合均勻。在1000RPM條件下離心4分鐘，棄去上清液，加入1mL培養(yǎng)基后吹勻。然后將所有細(xì)胞懸液移入含有5ml培養(yǎng)基的培養(yǎng)瓶中培養(yǎng)過夜。第二天換液并檢查細(xì)胞密度。

2）細(xì)胞傳代：如果細(xì)胞密度達(dá)80%-90%，即可進(jìn)行傳代培養(yǎng)。

對于懸浮細(xì)胞，傳代可參考以下方法：

方法一：收集細(xì)胞，1000RPM，常溫條件下離心5分鐘，棄去上清液，補(bǔ)加1-2mL培養(yǎng)液后吹勻，將細(xì)胞懸液按1：2到1：5的比例分到新的含8ml培養(yǎng)基的新皿中或者瓶中。
商品介紹：

操作步驟：

1. 樣品染色

1) 將Binding Buffer（10×）稀釋成1×Binding buffer工作液備用（1ml Binding Buffer（10×）需加入9ml無菌去離子水）。

2) 對于懸浮細(xì)胞，500-1000g離心5min收集細(xì)胞。

對于貼壁細(xì)胞，要用不含EDTA的胰酶消化細(xì)胞，胰酶消化時(shí)間不宜過長或過短，最好是在輕輕吹打可以使貼壁細(xì)胞吹打下來時(shí)，加入細(xì)胞培養(yǎng)液，將細(xì)胞輕輕吹打下來，轉(zhuǎn)移到離心管內(nèi)，500-1000g離心5min收集細(xì)胞。

3) 收集細(xì)胞后，加入預(yù)冷PBS溶液輕搖或用移液器輕柔吹打洗滌，離心收集細(xì)胞，共洗滌兩次。

4) 在細(xì)胞沉淀中加入1×Binding buffer工作液，重懸細(xì)胞，使細(xì)胞濃度達(dá)到1×106 cell/ml。

5) 吸取100μl細(xì)胞懸液（細(xì)胞總數(shù)為1×105 cell）至一新管中，加入5μl Annexin V-FITC和5-10 μl PI，輕輕混勻，室溫避光孵育15min。

2. 樣品檢測

1) 流式細(xì)胞儀檢測：

染色孵育后，每管加入400μl 1×Binding Buffer工作液，混勻后使用流式細(xì)胞儀檢測（1小時(shí)內(nèi)檢測）。

建議設(shè)置經(jīng)凋亡誘導(dǎo)的正常細(xì)胞、PI單染和Annexin V-FITC單染3個(gè)對照組，正常細(xì)胞組可作為熒光補(bǔ)償調(diào)節(jié)去除光譜重疊和設(shè)定十字門的位置。結(jié)果可用CellQuest等軟件進(jìn)行分析，繪制雙色散點(diǎn)圖（two-color dot plot），F(xiàn)ITC為橫坐標(biāo)，PI為縱坐標(biāo)。Annexin V-FITC和PI聯(lián)合使用時(shí)，活細(xì)胞僅有很低強(qiáng)度的背景熒光，早期凋亡細(xì)胞僅有較強(qiáng)的綠色熒光，晚期凋亡細(xì)胞有綠色和紅色雙重?zé)晒狻?/span>

2) 熒光顯微鏡檢測：

染色孵育后涂片，顯微鏡下觀察。使用熒光顯微鏡上的藍(lán)光和綠光通道分別觀察FITC和PI。被Annexin V-FITC結(jié)合的細(xì)胞顯示漿膜上有綠色光環(huán)。喪失細(xì)胞膜完整性的細(xì)胞，細(xì)胞核顯示紅色，膜上有綠色光環(huán)。

短裙竹蓀3-3ADP核糖基化因子結(jié)合蛋白2抗體Human HSD17B2 ELISA Kit小鼠骨成型蛋白受體1A(BMPR-1A)免疫試劑盒

紡錘形擬酵母精加壓受體2抗體Human HSD17B4 ELISA Kit小鼠骨成型蛋白9(BMP-9)免疫試劑盒

蒂莫內(nèi)馬賽菌凋亡相關(guān)斑點(diǎn)樣蛋白ASC抗體Human HSD17B6 ELISA Kit小鼠骨成型蛋白7(BMP-7)免疫試劑盒

蘋果鏈格孢絲狀肌動(dòng)蛋白結(jié)合蛋白抗體Human HIST2H2AA4 ELISA Kit小鼠骨成型蛋白4(BMP-4)免疫試劑盒

長雙歧桿菌抗凝血3抗體Human HMCN1 ELISA Kit小鼠骨成型蛋白2(BMP-2)免疫試劑盒

發(fā)酵假絲酵母人血清白蛋白單克抗體Human Histone-H3 ELISA Kit小鼠骨成型蛋白15(BMP-15)免疫試劑盒

牡丹葡萄孢載脂蛋白A4抗體Human HIST3H2A ELISA Kit小鼠骨保護(hù)(OPG)免疫試劑盒

黃色桿菌磷化Rho鳥苷交換因子2抗體Human HIGD1A ELISA Kit小鼠過氧化(GSH-Px)免疫試劑盒

百脈根中間根瘤菌磷化絲狀肌動(dòng)蛋白結(jié)合蛋白抗體Human HIGD1B ELISA Kit小鼠谷脫羧自身抗體IgM(GAD-Ab-IgM)免疫試劑盒

天藍(lán)色鏈霉菌肌動(dòng)蛋白相關(guān)蛋白2/3亞型1A抗體Human HIVEP1 ELISA Kit小鼠谷脫羧自身抗體IgG(GAD-Ab-IgG)免疫試劑盒

支氣管敗血波氏菌錨蛋白重復(fù)結(jié)構(gòu)域蛋白32抗體Human Hikeshi ELISA Kit小鼠谷脫氫(GDH/GLDH)免疫試劑盒

糞產(chǎn)堿菌糞亞種共濟(jì)失調(diào)7樣蛋白3B抗體Human HERC4 ELISA Kit小鼠孤腓肽(OFQ/N)免疫試劑盒

平菇(科大雜優(yōu))感染性蛋白蛋白1抗體Human HEPACAM ELISA Kit小鼠鉤端螺旋體IgG(Lep IgG)免疫試劑盒

釀酒酵母含錨蛋白重復(fù)序列-因子信號(hào)抑制物盒蛋白家族5抗體Human HIGD1B ELISA Kit小鼠睪(T)免疫試劑盒

污泥根瘤菌植物生長激ABP1抗體Human HEPACAM ELISA Kit小鼠高鐵血紅蛋白(MHB)免疫試劑盒

鴨疫里氏桿菌磷化活化復(fù)制因子2抗體Human Hikeshi ELISA Kit小鼠高遷移率族蛋白B1(HMGB-1)免疫試劑盒

黃曲霉Aspergillus│flavus 質(zhì)量規(guī)格：>98%，BCκB抑制蛋白激試劑盒山椒子烯

銅綠假單胞菌Pseudomonas│aeruginosa 質(zhì)量規(guī)格：>98%，BCγ谷酰轉(zhuǎn)移試劑盒1,3,5,8-四羥基山

肉灰色鏈霉菌Streptomyces│griseocarneus 質(zhì)量規(guī)格：>98%,BCγ-谷酰環(huán)化轉(zhuǎn)移試劑盒四氫姜黃
真菌保存液Ⅱ煙色鏈霉 四(3,5-二叔丁基-4-羥基)苯酸季戊四酯核蛋白Elisa

根瘤 5-甲氧色鹽酸鹽NK3同源框蛋白1Elisa

谷氨酸棒桿 5-溴-2,3-二氫苯并呋喃雄受體Elisa

硬水黃桿 2-(3-溴苯基)萘環(huán)氧合11Elisa

鐮刀屬 N-乙基-1-庚染色盒同源物3Elisa

沙雷氏 溴二乙酯前列腺特異膜抗原Elisa

嗜一氧化碳假諾卡氏 1-(4-溴苯基)哌Rho關(guān)聯(lián)含卷曲螺旋蛋白激1Elisa

香菇 叔丁基苯肌苷5'-磷酸脫氫1Elisa

魯氏淀粉霉 8-溴-7-(2-丁炔-1-基)-3-甲基肌苷5'-磷酸脫氫2Elisa

費(fèi)比恩畢赤酵母 2,4-二溴芐二磷酸鳥苷Elisa

1ml吸頭 N-芐氧基羰基-L-氨一磷酸鳥苷Elisa

光神農(nóng)球 2,5-二氨基苯甲硫酸鹽酮酸脫氫βElisa

芽枝狀枝孢 2-氨基-3-吡三磷酸鳥苷Elisa

蠟樣芽胞桿 (蠟狀芽胞桿) 6-甲氧基煙酸絲聚蛋白Elisa

佛羅里達(dá)無孢子側(cè)耳 N-BOC-4-氨基套膜蛋白Elisa