公司產(chǎn)品僅用于科研
細(xì)胞生物學(xué)研究有以下幾個(gè)方面:
細(xì)胞生物學(xué)的研究?jī)?nèi)容十分廣泛,主要包括:
①細(xì)胞核、染色體以及基因表達(dá)的研究;
②生物膜與細(xì)胞器的研究;
③細(xì)胞骨架體系的研究;
④細(xì)胞增殖及其調(diào)控;
⑤細(xì)胞分化及其調(diào)控;
⑥細(xì)胞的衰老與編程性死亡(凋亡);
⑦細(xì)胞的起源與進(jìn)化;
⑧細(xì)胞工程.
產(chǎn)品屬性:
中文名稱(chēng):鞭毛染色液(Loffler法)
英文名稱(chēng):
產(chǎn)品規(guī)格:2×50ml
發(fā)貨周期:1~3天
商品介紹:
用途: 又稱(chēng)羅夫藍(lán)染色,試劑操作簡(jiǎn)單,結(jié)果判斷更可靠 注意事項(xiàng): 細(xì)菌鞭毛是細(xì)菌的運(yùn)動(dòng)器官,幽門(mén)螺桿菌能夠從強(qiáng)酸性的胃內(nèi)腔穿過(guò)胃上皮細(xì)胞上的黏液層達(dá)到胃上皮細(xì)胞的中性環(huán)境,這就是鞭毛運(yùn)動(dòng)作用的很好例證。通過(guò)鞭毛染色,可以觀察到鞭毛形態(tài)、數(shù)量和鞭毛在菌體分布的位置,鞭毛數(shù)量和在菌體上的分布位置是鑒定細(xì)菌的重要依據(jù)之一 儲(chǔ)存條件:室溫,避光,12個(gè)月 |
實(shí)驗(yàn)報(bào)告:
一、分離與培養(yǎng):
1、無(wú)菌條件下,取出1-3d 齡SD大鼠心房組織,然后用PBS將此組織塊清洗2次,最后將1mm3左右大?。?/span>
2、往組織塊中加入4 mL酶消化液(0.1% 和0.1% I型膠原酶),混懸10s,置37℃條件下消化10min,之后用滴管吹打制成單細(xì)胞懸液,自然沉淀并收集上清,用含10% FBS培養(yǎng)基終止消化后4℃放置;
3、剩下的組織再加入3~4mL酶消化液,混懸10s,置37℃消化10 min后,按上述方法收集上清并終止消化后4℃放置,重復(fù)此步驟2-3次,直至組織*被消化;
4、用200目不銹鋼篩網(wǎng)過(guò)濾細(xì)胞消化液,1200r/min 離心10min,棄去上清,沉淀細(xì)胞用含有10% FBS DMEM/F12培養(yǎng)基混懸,接種于25cm2培養(yǎng)瓶,放置于37℃ ,5%CO2 培養(yǎng)箱中培養(yǎng);
5、差速貼壁1h后,吸出培養(yǎng)基,按實(shí)驗(yàn)需要接種于6孔板中繼續(xù)培養(yǎng);
二、免疫熒光鑒定:
1、待心房肌細(xì)胞生長(zhǎng)至80%融合時(shí),棄去培養(yǎng)基,用溫育的PBS沖洗細(xì)胞2次,每次10min,然后用4%多聚甲醛在室溫條件下固定細(xì)胞15min;
2、PBS沖洗細(xì)胞2次,每次10min,然后在4℃條件下,用0.1%Triton X-100透膜15min;
3、PBS沖洗細(xì)胞2次,每次10min,然后在室溫條件下,用4% BSA封閉細(xì)胞30min;
4、按1: 100的比例稀釋?duì)?actin一抗,然后將其放在4℃冰箱中孵育細(xì)胞過(guò)夜;
5、PBS沖洗細(xì)胞3次,每次10min,按1:150的比例稀釋抗α-actin的二抗, 37℃條件下放置1h;
6、用PBS沖洗3次,每次10min,最后在倒置熒光顯微鏡下觀察圖像并拍照。
操作規(guī)程
1、在96孔板加入細(xì)胞100μL/孔,通常細(xì)胞增殖實(shí)驗(yàn)每孔加入100微升2000個(gè)細(xì)胞,細(xì)胞毒性實(shí)驗(yàn)每孔加入100微升5000~10000個(gè)細(xì)胞(具體每孔所用的細(xì)胞的數(shù)目,需根據(jù)細(xì)胞的大小,細(xì)胞增殖速度的快慢等決定)。置37℃ 5%CO2細(xì)胞培養(yǎng)箱培養(yǎng)24小時(shí).
2、.加入適當(dāng)濃度的0~10μL 受試化合物。
3、將96孔板在37℃,含5% CO2空氣及100%濕度的細(xì)胞培養(yǎng)箱中孵育適當(dāng)時(shí)間。
4、將5×MTT 用稀釋液稀釋成1× MTT 溶液。
5、每孔加50μL 1× MTT 溶液,在37℃孵育4小時(shí),使MTT 還原為甲臜。
6、吸出上清液,每孔加150μL DMSO 使甲臜溶解,用平板搖床搖勻。
7、酶標(biāo)儀在570nm 波長(zhǎng)處檢測(cè)每孔的光密度(如無(wú)570nm 濾光片,可以使用560-600nm 的濾光片)。
8、結(jié)果分析
a、細(xì)胞的存活率:將各測(cè)試孔的OD 值減去本底OD 值(*培養(yǎng)基加MTT,無(wú)細(xì)胞)或空白藥物孔OD 值(*培養(yǎng)基加受試藥物的不同稀釋度加MTT,無(wú)細(xì)胞),各重復(fù)孔的OD 值取平均數(shù)±SD。細(xì)胞的存活率以T/C%表示,T 為加藥細(xì)胞的OD 值,C 為對(duì)照細(xì)胞的OD 值。細(xì)胞存活率% =(加藥細(xì)胞OD/對(duì)照細(xì)胞OD)×100
b、求出T/C = 50% 時(shí)的藥物濃度(IC50)及T/C = 10%時(shí)的藥物濃度(IC90)
波羅的海萊茵海默氏菌頂體前體蛋白抗體Human MBIP ELISA Kit小鼠中性粒彈性蛋白(NE)免疫試劑盒
擬莖點(diǎn)霉黑色瘤缺失樣蛋白1抗體Human MARS ELISA Kit小鼠脂氧A4(LXA4)免疫試劑盒
大腸埃希氏桿菌未知糖基化轉(zhuǎn)移AER61抗體Human MARVELD2 ELISA Kit小鼠脂聯(lián)(ADP)免疫試劑盒
副豬嗜血桿菌鐵蛋白Fe65抗體Human MAEA ELISA Kit小鼠脂肪合成(FASN)免疫試劑盒
貪噬菌屬抑癌基因ras同源家族1抗體Human MARVELD3 ELISA Kit小鼠脂多糖/內(nèi)(LPS)免疫試劑盒
枯草芽孢桿菌轉(zhuǎn)錄激活蛋白2α/TFAP2α/AP-2α抗體Human MAGEA10 ELISA Kit小鼠脂蛋白脂(LPL)免疫試劑盒
釀酒酵母心鈉抗體Human MAGEA1 ELISA Kit小鼠脂蛋白相關(guān)磷脂A2(Lp-PLA2)免疫試劑盒
黑曲霉酰tRNA合成2抗體Human MAGEA11 ELISA Kit小鼠脂蛋白α(Lp-α)免疫試劑盒
冬菇絲抑制蛋白激C底物抗體Human MAGEA3(Melanoma-associated antigen 3) ELISA Kit小鼠正常T表達(dá)和分泌因子(RANTES/CCL5)免疫試劑盒
木糖葡糖醋桿菌*核突觸蛋白α抗體Human MAGEA4 ELISA Kit小鼠整合αM(Itgam/CD11b)免疫試劑盒
食紅球菌自噬相關(guān)蛋白4B抗體Human MAGEA6 ELISA Kit小鼠整合α-IIb(Itga2b/CD41)免疫試劑盒
嗜線(xiàn)蟲(chóng)致病桿菌整合樣金屬蛋白與凝血1型-12抗體Human MAGEA8 ELISA Kit小鼠整合α5(Itgax/CD11c)免疫試劑盒
果生鏈核盤(pán)菌α-輔肌動(dòng)蛋白4(內(nèi)參)抗體Human MAGEB1 ELISA Kit小鼠粘蛋白/粘液7(MUC7)免疫試劑盒
裂褶菌堿性磷抗體Human MAGI1 ELISA Kit小鼠粘蛋白/粘液5B(MUC5B)免疫試劑盒
棒彎孢AU1 tag標(biāo)簽抗體Human MAGIX ELISA Kit小鼠粘蛋白/粘液5AC(MUC5AC) 免疫試劑盒
Phoma medicaginis var. medicaginis脂肪增強(qiáng)結(jié)合蛋白1Human MAGEB18 ELISA Kit小鼠粘蛋白/粘液2(MUC2)免疫試劑盒
糙皮側(cè)耳Pleurotus│ostreatus 質(zhì)量規(guī)格:15U/mg,進(jìn)口表達(dá)于SiSo系的受體結(jié)合型腫瘤抗原試劑盒2-O-乙酰山椒子烯
型副傷寒沙門(mén)菌Salmonella│paratyphi A 質(zhì)量規(guī)格:>98%,進(jìn)分變腎上腺試劑盒柚皮-7-O-葡萄糖苷
IFO14056資源名稱(chēng): 印度斯坦鏈異壁菌 質(zhì)量規(guī)格:>99%,AR鞭毛蛋白試劑盒茵芋堿
鞭毛染色液(Loffler法)長(zhǎng)蠕孢 N-(芐羰氧基)羥基Artemin蛋白Elisa
單孢酵母 4-甲基四氫苯酐磷脂A1Elisa
枯草芽孢桿 4-甲氧基苯甲酰組蛋白脫乙酰基6Elisa
果生鏈核盤(pán) 3-乙基苯甲Gasdermin D蛋白Elisa
大豆慢生根瘤 3-乙酰氧基苯甲R(shí)AB27AElisa
木槿盤(pán)孢 2,4'-二氟苯甲酮肌球蛋白VaElisa
淤泥假單胞 膦甲酸鈉六水合物F-激動(dòng)蛋白Elisa
枯草芽孢桿 4-氟-1H-吲唑黑親和Elisa
哈茨木霉 3-芐氧基苯乙酮STEAP家族成員1Elisa
平頭盤(pán)孢 N-甲基二STEAP家族成員1抗體Elisa
黑木耳 4-甲硫基-2-丁酮功能相關(guān)抗原2-IgM抗體Elisa
羊泰勒蟲(chóng)(麻當(dāng)株) 4-多巴β羥化Elisa
牧草桑帕約氏酵母 D-苯氨酸叔丁酯鹽酸鹽可溶性Aβ寡聚體Elisa
Ag17(蘑菇) 2-(1-環(huán)己烯基)乙增殖核抗原Elisa
大洋芽孢桿 L-環(huán)絲氨酸凝血受體Elisa