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          上海谷研實業(yè)有限公司>>細胞生物學試劑>>細胞凋亡與增殖>>Caspase-5活性測定試劑盒

          Caspase-5活性測定試劑盒

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          • 所在地 上海市

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          更新時間:2022-04-21 13:58:33瀏覽次數:304

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          產品簡介

          供貨周期 現貨 規(guī)格 20T|50T|100T
          貨號 GOY-01X9736 應用領域 化工
          主要用途 公司產品僅供科研 英文名稱 Caspase-5 Activity colorimetric assay Kit
          Caspase-5活性測定試劑盒公司正在出售的產品:Integrin alpha 6/CD49f 整合α6抗體咪唑 99.5%,用于緩沖溶液
          Integrin Beta 3/CD61 整合β3抗體咪唑 99.5%,用于熒光分析
          JAK1 蛋白質酪氨激JAK-1抗體咪唑 99.5%,分子生物學級
          Phospho-Jak1 (Tyr1022/1023) 化蛋白質酪氨激JAK-1抗體咪唑 99%

          詳細介紹

          以下是細胞生物學試劑的詳細介紹:

          中文名稱

          英文名稱

          產品規(guī)格

          發(fā)貨周期

          Caspase-5活性測定試劑盒

          Caspase-5 Activity colorimetric assay Kit

          20T|50T|100T

          1~3天


          商品介紹:

          本試劑盒適用于測定哺乳動物組織、細胞caspase-5活性。試劑盒測定原理基于Caspase-5特異水解其多肽底物N-acetyl-Trp-Glu-His-Asp-p-nitroanilide(Ac-WEHD-pNA),釋放出游離的硝基pNA,后者呈黃色在405nm具有大吸收峰,用可見光分光光度比色方法測定,吸光度值對應于Caspase-5的水解活性。

          細胞凋亡屬于程序化細胞死亡,可見于各種器官和細胞,在正常發(fā)育、生理、病理過程中對細胞和器官的穩(wěn)態(tài)具有十分重要的調節(jié)作用。Caspase(Cysteine-requiring Aspartate Protease)是參與細胞凋亡過程的蛋白酶家族,包含10多個成員。Caspase-5分子量47.7kD,與ICE有51%的同源性,在過量表達時可誘導凋亡發(fā)生。

          所需儀器:酶標儀與96孔酶標板;或可見光分光光度計配100μl容積的石英比色杯。

          工作波長:大吸收波長405nm,如不具備也可在400~450nm范圍內測定。

          公司產品僅用于科研細胞培養(yǎng)操作規(guī)程:

          一.培養(yǎng)基及培養(yǎng)凍存條件準備:

          1)準備RPMI-1640培養(yǎng)基(RPMI-1640:GIBCO),90%;優(yōu)質胎牛血清,10%。

          2)培養(yǎng)條件: 氣相:空氣,95%;二氧化碳,5%。 溫度:37℃,培養(yǎng)箱濕度為70%-80%。

          3)凍存液:90%血清,10%DMSO,現用現配,液氮儲存。

          二.細胞處理:

          1)復蘇細胞:將含有1mL細胞懸液的凍存管迅速放入37℃水浴中(水面要低于凍存管蓋部)搖晃解凍,移入事先準備好的含有4mL培養(yǎng)基的15ml離心管中混合均勻。在1000RPM條件下離心4分鐘,棄去上清液,加入1mL培養(yǎng)基后吹勻。然后將所有細胞懸液移入含有5ml培養(yǎng)基的培養(yǎng)瓶中培養(yǎng)過夜。第二天換液并檢查細胞密度。

          2)細胞傳代:如果細胞密度達80%-90%,即可進行傳代培養(yǎng)。

          對于懸浮細胞,傳代可參考以下方法:

          方法一:收集細胞,1000RPM,常溫條件下離心5分鐘,棄去上清液,補加1-2mL培養(yǎng)液后吹勻,將細胞懸液按1:2到1:5的比例分到新的含8ml培養(yǎng)基的新皿中或者瓶中。

          操作步驟:

          1. 樣品染色

          1) 將Binding Buffer(10×)稀釋成1×Binding buffer工作液備用(1ml Binding Buffer(10×)需加入9ml無菌去離子水)。

          2) 對于懸浮細胞,500-1000g離心5min收集細胞。

          對于貼壁細胞,要用不含EDTA的胰酶消化細胞,胰酶消化時間不宜過長或過短,最好是在輕輕吹打可以使貼壁細胞吹打下來時,加入細胞培養(yǎng)液,將細胞輕輕吹打下來,轉移到離心管內,500-1000g離心5min收集細胞。

          3) 收集細胞后,加入預冷PBS溶液輕搖或用移液器輕柔吹打洗滌,離心收集細胞,共洗滌兩次。

          4) 在細胞沉淀中加入1×Binding buffer工作液,重懸細胞,使細胞濃度達到1×106 cell/ml。

          5) 吸取100μl細胞懸液(細胞總數為1×105 cell)至一新管中,加入5μl Annexin V-FITC和5-10 μl PI,輕輕混勻,室溫避光孵育15min。

          2. 樣品檢測

          1) 流式細胞儀檢測:

          染色孵育后,每管加入400μl 1×Binding Buffer工作液,混勻后使用流式細胞儀檢測(1小時內檢測)。

          建議設置經凋亡誘導的正常細胞、PI單染和Annexin V-FITC單染3個對照組,正常細胞組可作為熒光補償調節(jié)去除光譜重疊和設定十字門的位置。結果可用CellQuest等軟件進行分析,繪制雙色散點圖(two-color dot plot),FITC為橫坐標,PI為縱坐標。Annexin V-FITC和PI聯合使用時,活細胞僅有很低強度的背景熒光,早期凋亡細胞僅有較強的綠色熒光,晚期凋亡細胞有綠色和紅色雙重熒光。

          2) 熒光顯微鏡檢測:

          染色孵育后涂片,顯微鏡下觀察。使用熒光顯微鏡上的藍光和綠光通道分別觀察FITC和PI。被Annexin V-FITC結合的細胞顯示漿膜上有綠色光環(huán)。喪失細胞膜完整性的細胞,細胞核顯示紅色,膜上有綠色光環(huán)。
          (標準品)英文名稱: 1H-Benzotriazole因子受體樣因子1抗體包裝500g

          谷維(標準品)英文名稱: Betahistine Dihydrochloride半胱亞磺脫羧抗體包裝1g

          呱西替柳(標準品)英文名稱: Betahistine Dihydrochloride型肝炎NS2反式調節(jié)蛋白/衰老相關的基因10蛋白抗體包裝25g

          呱西替柳雜質A(楊愈創(chuàng)木酚酯)(標準品)英文名稱: Betahistine Dimesilate固合成CYP11B2抗體包裝5g

          癸(標準品)英文名稱: INSULIN分裂周期蛋白8抗體包裝1g

          桂美(標準品)英文名稱: Bismuth oxide 卷曲螺旋結構域蛋白5抗體包裝1g

          果糖二磷鈉(標準品)英文名稱: 2-Chloro-1,3-propanediol分裂周期蛋白16抗體包裝5g

          哈西奈德(標準品)英文名稱: Bisoprolol fumarate有絲分裂著絲粒蛋白F抗體包裝5g

          核黃磷鈉混合物(標準品)英文名稱: Bromhexine HCl9號染色體開放閱讀框115抗體包裝25g

          紅霉(標準品)英文名稱: Bupivacaine HClCTDSPL蛋白抗體包裝5g

          胡椒乙(標準品)英文名稱: Bupivacaine HClCTDSPL2蛋白抗體包裝1g

          琥珀;丁二(標準品)英文名稱: Butenafine HCl乙酰酯相關蛋白抗體包裝1g

          琥珀多西拉敏(標準品)英文名稱: Captopril卷曲螺旋結構域蛋白83抗體包裝250mg

          琥珀潑尼龍(標準品)英文名稱: Captopril二氫嘧啶相關蛋白5抗體包裝5g

          琥珀普卡必利英文名稱: (S)-Carbidopa磷化二氫嘧啶樣2抗體包裝1g

          : NRS-1000ATCC43897DSM3037資源名稱: 強壯類芽孢桿菌 質量規(guī)格:>99%,BP2007,EP5.心肌營養(yǎng)1試劑盒維生A;Vitamin A

          微小鏈霉菌Streptomyces│parvulus 質量規(guī)格:>98.5%心肌特異性肌鈣蛋白T試劑盒烏頭原堿;Aconine

          多頭節(jié)叢孢Arthrobotrys│polycephala 質量規(guī)格:HPLC>98%,標準品心肌錨蛋白重復域1試劑盒烏美司;Ubenimex
          Caspase-5活性測定試劑盒灰樹花 2-氨基-5-氯-3-吡啶,95%腎前體Elisa

          根瘤 1-Boc-1-RNA結合基元蛋白8AElisa

          澳大利亞糖絲 2-氟-5-氯苯半胱氨酰白三烯受體Elisa

          根瘤 吡啶并[3,4-D]嘧啶-2,4(1H,3H)-二酮尿皮質Elisa

          釀酒酵母 2,4,6-三氟類缺陷病抗體1+2Elisa

          釀酒酵母 4-氯-2-酸高密度脂蛋白2bElisa

          維羅納假單胞 6-氟-2-氯吡啶高密度脂蛋白2Elisa

          平臍蠕孢 2-氯鹽酸乙脒鹽酸鹽高密度脂蛋白3Elisa

          金黃色葡萄球 N,N-二甲基基硅抗甲流H5(H5N1)血凝蛋白IgG抗體Elisa

          玻利維亞鹽單胞 2-氧代環(huán)戊基乙酸乙酯抗甲流H5(H5N1)血凝蛋白IgM抗體Elisa

          草生鏈霉 1,4-二氮雜-5-環(huán)庚酮鹽酸鹽Flag標簽Elisa

          金頂側耳、榆黃磨、金頂磨 1-芐基-4-酮鹽酸鹽角蛋白19片段Elisa

          葡萄座腔 Cbz-O-芐基-L-絲氨酸生長因子Elisa

          適宜劍 4-溴-2,5-二氟苯磺酰氯糖原合成激3βElisa

          雞樅(雞) 雷瑣太爾促甲狀腺受體Elisa

           


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