以下是細(xì)胞生物學(xué)試劑的詳細(xì)介紹:
公司產(chǎn)品僅用于科研細(xì)胞培養(yǎng)操作規(guī)程:
一.培養(yǎng)基及培養(yǎng)凍存條件準(zhǔn)備:
1)準(zhǔn)備RPMI-1640培養(yǎng)基(RPMI-1640:GIBCO),90%;優(yōu)質(zhì)胎牛血清,10%。
2)培養(yǎng)條件: 氣相:空氣,95%;二氧化碳,5%。 溫度:37℃,培養(yǎng)箱濕度為70%-80%。
3)凍存液:90%血清,10%DMSO,現(xiàn)用現(xiàn)配,液氮儲(chǔ)存。
二.細(xì)胞處理:
1)復(fù)蘇細(xì)胞:將含有1mL細(xì)胞懸液的凍存管迅速放入37℃水浴中(水面要低于凍存管蓋部)搖晃解凍,移入事先準(zhǔn)備好的含有4mL培養(yǎng)基的15ml離心管中混合均勻。在1000RPM條件下離心4分鐘,棄去上清液,加入1mL培養(yǎng)基后吹勻。然后將所有細(xì)胞懸液移入含有5ml培養(yǎng)基的培養(yǎng)瓶中培養(yǎng)過夜。第二天換液并檢查細(xì)胞密度。
2)細(xì)胞傳代:如果細(xì)胞密度達(dá)80%-90%,即可進(jìn)行傳代培養(yǎng)。
對(duì)于懸浮細(xì)胞,傳代可參考以下方法:
方法一:收集細(xì)胞,1000RPM,常溫條件下離心5分鐘,棄去上清液,補(bǔ)加1-2mL培養(yǎng)液后吹勻,將細(xì)胞懸液按1:2到1:5的比例分到新的含8ml培養(yǎng)基的新皿中或者瓶中。
商品介紹:
PF06650833是一種白細(xì)胞介素-1受體相關(guān)激酶-4(IRAK4)的抑制劑,用于效治療類風(fēng)濕性關(guān)節(jié)炎、紅斑狼瘡和淋巴瘤等疾病。 注:本品僅可用于科研實(shí)驗(yàn),嚴(yán)禁用于臨床醫(yī)療及其他用途! CAS號(hào):1817626-54-2 純度:98.68% 分子量:361.37 儲(chǔ)存條件:-20℃,有效期2年,溶入溶劑后-20℃請(qǐng)盡量在一個(gè)月內(nèi)使用。 |
操作步驟:
1. 樣品染色
1) 將Binding Buffer(10×)稀釋成1×Binding buffer工作液備用(1ml Binding Buffer(10×)需加入9ml無(wú)菌去離子水)。
2) 對(duì)于懸浮細(xì)胞,500-1000g離心5min收集細(xì)胞。
對(duì)于貼壁細(xì)胞,要用不含EDTA的胰酶消化細(xì)胞,胰酶消化時(shí)間不宜過長(zhǎng)或過短,最好是在輕輕吹打可以使貼壁細(xì)胞吹打下來(lái)時(shí),加入細(xì)胞培養(yǎng)液,將細(xì)胞輕輕吹打下來(lái),轉(zhuǎn)移到離心管內(nèi),500-1000g離心5min收集細(xì)胞。
3) 收集細(xì)胞后,加入預(yù)冷PBS溶液輕搖或用移液器輕柔吹打洗滌,離心收集細(xì)胞,共洗滌兩次。
4) 在細(xì)胞沉淀中加入1×Binding buffer工作液,重懸細(xì)胞,使細(xì)胞濃度達(dá)到1×106 cell/ml。
5) 吸取100μl細(xì)胞懸液(細(xì)胞總數(shù)為1×105 cell)至一新管中,加入5μl Annexin V-FITC和5-10 μl PI,輕輕混勻,室溫避光孵育15min。
2. 樣品檢測(cè)
1) 流式細(xì)胞儀檢測(cè):
染色孵育后,每管加入400μl 1×Binding Buffer工作液,混勻后使用流式細(xì)胞儀檢測(cè)(1小時(shí)內(nèi)檢測(cè))。
建議設(shè)置經(jīng)凋亡誘導(dǎo)的正常細(xì)胞、PI單染和Annexin V-FITC單染3個(gè)對(duì)照組,正常細(xì)胞組可作為熒光補(bǔ)償調(diào)節(jié)去除光譜重疊和設(shè)定十字門的位置。結(jié)果可用CellQuest等軟件進(jìn)行分析,繪制雙色散點(diǎn)圖(two-color dot plot),F(xiàn)ITC為橫坐標(biāo),PI為縱坐標(biāo)。Annexin V-FITC和PI聯(lián)合使用時(shí),活細(xì)胞僅有很低強(qiáng)度的背景熒光,早期凋亡細(xì)胞僅有較強(qiáng)的綠色熒光,晚期凋亡細(xì)胞有綠色和紅色雙重?zé)晒狻?/span>
2) 熒光顯微鏡檢測(cè):
染色孵育后涂片,顯微鏡下觀察。使用熒光顯微鏡上的藍(lán)光和綠光通道分別觀察FITC和PI。被Annexin V-FITC結(jié)合的細(xì)胞顯示漿膜上有綠色光環(huán)。喪失細(xì)胞膜完整性的細(xì)胞,細(xì)胞核顯示紅色,膜上有綠色光環(huán)。
美味側(cè)耳(紫孢側(cè)耳)9號(hào)染色體開放閱讀框5抗體Human FBXO41 ELISA Kit兔子心肌肌鈣蛋白T(cTn-T)免疫試劑盒
硬毛栓孔菌9號(hào)染色體開放閱讀框50抗體Human FDFT1 ELISA Kit兔子線粒體呼吸鏈復(fù)合體Ⅴ 免疫試劑盒
哈茨木霉9號(hào)染色體開放閱讀框57抗體Human FBXO43 ELISA Kit兔子線粒體呼吸鏈復(fù)合體Ⅳ 免疫試劑盒
麻孢毛殼9號(hào)染色體開放閱讀框6抗體Human FBP2 ELISA Kit兔子線粒體呼吸鏈復(fù)合體Ⅲ 免疫試劑盒
朗比可假絲酵母9號(hào)染色體開放閱讀框62抗體Human FBXL13 ELISA Kit兔子線粒體呼吸鏈復(fù)合體Ⅱ免疫試劑盒
四孢菇9號(hào)染色體開放閱讀框64抗體Human FBXL15 ELISA Kit兔子線粒體呼吸鏈復(fù)合體Ⅰ免疫試劑盒
枯草芽孢桿菌9號(hào)染色體開放閱讀框66抗體Human FBXL14 ELISA Kit兔子纖溶原激活物抑制因子1(PAI-1)免疫試劑盒
梨黑星9號(hào)染色體開放閱讀框68抗體Human FBXL16 ELISA Kit兔子纖溶原(Plg)免疫試劑盒
新疆鹽地桿菌9號(hào)染色體開放閱讀框7抗體Human FAU ELISA Kit兔子間粘附分子3(ICAM-3/CD50)免疫試劑盒
突孢毛殼9號(hào)染色體開放閱讀框71抗體Human FBF1 ELISA Kit兔子間粘附分子2(ICAM-2/CD102)免疫試劑盒
黑曲霉變種K-酪蛋白抗體Human FBP2 ELISA Kit兔子間粘附分子1(ICAM-1/CD54)免疫試劑盒
堿線菌屬20號(hào)染色體開放閱讀框26抗體Human FBLIM1 ELISA Kit兔子脫氧膠原吡啶交聯(lián)(DPD)免疫試劑盒
赤霉菌C2CD4D蛋白抗體Human FBXL14 ELISA Kit兔子脫氫表雄硫酯(DHEA-S)免疫試劑盒
無(wú)環(huán)田頭菇二硫鍵氧化還原鋅指蛋白5抗體Human FBXL13 ELISA Kit兔子透明質(zhì)(HAase)免疫試劑盒
Candidatus Rhizobium L-型電壓依賴型鈣通道β抗體Human FBXL15 ELISA Kit兔子透明質(zhì)(HA)免疫試劑盒
大腸埃希菌過氧化氫抗體Human FBXL18 ELISA Kit兔子肽聚糖(PG)免疫試劑盒
: =MTCC6143=DSM15871=JCM12170資源名稱: 烏斯懷亞海單胞菌 質(zhì)量規(guī)格:>98%,BRUV切除修復(fù)蛋白R(shí)AD23 同源物A試劑盒Alfa-葡萄
寡酚鞘單胞菌Sphingomonas│oligophenolica 質(zhì)量規(guī)格:>98%,植物激級(jí)U1小核核糖核蛋白A試劑盒帕夏查耳
哈茨木霉Trichoderma│harzianum Rifai 質(zhì)量規(guī)格:>98%,BRT急性淋巴母白血病相關(guān)抗原試劑盒蒲公英甾
IRAK4抑制劑(PF06650833)端羧基外消旋聚乳(重均分子量6-9.5萬(wàn))英文名稱: TG100-115氧化固結(jié)合蛋白4抗體包裝1g
端羧基外消旋聚乳(重均分子量73-109萬(wàn))英文名稱: Difenidol Hydrochloride抗凋亡蛋白OLFM44抗體包裝25g
端羧基外消旋聚乳(重均分子量9.5-16萬(wàn))英文名稱: Urapidil Hydrochloride結(jié)腸癌過度表達(dá)蛋白1抗體包裝5g
端羧基右旋聚乳(重均分子量0.3-1.5萬(wàn))英文名稱: Urapidil Hydrochloride卵巢癌反應(yīng)抗原抗體包裝1mg
端羧基右旋聚乳(重均分子量1.5-3萬(wàn))英文名稱: Flunarizine Hydrochloride卵巢癌相關(guān)基因1抗體包裝1g
端羧基右旋聚乳(重均分子量102-137萬(wàn))英文名稱: Flunarizine Hydrochloride氧化應(yīng)激誘導(dǎo)生長(zhǎng)抑制因子1抗體包裝250mg
端羧基右旋聚乳(重均分子量137-170萬(wàn))英文名稱: Fexofenadine Hydrochloride氧化固結(jié)合蛋白8抗體包裝1g
端羧基右旋聚乳(重均分子量17-26萬(wàn))英文名稱: Fexofenadine Hydrochloride泛特異性蛋白OTB1抗體包裝250mg
端羧基右旋聚乳(重均分子量170-206萬(wàn))英文名稱: Nizatidine視神經(jīng)相關(guān)蛋白1抗體包裝100g
端羧基右旋聚乳(重均分子量206-288萬(wàn))英文名稱: Aceglutamide鳥脫羧抗1抗體包裝25g
端羧基右旋聚乳(重均分子量26-36萬(wàn))英文名稱: Montmorillonit嗅覺受體家族5亞基1抗體包裝500g
端羧基右旋聚乳(重均分子量3-5.5萬(wàn))英文名稱: Bergamottin胚胎干關(guān)鍵蛋白抗體包裝5g
端羧基右旋聚乳(重均分子量36-48萬(wàn))英文名稱: Ropivacaine hydrochloride 土霉抗體包裝25g
端羧基右旋聚乳(重均分子量48-73萬(wàn))英文名稱: Guaijaverin腫瘤/抗原117包裝5g
端羧基右旋聚乳(重均分子量5.5-9萬(wàn))英文名稱: Emtricitabine鳥脫羧抗2抗體包裝5MG