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上海谷研實(shí)業(yè)有限公司 |
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| 參考價(jià) | 面議 |
更新時(shí)間：2022-04-21 12:21:51瀏覽次數(shù)：234
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| 供貨周期 | 現(xiàn)貨 | 規(guī)格 | 500T |
|---|---|---|---|
| 貨號(hào) | GOY-01X9640 | 應(yīng)用領(lǐng)域 | 化工 |
| 主要用途 | 公司產(chǎn)品僅供科研 | 英文名稱 | CFDA SE Cell Proliferation and Cell Tracking Kit |
以下是細(xì)胞生物學(xué)試劑的詳細(xì)介紹：
中文名稱 | 英文名稱 | 產(chǎn)品規(guī)格 | 發(fā)貨周期 |
CFDA SE Cell Proliferation and Cell Tracking Kit | 500T | 1～3天 |
商品介紹：
CFDA SE Cell Proliferation and Cell Tracking Kit 是基于CFDA, SE對(duì)細(xì)胞進(jìn)行示蹤及增殖檢測(cè)的試劑盒，由CFDA,SE粉末、溶劑及相關(guān)細(xì)胞染色緩沖液組成，該試劑盒主要工作原理為：CFDA, SE具有細(xì)胞膜滲透性，本身不具有熒光發(fā)光性。當(dāng)通過(guò)被動(dòng)運(yùn)輸穿透細(xì)胞膜進(jìn)入活細(xì)胞后，可被胞漿內(nèi)的酯酶催化生成羧基熒光素琥珀酰亞胺酯（carboxyfluorescein succinimidyl ester, CFSE），后者可發(fā)強(qiáng)烈的綠色熒光，不能穿透細(xì)胞膜，能完好的保留在胞內(nèi)。CFSE還可自發(fā)性并不可逆地與細(xì)胞內(nèi)的氨基結(jié)合從而偶聯(lián)到細(xì)胞蛋白質(zhì)上，同時(shí)過(guò)量且未被偶聯(lián)的CFDA, SE通過(guò)被動(dòng)擴(kuò)散回到細(xì)胞外培養(yǎng)基內(nèi)，被后續(xù)清洗步驟所清除。經(jīng)CFDA, SE標(biāo)記的非分裂細(xì)胞的熒光非常穩(wěn)定，穩(wěn)定標(biāo)記的時(shí)間可達(dá)數(shù)月，因此非常適用于細(xì)胞群落分析。 CFDA, SE標(biāo)記細(xì)胞的熒光非常均一，優(yōu)于以前使用的其他細(xì)胞示蹤熒光探針如PKH26，并且分裂后的子代細(xì)胞的熒光分配也更均一。在細(xì)胞分裂增殖過(guò)程中，CFSE 標(biāo)記熒光可平均分配至兩個(gè)子代細(xì)胞中，熒光強(qiáng)度變?yōu)橛H代細(xì)胞的一半，通過(guò)流式細(xì)胞儀（FL1通道）根據(jù)熒光強(qiáng)度的不同，可檢測(cè)出未分裂細(xì)胞，分裂一次（1/2的熒光強(qiáng)度），二次（1/4的熒光強(qiáng)度），三次（1/8的熒光強(qiáng)度），以及更多分裂次數(shù)的細(xì)胞。CFSA，SE可檢測(cè)分裂次數(shù)多達(dá)八次甚至更多。經(jīng)CFDA, SE標(biāo)記的細(xì)胞可用于體外和體內(nèi)增殖研究，且具有不會(huì)使鄰近細(xì)胞染色的功能。CFDA, SE常用于淋巴細(xì)胞的增殖檢測(cè)，也可用于成纖維細(xì)胞，自然殺傷細(xì)胞，造血祖細(xì)胞等其他細(xì)胞的增殖檢測(cè)。 CFDA, SE標(biāo)記細(xì)胞呈綠色熒光，Ex=494nm，Em=521nm，除了流式細(xì)胞儀檢測(cè)細(xì)胞增殖外，還可用熒光酶標(biāo)板定量活細(xì)胞數(shù)目，或者用熒光顯微鏡進(jìn)行均一染色的細(xì)胞示蹤觀察。 本品為CFDA，SE細(xì)胞增殖與示蹤檢測(cè)試劑盒，包含配制CFDA，SE儲(chǔ)存液所需的溶劑和細(xì)胞標(biāo)記用的染色緩沖液，簡(jiǎn)化了實(shí)驗(yàn)前期準(zhǔn)備工作。另，CFDA,SE標(biāo)記細(xì)胞一般15min即可完成，對(duì)于不同細(xì)胞，需要自行摸索佳標(biāo)記時(shí)間。按照每個(gè)樣本的標(biāo)記體積為2ml計(jì)算。 |
公司產(chǎn)品僅用于科研細(xì)胞培養(yǎng)操作規(guī)程：
一．培養(yǎng)基及培養(yǎng)凍存條件準(zhǔn)備：
1）準(zhǔn)備RPMI-1640培養(yǎng)基(RPMI-1640：GIBCO)，90%；優(yōu)質(zhì)胎牛血清，10%。
2）培養(yǎng)條件： 氣相：空氣，95%；二氧化碳，5%。 溫度：37℃，培養(yǎng)箱濕度為70%-80%。
3）凍存液：90%血清，10%DMSO，現(xiàn)用現(xiàn)配，液氮儲(chǔ)存。
二．細(xì)胞處理：
1）復(fù)蘇細(xì)胞：將含有1mL細(xì)胞懸液的凍存管迅速放入37℃水浴中（水面要低于凍存管蓋部）搖晃解凍，移入事先準(zhǔn)備好的含有4mL培養(yǎng)基的15ml離心管中混合均勻。在1000RPM條件下離心4分鐘，棄去上清液，加入1mL培養(yǎng)基后吹勻。然后將所有細(xì)胞懸液移入含有5ml培養(yǎng)基的培養(yǎng)瓶中培養(yǎng)過(guò)夜。第二天換液并檢查細(xì)胞密度。
2）細(xì)胞傳代：如果細(xì)胞密度達(dá)80%-90%，即可進(jìn)行傳代培養(yǎng)。
對(duì)于懸浮細(xì)胞，傳代可參考以下方法：
方法一：收集細(xì)胞，1000RPM，常溫條件下離心5分鐘，棄去上清液，補(bǔ)加1-2mL培養(yǎng)液后吹勻，將細(xì)胞懸液按1：2到1：5的比例分到新的含8ml培養(yǎng)基的新皿中或者瓶中。
操作步驟：
1. 樣品染色
1) 將Binding Buffer（10×）稀釋成1×Binding buffer工作液備用（1ml Binding Buffer（10×）需加入9ml無(wú)菌去離子水）。
2) 對(duì)于懸浮細(xì)胞，500-1000g離心5min收集細(xì)胞。
對(duì)于貼壁細(xì)胞，要用不含EDTA的胰酶消化細(xì)胞，胰酶消化時(shí)間不宜過(guò)長(zhǎng)或過(guò)短，最好是在輕輕吹打可以使貼壁細(xì)胞吹打下來(lái)時(shí)，加入細(xì)胞培養(yǎng)液，將細(xì)胞輕輕吹打下來(lái)，轉(zhuǎn)移到離心管內(nèi)，500-1000g離心5min收集細(xì)胞。
3) 收集細(xì)胞后，加入預(yù)冷PBS溶液輕搖或用移液器輕柔吹打洗滌，離心收集細(xì)胞，共洗滌兩次。
4) 在細(xì)胞沉淀中加入1×Binding buffer工作液，重懸細(xì)胞，使細(xì)胞濃度達(dá)到1×106 cell/ml。
5) 吸取100μl細(xì)胞懸液（細(xì)胞總數(shù)為1×105 cell）至一新管中，加入5μl Annexin V-FITC和5-10 μl PI，輕輕混勻，室溫避光孵育15min。
2. 樣品檢測(cè)
1) 流式細(xì)胞儀檢測(cè)：
染色孵育后，每管加入400μl 1×Binding Buffer工作液，混勻后使用流式細(xì)胞儀檢測(cè)（1小時(shí)內(nèi)檢測(cè)）。
建議設(shè)置經(jīng)凋亡誘導(dǎo)的正常細(xì)胞、PI單染和Annexin V-FITC單染3個(gè)對(duì)照組，正常細(xì)胞組可作為熒光補(bǔ)償調(diào)節(jié)去除光譜重疊和設(shè)定十字門(mén)的位置。結(jié)果可用CellQuest等軟件進(jìn)行分析，繪制雙色散點(diǎn)圖（two-color dot plot），F(xiàn)ITC為橫坐標(biāo)，PI為縱坐標(biāo)。Annexin V-FITC和PI聯(lián)合使用時(shí)，活細(xì)胞僅有很低強(qiáng)度的背景熒光，早期凋亡細(xì)胞僅有較強(qiáng)的綠色熒光，晚期凋亡細(xì)胞有綠色和紅色雙重?zé)晒狻?/span>
2) 熒光顯微鏡檢測(cè)：
染色孵育后涂片，顯微鏡下觀察。使用熒光顯微鏡上的藍(lán)光和綠光通道分別觀察FITC和PI。被Annexin V-FITC結(jié)合的細(xì)胞顯示漿膜上有綠色光環(huán)。喪失細(xì)胞膜完整性的細(xì)胞，細(xì)胞核顯示紅色，膜上有綠色光環(huán)。
解整合金屬蛋白9(ADAM9)英文名稱：ADAM9 ELISA Kit卷曲螺旋結(jié)構(gòu)域蛋白62抗體包裝250mg
解整合金屬蛋白8(ADAM8)英文名稱：ADAM8 ELISA Kit卷曲螺旋結(jié)構(gòu)域蛋白64抗體包裝25g
結(jié)合珠蛋白(Hpt)英文名稱：Hpt ELISA Kit卷曲螺旋結(jié)構(gòu)域蛋白72抗體包裝5g
接觸蛋白1(CNTN1)英文名稱：CNTN1 ELISA Kit卷曲螺旋結(jié)構(gòu)域蛋白73抗體包裝100g
窖蛋白(CAV1)英文名稱：CAV1 ELISA Kit卷曲螺旋結(jié)構(gòu)域蛋白74B抗體包裝25g
角質(zhì)轉(zhuǎn)谷酰胺(TGM1)英文名稱：TGM1 ELISA Kit19號(hào)染色體開(kāi)放閱讀框25抗體包裝5g
角蛋白9(KRT9)英文名稱：KRT9 ELISA Kit19號(hào)染色體開(kāi)放閱讀框42抗體包裝100g
角蛋白18(KRT18)英文名稱：KRT18 ELISA Kit19號(hào)染色體開(kāi)放閱讀框44抗體包裝25g
膠質(zhì)細(xì)胞系來(lái)源神經(jīng)營(yíng)養(yǎng)因子(GDNF)英文名稱：GDNF ELISA Kit19號(hào)染色體開(kāi)放閱讀框48抗體包裝500g
腱蛋白樣蛋白2(CHRDL2)英文名稱：CHRDL2 ELISA Kit19號(hào)染色體開(kāi)放閱讀框50抗體包裝100g
堿性鞘磷脂磷二酯(Alk-Smase)英文名稱：Alk-Smase ELISA Kit19號(hào)染色體開(kāi)放閱讀框51抗體包裝25g
堿性成纖維細(xì)胞生長(zhǎng)因子(FGF2)英文名稱：FGF2 ELISA Kit19號(hào)染色體開(kāi)放閱讀框52抗體包裝5g
剪接因子3B亞基3(SF3B3)英文名稱：SF3B3 ELISA Kit19號(hào)染色體開(kāi)放閱讀框55抗體包裝1g
間隙連接蛋白43(CX43)英文名稱：CX43 ELISA Kit19號(hào)染色體開(kāi)放閱讀框56抗體包裝5g
間皮(MSLN)英文名稱：MSLN ELISA Kit19號(hào)染色體開(kāi)放閱讀框57抗體包裝25g
: T63資源名稱: 傷寒沙門(mén)氏菌 質(zhì)量規(guī)格：HPLC>98%,標(biāo)準(zhǔn)品脂肪結(jié)合蛋白4試劑盒羊蹄;Nepodin
米曲霉Aspergillus│oryzae 質(zhì)量規(guī)格：> 99%,EP脂肪甘油三酯脂試劑盒異肥皂草苷;Isosaponarin
新城疫病毒Rubulavirus│Newcastle disease virus 質(zhì)量規(guī)格：HPLC>98%,標(biāo)準(zhǔn)品脂肪分化相關(guān)蛋白試劑盒異七葉皂苷Ib;Isoescin Ib
細(xì)胞增殖與示蹤檢測(cè)試劑盒露濕粘座孢霉（或露濕漆斑） 4-(4-氟苯甲?；?丁酸中期因子Elisa
殼囊孢屬 三氟磺酸中性粒彈性蛋白Elisa
穗狀平臍蠕孢 美羅培南側(cè)鏈中性粒防御-1Elisa
芽胞桿 泰諾福韋中性粒防御1-3Elisa
紫色直絲鏈霉 固甾酮中性粒明膠相關(guān)脂質(zhì)運(yùn)載蛋白Elisa
布氏乳桿 4-溴苯基乙酸乙酯中性內(nèi)肽;腦啡肽Elisa
黑木耳 2,5-二溴苯甲腫瘤M2型酮酸激Elisa
豬丹絲 氨基二酸二乙酯鹽酸鹽腫瘤標(biāo)志物Elisa
干燥棒桿* 腫瘤抗原Elisa
果生鏈核盤(pán) 3,4,5-三氟腫瘤壞死因子αElisa
青紫鏈霉 8-氟喹唑啉-（2,4）二酮腫瘤壞死因子α誘導(dǎo)蛋白6Elisa
黑荊樹(shù)根瘤 2,3,4,5-四氟腫瘤壞死因子α轉(zhuǎn)化Elisa
根瘤 3-氯-2,5-二甲基吡腫瘤壞死因子βElisa
藏紅深黃孔 N,N-二甲基甘氨酸腫瘤壞死因子γElisa
中華根霉 2-溴-3-氟腫瘤壞死因子可溶性受體ⅠElisa
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