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          上海谷研實業(yè)有限公司>>細胞生物學試劑>>細胞凋亡與增殖>>細胞活力(活死細胞染色)檢測試劑盒

          細胞活力(活死細胞染色)檢測試劑盒

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          • 所在地 上海市

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          更新時間:2022-04-21 11:41:51瀏覽次數(shù):287

          聯(lián)系我們時請說明是化工儀器網(wǎng)上看到的信息,謝謝!

          產(chǎn)品簡介

          供貨周期 現(xiàn)貨 規(guī)格 1000T
          貨號 GOY-01X9609 應(yīng)用領(lǐng)域 化工
          主要用途 公司產(chǎn)品僅供科研 英文名稱 Live & Dead Viability/Cytotoxicity Assay Kit for A
          細胞活力(活死細胞染色)檢測試劑盒公司正在出售的產(chǎn)品:phospho-c-Jun (Ser63) 化原癌因c-Jun抗體Fmoc-L-脯氨 98%
          Jun B 活化蛋白激酶B抗體Fmoc-L-蘇氨 BR
          Jun D 活化蛋白激酶D抗體Fmoc-L-谷氨酰 BR
          CK I alpha/STK 屬絲/蘇氨蛋白質(zhì)激酶抗體L-谷氨二酯鹽鹽 98%
          CK II Alpha/STK 屬絲/蘇氨蛋白質(zhì)

          詳細介紹

          商品介紹:

          本試劑盒為動物細胞死活檢測提供了雙色熒光染色方法。本試劑盒采用兩種廣泛常用的熒光探針,通過檢測細胞內(nèi)酯酶活性和質(zhì)膜完整性兩個方面反映細胞活力。本試劑盒適用于熒光顯微鏡、熒光多孔板、掃描儀、流式細胞儀以及其他熒光檢測系統(tǒng)。本試劑盒可以應(yīng)用于大多數(shù)的真核哺乳動物細胞,包括貼壁細胞核某些組織,但不適用與細菌、酵母。該方法更快捷安全且靈敏度更高。

          原理:在鈣黃素AM 存在活細胞內(nèi)時,其特點就是由于胞內(nèi)的酯酶活性作用,由幾乎無熒光、具有細胞膜透性的鈣黃素AM生成具有強烈熒光信號的綠色熒光物質(zhì)(Ex/Em:495nm/520nm)。而對于受損的細胞膜來說,碘化丙啶(PI)可以傳過進入細胞,與核酸結(jié)合,熒光信號從而放大40 倍,產(chǎn)生一個明亮的紅色熒光信號的死細胞(Ex/Em:530nm/620nm)。

          以下是細胞生物學試劑的詳細介紹:

          中文名稱

          英文名稱

          產(chǎn)品規(guī)格

          發(fā)貨周期

          細胞活力(活死細胞染色)檢測試劑盒

          Live & Dead Viability/Cytotoxicity Assay Kit for Animal Cells

          1000T

          1~3天


          操作步驟:

          1. 樣品染色

          1) 將Binding Buffer(10×)稀釋成1×Binding buffer工作液備用(1ml Binding Buffer(10×)需加入9ml無菌去離子水)。

          2) 對于懸浮細胞,500-1000g離心5min收集細胞。

          對于貼壁細胞,要用不含EDTA的胰酶消化細胞,胰酶消化時間不宜過長或過短,最好是在輕輕吹打可以使貼壁細胞吹打下來時,加入細胞培養(yǎng)液,將細胞輕輕吹打下來,轉(zhuǎn)移到離心管內(nèi),500-1000g離心5min收集細胞。

          3) 收集細胞后,加入預(yù)冷PBS溶液輕搖或用移液器輕柔吹打洗滌,離心收集細胞,共洗滌兩次。

          4) 在細胞沉淀中加入1×Binding buffer工作液,重懸細胞,使細胞濃度達到1×106 cell/ml。

          5) 吸取100μl細胞懸液(細胞總數(shù)為1×105 cell)至一新管中,加入5μl Annexin V-FITC和5-10 μl PI,輕輕混勻,室溫避光孵育15min。

          2. 樣品檢測

          1) 流式細胞儀檢測:

          染色孵育后,每管加入400μl 1×Binding Buffer工作液,混勻后使用流式細胞儀檢測(1小時內(nèi)檢測)。

          建議設(shè)置經(jīng)凋亡誘導的正常細胞、PI單染和Annexin V-FITC單染3個對照組,正常細胞組可作為熒光補償調(diào)節(jié)去除光譜重疊和設(shè)定十字門的位置。結(jié)果可用CellQuest等軟件進行分析,繪制雙色散點圖(two-color dot plot),F(xiàn)ITC為橫坐標,PI為縱坐標。Annexin V-FITC和PI聯(lián)合使用時,活細胞僅有很低強度的背景熒光,早期凋亡細胞僅有較強的綠色熒光,晚期凋亡細胞有綠色和紅色雙重熒光。

          2) 熒光顯微鏡檢測:

          染色孵育后涂片,顯微鏡下觀察。使用熒光顯微鏡上的藍光和綠光通道分別觀察FITC和PI。被Annexin V-FITC結(jié)合的細胞顯示漿膜上有綠色光環(huán)。喪失細胞膜完整性的細胞,細胞核顯示紅色,膜上有綠色光環(huán)。
          公司產(chǎn)品僅用于科研細胞培養(yǎng)操作規(guī)程:

          一.培養(yǎng)基及培養(yǎng)凍存條件準備:

          1)準備RPMI-1640培養(yǎng)基(RPMI-1640:GIBCO),90%;優(yōu)質(zhì)胎牛血清,10%。

          2)培養(yǎng)條件: 氣相:空氣,95%;二氧化碳,5%。 溫度:37℃,培養(yǎng)箱濕度為70%-80%。

          3)凍存液:90%血清,10%DMSO,現(xiàn)用現(xiàn)配,液氮儲存。

          二.細胞處理:

          1)復蘇細胞:將含有1mL細胞懸液的凍存管迅速放入37℃水浴中(水面要低于凍存管蓋部)搖晃解凍,移入事先準備好的含有4mL培養(yǎng)基的15ml離心管中混合均勻。在1000RPM條件下離心4分鐘,棄去上清液,加入1mL培養(yǎng)基后吹勻。然后將所有細胞懸液移入含有5ml培養(yǎng)基的培養(yǎng)瓶中培養(yǎng)過夜。第二天換液并檢查細胞密度。

          2)細胞傳代:如果細胞密度達80%-90%,即可進行傳代培養(yǎng)。

          對于懸浮細胞,傳代可參考以下方法:

          方法一:收集細胞,1000RPM,常溫條件下離心5分鐘,棄去上清液,補加1-2mL培養(yǎng)液后吹勻,將細胞懸液按1:2到1:5的比例分到新的含8ml培養(yǎng)基的新皿中或者瓶中。

          胰島樣生長因子結(jié)合蛋白6(IGFBP6)英文名稱:IGFBP6 ELISA Kit磷化EGF應(yīng)答因子1抗體包裝25g

          胰島樣生長因子結(jié)合蛋白4(IGFBP4)英文名稱:IGFBP4 ELISA Kitβ抗體包裝5g

          胰島樣生長因子結(jié)合蛋白3(IGFBP3)英文名稱:IGFBP3 ELISA Kit磷化BH3結(jié)構(gòu)域凋亡誘導蛋白抗體包裝25g

          胰島樣生長因子結(jié)合蛋白2(IGFBP2)英文名稱:IGFBP2 ELISA KitARF鳥苷交換因子BIG1抗體包裝5g

          胰島樣生長因子結(jié)合蛋白1(IGFBP1)英文名稱:IGFBP1 ELISA Kit腦特異性同源蛋白BSX抗體包裝1g

          胰島樣生長因子2(IGF2)英文名稱:IGF2 ELISA Kit鋅指蛋白47抗體包裝25g

          胰島樣生長因子1(IGF1)英文名稱:IGF1 ELISA Kit?BTBD14A蛋白抗體包裝5g

          胰島樣蛋白6(INSL6)英文名稱:INSL6 ELISA Kit鋅指蛋白851抗體包裝25g

          胰島樣蛋白5(INSL5)英文名稱:INSL5 ELISA Kit嗜乳脂蛋白2亞型A1抗體包裝5g

          胰島樣蛋白3(INSL3)英文名稱:INSL3 ELISA Kit磷化c-fos抗體包裝100g

          胰島受體底物2(IRS2)英文名稱:IRS2 ELISA Kit磷化c-fos抗體包裝25g

          胰島受體底物1(IRS1)英文名稱:IRS1 ELISA Kit磷化原癌基因c-Jun抗體包裝500g

          胰島受體(ISR)英文名稱:ISR ELISA Kit磷化原癌基因c-kit抗體包裝5ml

          一氧化氮合運輸因子(NOSTRIN)英文名稱:NOSTRIN ELISA Kit1號染色體開放閱讀框148抗體包裝1g

          葉受體1(FOLR1)英文名稱:FOLR1 ELISA Kit性T抗原-4抗體包裝5g

          去整合樣金屬蛋白23抗體白介21(IL21)MK-801 (Dizocilpine) is a potent N-methyl-D-aspartate (NMDA) receptor antagonist
          細胞活力(活死細胞染色)檢測試劑盒球孢毛霉 2-吡啶甲酰視黃酸檢測試劑盒

          類芽胞桿 2,5-二溴-3-氯吡啶視錐蛋白樣蛋白1檢測試劑盒

          腐霉 噻唑-5-甲酸嗜鉻粒蛋白A檢測試劑盒

          芽孢桿屬 咪唑-2-甲酸嗜環(huán)蛋白;親環(huán)素A檢測試劑盒

          側(cè)耳 2-巰基嘧啶嗜環(huán)蛋白;親環(huán)素B檢測試劑盒

          果生鏈核盤 (3,5-二甲基吡唑-1-基)乙酸嗜酸粒趨化蛋白Eotaxin 1檢測試劑盒

          貝倫格葡萄座腔 坎地沙坦酯嗜酸活化趨化因子3檢測試劑盒

          大腸埃希氏 1-甲基-1H-吡唑-5-羧酸嗜酸性粒趨化蛋白檢測試劑盒

          微黃漢納酵母 2--9,9-二甲基芴嗜酸性粒趨化蛋白檢測試劑盒

          豬丹絲 4-溴-3-甲酸乙酯嗜酸性粒陽離子蛋白檢測試劑盒

          硬結(jié)節(jié)桿 2-溴-5-氯甲苯嗜異性抗體檢測試劑盒

          大腸桿屬 2,5,6-三氨基-4-磺酸基嘧啶受體TNFRSF結(jié)合絲氨酸蘇氨酸激酶2檢測試劑盒

          pcDNA6/V5-His A 2,8-二氯喹啉-3-甲瘦素檢測試劑盒

          叢花青霉 N-甲基-1-萘瘦素受體檢測試劑盒

          棉花新鞘氨 2-(2-甲氧基乙氧基)乙酸舒檢測試劑盒

           


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