商品介紹:
Pitolisant鹽酸鹽(BF2.649;Ciproxidine)是新型的人重組H3受體選擇性反向激動劑,Ki為0.16nM。 注:本品僅可用于科研實驗,嚴(yán)禁用于臨床醫(yī)療及其他用途! CAS號:903576-44-3 別名:Ciproxidine;BF 2649 純度:99.22% 分子式:C??H??Cl?NO 分子量:332.31 儲存條件:-20℃,有效期2年,溶入溶劑后-20℃請盡量在一個月內(nèi)使用。 |
以下是細(xì)胞生物學(xué)試劑的詳細(xì)介紹:
中文名稱 | 英文名稱 | 產(chǎn)品規(guī)格 | 發(fā)貨周期 |
人重組H3受體反向激動劑 | Pitolisant hydrochloride | 1mL(10mM)|10mg|50mg | 1~3天 |
操作步驟:
1. 樣品染色
1) 將Binding Buffer(10×)稀釋成1×Binding buffer工作液備用(1ml Binding Buffer(10×)需加入9ml無菌去離子水)。
2) 對于懸浮細(xì)胞,500-1000g離心5min收集細(xì)胞。
對于貼壁細(xì)胞,要用不含EDTA的胰酶消化細(xì)胞,胰酶消化時間不宜過長或過短,最好是在輕輕吹打可以使貼壁細(xì)胞吹打下來時,加入細(xì)胞培養(yǎng)液,將細(xì)胞輕輕吹打下來,轉(zhuǎn)移到離心管內(nèi),500-1000g離心5min收集細(xì)胞。
3) 收集細(xì)胞后,加入預(yù)冷PBS溶液輕搖或用移液器輕柔吹打洗滌,離心收集細(xì)胞,共洗滌兩次。
4) 在細(xì)胞沉淀中加入1×Binding buffer工作液,重懸細(xì)胞,使細(xì)胞濃度達(dá)到1×106 cell/ml。
5) 吸取100μl細(xì)胞懸液(細(xì)胞總數(shù)為1×105 cell)至一新管中,加入5μl Annexin V-FITC和5-10 μl PI,輕輕混勻,室溫避光孵育15min。
2. 樣品檢測
1) 流式細(xì)胞儀檢測:
染色孵育后,每管加入400μl 1×Binding Buffer工作液,混勻后使用流式細(xì)胞儀檢測(1小時內(nèi)檢測)。
建議設(shè)置經(jīng)凋亡誘導(dǎo)的正常細(xì)胞、PI單染和Annexin V-FITC單染3個對照組,正常細(xì)胞組可作為熒光補(bǔ)償調(diào)節(jié)去除光譜重疊和設(shè)定十字門的位置。結(jié)果可用CellQuest等軟件進(jìn)行分析,繪制雙色散點圖(two-color dot plot),F(xiàn)ITC為橫坐標(biāo),PI為縱坐標(biāo)。Annexin V-FITC和PI聯(lián)合使用時,活細(xì)胞僅有很低強(qiáng)度的背景熒光,早期凋亡細(xì)胞僅有較強(qiáng)的綠色熒光,晚期凋亡細(xì)胞有綠色和紅色雙重?zé)晒狻?/span>
2) 熒光顯微鏡檢測:
染色孵育后涂片,顯微鏡下觀察。使用熒光顯微鏡上的藍(lán)光和綠光通道分別觀察FITC和PI。被Annexin V-FITC結(jié)合的細(xì)胞顯示漿膜上有綠色光環(huán)。喪失細(xì)胞膜完整性的細(xì)胞,細(xì)胞核顯示紅色,膜上有綠色光環(huán)。
公司產(chǎn)品僅用于科研細(xì)胞培養(yǎng)操作規(guī)程:
一.培養(yǎng)基及培養(yǎng)凍存條件準(zhǔn)備:
1)準(zhǔn)備RPMI-1640培養(yǎng)基(RPMI-1640:GIBCO),90%;優(yōu)質(zhì)胎牛血清,10%。
2)培養(yǎng)條件: 氣相:空氣,95%;二氧化碳,5%。 溫度:37℃,培養(yǎng)箱濕度為70%-80%。
3)凍存液:90%血清,10%DMSO,現(xiàn)用現(xiàn)配,液氮儲存。
二.細(xì)胞處理:
1)復(fù)蘇細(xì)胞:將含有1mL細(xì)胞懸液的凍存管迅速放入37℃水浴中(水面要低于凍存管蓋部)搖晃解凍,移入事先準(zhǔn)備好的含有4mL培養(yǎng)基的15ml離心管中混合均勻。在1000RPM條件下離心4分鐘,棄去上清液,加入1mL培養(yǎng)基后吹勻。然后將所有細(xì)胞懸液移入含有5ml培養(yǎng)基的培養(yǎng)瓶中培養(yǎng)過夜。第二天換液并檢查細(xì)胞密度。
2)細(xì)胞傳代:如果細(xì)胞密度達(dá)80%-90%,即可進(jìn)行傳代培養(yǎng)。
對于懸浮細(xì)胞,傳代可參考以下方法:
方法一:收集細(xì)胞,1000RPM,常溫條件下離心5分鐘,棄去上清液,補(bǔ)加1-2mL培養(yǎng)液后吹勻,將細(xì)胞懸液按1:2到1:5的比例分到新的含8ml培養(yǎng)基的新皿中或者瓶中。
紫紅曲霉巨噬調(diào)控相關(guān)蛋白LRRFIP1抗體Human PDS5A ELISA Kit天青殺(AZU)ELISA Kit
貝倫格葡萄座腔菌梨生?;痛冱S體生成抗體Human PDS5B ELISA Kit天門冬酰-tRNA合成(DARS)ELISA Kit
紫芝整合和生長因子樣蛋白1抗體Human PDSS2 ELISA Kit天門冬轉(zhuǎn)/谷草轉(zhuǎn)(GOT/GPT)ELISA Kit
微小桿菌相似腫瘤抑制基因HUGL抗體Human PDE6A ELISA Kit天門冬基轉(zhuǎn)移(AST)ELISA Kit
植物乳桿菌LAMTOR1蛋白抗體Human PDXDC1 ELISA Kit特異性巨噬武裝因子(SMAF)ELISA Kit
齊藤土星形酵母LIM結(jié)構(gòu)域結(jié)合蛋白3抗體Human PDE6B ELISA Kit套膜蛋白(iNV)ELISA Kit
彩色豆馬勃ILK結(jié)合蛋白LIMS2抗體Human PDCD5 ELISA Kit糖脂抗體(glycolipid)ELISA Kit
茄勞爾氏菌淋巴特異性接頭蛋白抗體Human PXDN(Peroxidasin homolog) ELISA Kit糖原磷化同工MM(GP-MM)ELISA Kit
凍膠假絲酵母表面免疫球蛋白樣轉(zhuǎn)錄因子4抗體Human PDCD6 ELISA Kit糖原磷化同工II(GP-II)ELISA Kit
球孢白僵菌淋巴抗原6重復(fù)位點蛋白G6F抗體Human PDCD7 ELISA Kit糖原磷化同工BB(GP-BB)ELISA Kit
樁蛋白抗體Human PDCD6IP ELISA Kit糖原磷化(GP)ELISA Kit
雞葡萄球菌脂蛋白受體相關(guān)蛋白/低密度脂蛋白相關(guān)蛋白的相關(guān)蛋白1抗體Human PDCL2 ELISA Kit糖原合成激3(GSK-3)ELISA Kit
大肥菇皮屑樣蛋白2抗體Human PDCL ELISA Kit糖原合成激(GSK)ELISA Kit
慢生根瘤菌層粘蛋白α3抗體Human PDCD10 ELISA Kit糖缺失性轉(zhuǎn)鐵蛋白(CDT)ELISA Kit
球孢白僵菌溶體相關(guān)膜蛋白1抗體Human PCNP ELISA Kit糖皮質(zhì)激受體β(GR-β)ELISA Kit
解淀粉鹽盒菌羧肽抑制劑抗體Human PDCD2(Programmed cell death protein 2) ELISA Kit糖皮質(zhì)激受體α(GR-α)ELISA Kit
巨大芽孢桿菌Bacillus│megaterium 質(zhì)量規(guī)格:>98.0%(HPLC)(N)擬人參皂苷RT5
黑曲霉Aspergillus│niger 質(zhì)量規(guī)格:>98.0%(HPLC)人參皂苷Rf
小單孢菌屬Micromonospora│sp. 質(zhì)量規(guī)格:>85.0%(HPLC)人參皂苷Rd
人重組H3受體反向激動劑C Peptide C-肽抗體鈀銨 Pd ≥29.5%
CPT1A 肉棕櫚酰轉(zhuǎn)移1A抗體亞鈀銨 Pd ≥36.5%
CPSF4/CPSF30 剪切和多聚腺苷化特異性因子4抗體銠銨 Rh 27.5%
Calretinin 鈣結(jié)合蛋白抗體二(苯)二化鈀 Pd 27.7%
Crk p38 /CrkII Crk p38抗體二亞硝二氨鉑 59.0%
phospho-Crk p38 (Tyr221) 化Crk p38抗體銥 Ir 35% in HCl
SLAMF6 SLAMF6抗體亞鉑 AR
CRMP2 CRMP2抗體氧化鈀 Pd ≥85%