以下是細(xì)胞生物學(xué)試劑的詳細(xì)介紹:
中文名稱 | 英文名稱 | 產(chǎn)品規(guī)格 | 發(fā)貨周期 |
JAK-3抑制劑(WHI-P97) | WHI-P97 | 1mL(10mM)|2mg|5mg|10mg|50mg|100mg | 1~3天 |
公司產(chǎn)品僅用于科研細(xì)胞培養(yǎng)操作規(guī)程:
一.培養(yǎng)基及培養(yǎng)凍存條件準(zhǔn)備:
1)準(zhǔn)備RPMI-1640培養(yǎng)基(RPMI-1640:GIBCO),90%;優(yōu)質(zhì)胎牛血清,10%。
2)培養(yǎng)條件: 氣相:空氣,95%;二氧化碳,5%。 溫度:37℃,培養(yǎng)箱濕度為70%-80%。
3)凍存液:90%血清,10%DMSO,現(xiàn)用現(xiàn)配,液氮儲(chǔ)存。
二.細(xì)胞處理:
1)復(fù)蘇細(xì)胞:將含有1mL細(xì)胞懸液的凍存管迅速放入37℃水浴中(水面要低于凍存管蓋部)搖晃解凍,移入事先準(zhǔn)備好的含有4mL培養(yǎng)基的15ml離心管中混合均勻。在1000RPM條件下離心4分鐘,棄去上清液,加入1mL培養(yǎng)基后吹勻。然后將所有細(xì)胞懸液移入含有5ml培養(yǎng)基的培養(yǎng)瓶中培養(yǎng)過(guò)夜。第二天換液并檢查細(xì)胞密度。
2)細(xì)胞傳代:如果細(xì)胞密度達(dá)80%-90%,即可進(jìn)行傳代培養(yǎng)。
對(duì)于懸浮細(xì)胞,傳代可參考以下方法:
方法一:收集細(xì)胞,1000RPM,常溫條件下離心5分鐘,棄去上清液,補(bǔ)加1-2mL培養(yǎng)液后吹勻,將細(xì)胞懸液按1:2到1:5的比例分到新的含8ml培養(yǎng)基的新皿中或者瓶中。
商品介紹:
WHI-P97是JAK-3抑制劑。 注:本品僅可用于科研實(shí)驗(yàn),嚴(yán)禁用于臨床醫(yī)療及其他用途! CAS號(hào):211555-05-4 純度:99.13% 分子量:455.1 儲(chǔ)存條件:-20℃,有效期2年,溶入溶劑后-20℃請(qǐng)盡量在一個(gè)月內(nèi)使用。 |
操作步驟:
1. 樣品染色
1) 將Binding Buffer(10×)稀釋成1×Binding buffer工作液備用(1ml Binding Buffer(10×)需加入9ml無(wú)菌去離子水)。
2) 對(duì)于懸浮細(xì)胞,500-1000g離心5min收集細(xì)胞。
對(duì)于貼壁細(xì)胞,要用不含EDTA的胰酶消化細(xì)胞,胰酶消化時(shí)間不宜過(guò)長(zhǎng)或過(guò)短,最好是在輕輕吹打可以使貼壁細(xì)胞吹打下來(lái)時(shí),加入細(xì)胞培養(yǎng)液,將細(xì)胞輕輕吹打下來(lái),轉(zhuǎn)移到離心管內(nèi),500-1000g離心5min收集細(xì)胞。
3) 收集細(xì)胞后,加入預(yù)冷PBS溶液輕搖或用移液器輕柔吹打洗滌,離心收集細(xì)胞,共洗滌兩次。
4) 在細(xì)胞沉淀中加入1×Binding buffer工作液,重懸細(xì)胞,使細(xì)胞濃度達(dá)到1×106 cell/ml。
5) 吸取100μl細(xì)胞懸液(細(xì)胞總數(shù)為1×105 cell)至一新管中,加入5μl Annexin V-FITC和5-10 μl PI,輕輕混勻,室溫避光孵育15min。
2. 樣品檢測(cè)
1) 流式細(xì)胞儀檢測(cè):
染色孵育后,每管加入400μl 1×Binding Buffer工作液,混勻后使用流式細(xì)胞儀檢測(cè)(1小時(shí)內(nèi)檢測(cè))。
建議設(shè)置經(jīng)凋亡誘導(dǎo)的正常細(xì)胞、PI單染和Annexin V-FITC單染3個(gè)對(duì)照組,正常細(xì)胞組可作為熒光補(bǔ)償調(diào)節(jié)去除光譜重疊和設(shè)定十字門的位置。結(jié)果可用CellQuest等軟件進(jìn)行分析,繪制雙色散點(diǎn)圖(two-color dot plot),F(xiàn)ITC為橫坐標(biāo),PI為縱坐標(biāo)。Annexin V-FITC和PI聯(lián)合使用時(shí),活細(xì)胞僅有很低強(qiáng)度的背景熒光,早期凋亡細(xì)胞僅有較強(qiáng)的綠色熒光,晚期凋亡細(xì)胞有綠色和紅色雙重?zé)晒狻?/span>
2) 熒光顯微鏡檢測(cè):
染色孵育后涂片,顯微鏡下觀察。使用熒光顯微鏡上的藍(lán)光和綠光通道分別觀察FITC和PI。被Annexin V-FITC結(jié)合的細(xì)胞顯示漿膜上有綠色光環(huán)。喪失細(xì)胞膜完整性的細(xì)胞,細(xì)胞核顯示紅色,膜上有綠色光環(huán)。
黑曲霉磷化DDX58抗體Human SPOPL (Speckle-type POZ protein-like) ELISA KIT人白介2(IL-2)免疫試劑盒
球孢白僵菌磷化DDX58抗體Human SPTA1 (Spectrin alpha chain, erythrocytic 1) ELISA KIT人白介1受體樣1(IL1RL1)免疫試劑盒
釀酒酵母磷化結(jié)蛋白抗體Human SMTN (Smoothelin) ELISA KIT人白介1受體相關(guān)激-4(IRAK-4)免疫試劑盒
微桿菌屬磷化結(jié)蛋白抗體Human SP1(Transcription factor Sp1) ELISA Kit人白介1受體相關(guān)激1(IRAK1)免疫試劑盒
產(chǎn)堿假單胞菌二價(jià)金屬轉(zhuǎn)運(yùn)蛋白1抗體Human SLC23A1 (Solute carrier family 23 member 1) ELISA KIT人白介1受體拮抗劑(IL1Ra)免疫試劑盒
宋內(nèi)氏志賀氏菌51592多巴受體D2抗體Human SRM (Spermidine synthase) ELISA KIT人白介1可溶性受體Ⅱ(IL-1sRⅡ)免疫試劑盒
謝瓦曲霉多巴受體D1抗體Human GPLD1(Phosphatidylinositol-glycan-specific phospholipase D) ELISA Kit人白介1可溶性受體Ⅰ(IL-1sRⅠ)免疫試劑盒
*蜜環(huán)菌多巴受體相互作用蛋白1抗體Human SMS (Spermine synthase) ELISA KIT人白介1β轉(zhuǎn)換(ICE)免疫試劑盒
紫穗槐根瘤菌凋亡相關(guān)蛋白激1抗體Human SLC18A3 (Vesicular acetylcholine transporter) ELISA KIT人白介-1β前體(Pro-IL-1β)免疫試劑盒
白地霉凋亡相關(guān)蛋白激2抗體Human SON (Protein SON) ELISA KIT人白介1β前體(pro-IL1B)免疫試劑盒
魯氏不動(dòng)桿菌多巴、cAMP調(diào)節(jié)磷蛋白抗體Human SMPD2 (Sphingomyelin phosphodiesterase 2) ELISA KIT人白介1β(IL-1β)免疫試劑盒
繩狀籃狀菌磷化多巴/cAMP調(diào)節(jié)神經(jīng)磷蛋白抗體Human SLC2A8 (Solute carrier family 2, facilitated glucose transporter member 8) ELISA KIT人白介1α(IL-1α)免疫試劑盒
青霉菌磷化多巴/cAMP調(diào)節(jié)磷蛋白抗體Human SGMS2 (Phosphatidylcholine:ceramide cholinephosphotransferase 2) ELISA KIT人白介19(IL-19)免疫試劑盒
乳乳球菌乳脂亞種磷化雙皮質(zhì)抗體Human SLC2A8 (Solute carrier family 2, facilitated glucose transporter member 8) ELISA KIT人白介18結(jié)合蛋白(IL-18BP)免疫試劑盒
球孢鏈霉菌高加索變種磷化Disabled 1抗體Human SORT1(Sortilin) ELISA Kit人白介18(IL-18)免疫試劑盒
產(chǎn)短桿菌磷化Disabled 1抗體Human SGMS2 (Phosphatidylcholine:ceramide cholinephosphotransferase 2) ELISA KIT人白介17F(IL-17F)免疫試劑盒
微球菌Micrococcus│sp. 質(zhì)量規(guī)格:1000μg/ml七葉皂苷C
枯草芽孢桿菌Bacillus│subtilis (Ehrenberg) Cohn 質(zhì)量規(guī)格:1000μg/ml七葉皂苷B
: ivcas7.00615資源名稱: 蘇云金芽孢桿菌 質(zhì)量規(guī)格:1000μg/ml七葉皂苷A
JAK-3抑制劑(WHI-P97)Pregnenolone(標(biāo)準(zhǔn)品)英文名稱: 6-TG/ThioguanineCD9蛋白抗體包裝100g
Progesterone(標(biāo)準(zhǔn)品)英文名稱: 6-TG/ThioguanineCD23/FcεRII抗體包裝25g
Promestriene(標(biāo)準(zhǔn)品)英文名稱: All-Trans-Retinoic Acid\TretinoinCD27抗體包裝500g
RNH-奧美沙坦酯雜質(zhì)(標(biāo)準(zhǔn)品)英文名稱: All-Trans-Retinoic Acid\TretinoinCD30抗體包裝25g
Rosiglitazone HCL (標(biāo)準(zhǔn)品)英文名稱: BicalutamideCD43抗體包裝5g
Rosiglitazone Maleate(標(biāo)準(zhǔn)品)英文名稱: BicalutamideCD48抗體包裝1g
Rosiglitazone(標(biāo)準(zhǔn)品)英文名稱: Busulfan/MyleranCD44抗體包裝5g
Sitagliptin phosphate monoh...英文名稱: Busulfan/Myleran整合αX抗體包裝100g
Sivelestat sodium (標(biāo)準(zhǔn)品)英文名稱: Lomustine表面趨化因子受體5抗體包裝25g
Sorafenib tosylate(標(biāo)準(zhǔn)品)英文名稱: LomustineCD2抗體包裝25g
Stanozolol(標(biāo)準(zhǔn)品)英文名稱: Hydroxyurea/HydroxycarbamideC-肽抗體包裝5g
Tamoxifen Citrate (標(biāo)準(zhǔn)品)英文名稱: Hydroxyurea/Hydroxycarbamide鈣結(jié)合蛋白抗體包裝1g
Tetrabenazine(標(biāo)準(zhǔn)品)英文名稱: Toremifene CitrateC-反應(yīng)蛋白抗體包裝5g
Toremifene Citrate(標(biāo)準(zhǔn)品)英文名稱: Toremifene CitrateC-反應(yīng)蛋白單克抗體包裝100g
Triamcinolone Acetonide(標(biāo)準(zhǔn)品...英文名稱: Toremifene Citrate環(huán)腺苷應(yīng)答元件結(jié)合蛋白抗體包裝25g