商品介紹:
GSK872是RIPK3抑制劑,高親和力結(jié)合RIP3激酶結(jié)構(gòu)域(IC50=1.8nM),并抑制激酶活性(IC50=1.3nM)。 注:本品僅可用于科研實(shí)驗(yàn),嚴(yán)禁用于臨床醫(yī)療及其他用途! CAS號(hào):1346546-69-7 別名:GSK872 純度:99.65% 分子量:383.49 儲(chǔ)存條件:-20℃,有效期2年,溶入溶劑后-20℃請(qǐng)盡量在一個(gè)月內(nèi)使用。 |
產(chǎn)品屬性:
中文名稱:RIPK3抑制劑(GSK872)
英文名稱:GSK872
產(chǎn)品規(guī)格:1mL(10mM)|5mg|10mg|25mg|50mg|100mg
發(fā)貨周期:1~3天
公司產(chǎn)品僅用于科研
細(xì)胞生物學(xué)研究有以下幾個(gè)方面:
細(xì)胞生物學(xué)的研究內(nèi)容十分廣泛,主要包括:
①細(xì)胞核、染色體以及基因表達(dá)的研究;
②生物膜與細(xì)胞器的研究;
③細(xì)胞骨架體系的研究;
④細(xì)胞增殖及其調(diào)控;
⑤細(xì)胞分化及其調(diào)控;
⑥細(xì)胞的衰老與編程性死亡(凋亡);
⑦細(xì)胞的起源與進(jìn)化;
⑧細(xì)胞工程.
實(shí)驗(yàn)報(bào)告:
一、分離與培養(yǎng):
1、無菌條件下,取出1-3d 齡SD大鼠心房組織,然后用PBS將此組織塊清洗2次,最后將1mm3左右大??;
2、往組織塊中加入4 mL酶消化液(0.1% 和0.1% I型膠原酶),混懸10s,置37℃條件下消化10min,之后用滴管吹打制成單細(xì)胞懸液,自然沉淀并收集上清,用含10% FBS培養(yǎng)基終止消化后4℃放置;
3、剩下的組織再加入3~4mL酶消化液,混懸10s,置37℃消化10 min后,按上述方法收集上清并終止消化后4℃放置,重復(fù)此步驟2-3次,直至組織*被消化;
4、用200目不銹鋼篩網(wǎng)過濾細(xì)胞消化液,1200r/min 離心10min,棄去上清,沉淀細(xì)胞用含有10% FBS DMEM/F12培養(yǎng)基混懸,接種于25cm2培養(yǎng)瓶,放置于37℃ ,5%CO2 培養(yǎng)箱中培養(yǎng);
5、差速貼壁1h后,吸出培養(yǎng)基,按實(shí)驗(yàn)需要接種于6孔板中繼續(xù)培養(yǎng);
二、免疫熒光鑒定:
1、待心房肌細(xì)胞生長至80%融合時(shí),棄去培養(yǎng)基,用溫育的PBS沖洗細(xì)胞2次,每次10min,然后用4%多聚甲醛在室溫條件下固定細(xì)胞15min;
2、PBS沖洗細(xì)胞2次,每次10min,然后在4℃條件下,用0.1%Triton X-100透膜15min;
3、PBS沖洗細(xì)胞2次,每次10min,然后在室溫條件下,用4% BSA封閉細(xì)胞30min;
4、按1: 100的比例稀釋?duì)?actin一抗,然后將其放在4℃冰箱中孵育細(xì)胞過夜;
5、PBS沖洗細(xì)胞3次,每次10min,按1:150的比例稀釋抗α-actin的二抗, 37℃條件下放置1h;
6、用PBS沖洗3次,每次10min,最后在倒置熒光顯微鏡下觀察圖像并拍照。
操作規(guī)程
1、在96孔板加入細(xì)胞100μL/孔,通常細(xì)胞增殖實(shí)驗(yàn)每孔加入100微升2000個(gè)細(xì)胞,細(xì)胞毒性實(shí)驗(yàn)每孔加入100微升5000~10000個(gè)細(xì)胞(具體每孔所用的細(xì)胞的數(shù)目,需根據(jù)細(xì)胞的大小,細(xì)胞增殖速度的快慢等決定)。置37℃ 5%CO2細(xì)胞培養(yǎng)箱培養(yǎng)24小時(shí).
2、.加入適當(dāng)濃度的0~10μL 受試化合物。
3、將96孔板在37℃,含5% CO2空氣及100%濕度的細(xì)胞培養(yǎng)箱中孵育適當(dāng)時(shí)間。
4、將5×MTT 用稀釋液稀釋成1× MTT 溶液。
5、每孔加50μL 1× MTT 溶液,在37℃孵育4小時(shí),使MTT 還原為甲臜。
6、吸出上清液,每孔加150μL DMSO 使甲臜溶解,用平板搖床搖勻。
7、酶標(biāo)儀在570nm 波長處檢測每孔的光密度(如無570nm 濾光片,可以使用560-600nm 的濾光片)。
8、結(jié)果分析
a、細(xì)胞的存活率:將各測試孔的OD 值減去本底OD 值(*培養(yǎng)基加MTT,無細(xì)胞)或空白藥物孔OD 值(*培養(yǎng)基加受試藥物的不同稀釋度加MTT,無細(xì)胞),各重復(fù)孔的OD 值取平均數(shù)±SD。細(xì)胞的存活率以T/C%表示,T 為加藥細(xì)胞的OD 值,C 為對(duì)照細(xì)胞的OD 值。細(xì)胞存活率% =(加藥細(xì)胞OD/對(duì)照細(xì)胞OD)×100
b、求出T/C = 50% 時(shí)的藥物濃度(IC50)及T/C = 10%時(shí)的藥物濃度(IC90)
白色勞瑟爾氏菌色b5還原3抗體Human FHL1 ELISA Kit豚鼠25羥基維生D3(25 HVD3)免疫試劑盒
果生鏈核盤菌CWC22蛋白抗體Human FGFR1OP2 ELISA Kit兔ELSIA試劑盒
三峽1號(hào)(平菇類)9號(hào)染色體開放閱讀框95抗體Human FHL3 ELISA Kit兔組織因子途徑抑制物(TFPI)免疫試劑盒
綿皮臥孔菌(可訂購)19號(hào)染色體開放閱讀框67抗體Human FEV ELISA Kit兔子組織因子(TF)免疫試劑盒
葡萄座腔菌磷化酪蛋白激1γ1+γ2+γ3抗體Human FGF13 ELISA Kit兔子組織型纖溶原激活劑(t-PA)免疫試劑盒
鹽單胞菌原卟啉氧化3抗體Human FHL2 ELISA Kit兔子組織多肽抗原(TPA)免疫試劑盒
枯草芽孢桿菌間隙連接蛋白43抗體Human FGF18 ELISA Kit兔子組(HIS)免疫試劑盒
綠色木霉緊密連接蛋白25抗體Human FBXO3 ELISA Kit兔子總堿性磷(TALP)免疫試劑盒
榛黃假單胞菌中心體蛋白78抗體Human FGF16 ELISA Kit兔子轉(zhuǎn)化生長因子β1(TGF-β1)免疫試劑盒
大腸桿菌6號(hào)染色體開放閱讀框146抗體Human FGF17 ELISA Kit兔子腫瘤壞死因子相關(guān)凋亡誘導(dǎo)配體受體3(TRAIL-R3)免疫試劑盒
釀酒酵母6號(hào)染色體開放閱讀框154抗體Human FDFT1 ELISA Kit兔子腫瘤壞死因子α(TNF-α)免疫試劑盒
大腸埃希氏菌9號(hào)染色體開放閱讀框16抗體Human FBXO41 ELISA Kit兔子中性粒彈性蛋白(NE)免疫試劑盒
鏈霉菌屬9號(hào)染色體開放閱讀框78抗體Human FBXO43 ELISA Kit兔子脂聯(lián)(ADP)免疫試劑盒
長枝木霉9號(hào)染色體開放閱讀框79抗體Human FBXO6 ELISA Kit兔子脂多糖/內(nèi)(LPS)免疫試劑盒
植物乳桿菌植物亞種9號(hào)染色體開放閱讀框84抗體Human FBXW2 ELISA Kit兔子脂蛋白磷脂A2(Lp-PLA2)免疫試劑盒
美澳型核果褐腐病菌9號(hào)染色體開放閱讀框85抗體Human FBXO2 ELISA Kit兔子粘蛋白1(MUC1)免疫試劑盒
金黃色葡萄球菌金黃色亞種Staphylococcus│aureus subsp. 質(zhì)量規(guī)格:>98%α/β干擾受體試劑盒羥基檸檬
: Bt0249資源名稱: 蘇云金芽胞桿菌 質(zhì)量規(guī)格:>98.5%,BRZ-DNA結(jié)合蛋白1試劑盒普拉洛芬
白僵菌Beauveria│sp. 質(zhì)量規(guī)格:>98%,BRWnt-3a蛋白試劑盒派利文堿
RIPK3抑制劑(GSK872)端羥基聚乳(重均分子量206-288萬)英文名稱: Omeprazole Sodium Monohydrate神經(jīng)營養(yǎng)因子3抗體包裝5g
端羥基聚乳(重均分子量26-36萬)英文名稱: Dipivefrin hydrochlorideNEEP21蛋白抗體包裝100g
端羥基聚乳(重均分子量3-5.5萬)英文名稱: Methylophiopogonone A磷化谷受體2B抗體包裝25g
端羥基聚乳(重均分子量36-48萬)英文名稱: Penciclovir磷化谷受體2B抗體包裝100g
端羥基聚乳(重均分子量48-73萬)英文名稱: BenazeprilatNADH氧化還原輔10抗體包裝25g
端羥基聚乳(重均分子量5.5-9萬)英文名稱: Aceclofenac膜相關(guān)的蛋白質(zhì)HEM2抗體包裝500g
端羥基聚乳(重均分子量73-102萬)英文名稱: TG-101209;TG 101209跨膜受體蛋白Notch-2抗體包裝100g
端羥基聚乳(重均分子量9-17萬)英文名稱: Azasetron Hydrochloride磷化KB抑制蛋白β抗體包裝500g
端羧基聚(乳-羥基乙75/25)共聚物(重均分子量...英文名稱: Propranolol Hydrochloride磷化核因子p50/k基因結(jié)合核因子抗體包裝1g
端羧基聚(乳-羥基乙75/25)共聚物(重均分子量...英文名稱: Metadoxine泛樣蛋白NEDD8抗體包裝100g
端羧基聚(乳-羥基乙75/25)共聚物(重均分子量...英文名稱: D-Pyroglutamic acid核因子1C型抗體包裝25g
端羧基聚(乳-羥基乙75/25)共聚物(重均分子量...英文名稱: Isorhamnetin 3-sophoroside-7-rhamnoside磷化神經(jīng)正五聚體1抗體包裝5g
端羧基聚(乳-羥基乙75/25)共聚物(重均分子量...英文名稱: (-)-HolostyligoneRNA結(jié)合蛋白NOB1抗體包裝1g
端羧基聚(乳-羥基乙75/25)共聚物(重均分子量...英文名稱: 5-Carboxy-X- rhodamine; 5-ROX磷化T激活核轉(zhuǎn)錄因子4抗體包裝5g
端羧基聚(乳-羥基乙75/25)共聚物(重均分子量...英文名稱: Propylthiouracil膽汁受體抗體包裝1g