以下是細(xì)胞生物學(xué)試劑的詳細(xì)介紹:
商品介紹:
CR4056是一個選擇性的人重組MAO-A抑制劑,其IC50值為202.7nM。CR4056也是咪唑啉-2受體(I2R)的配體,其IC50值為596nM。 注:本品僅可用于科研實驗,嚴(yán)禁用于臨床醫(yī)療及其他用途! CAS號:1004997-71-0 純度:98.32% 分子量:272.3 儲存條件:-20℃,有效期2年,溶入溶劑后-20℃請盡量在一個月內(nèi)使用。 |
公司產(chǎn)品僅用于科研細(xì)胞培養(yǎng)操作規(guī)程:
一.培養(yǎng)基及培養(yǎng)凍存條件準(zhǔn)備:
1)準(zhǔn)備RPMI-1640培養(yǎng)基(RPMI-1640:GIBCO),90%;優(yōu)質(zhì)胎牛血清,10%。
2)培養(yǎng)條件: 氣相:空氣,95%;二氧化碳,5%。 溫度:37℃,培養(yǎng)箱濕度為70%-80%。
3)凍存液:90%血清,10%DMSO,現(xiàn)用現(xiàn)配,液氮儲存。
二.細(xì)胞處理:
1)復(fù)蘇細(xì)胞:將含有1mL細(xì)胞懸液的凍存管迅速放入37℃水浴中(水面要低于凍存管蓋部)搖晃解凍,移入事先準(zhǔn)備好的含有4mL培養(yǎng)基的15ml離心管中混合均勻。在1000RPM條件下離心4分鐘,棄去上清液,加入1mL培養(yǎng)基后吹勻。然后將所有細(xì)胞懸液移入含有5ml培養(yǎng)基的培養(yǎng)瓶中培養(yǎng)過夜。第二天換液并檢查細(xì)胞密度。
2)細(xì)胞傳代:如果細(xì)胞密度達(dá)80%-90%,即可進(jìn)行傳代培養(yǎng)。
對于懸浮細(xì)胞,傳代可參考以下方法:
方法一:收集細(xì)胞,1000RPM,常溫條件下離心5分鐘,棄去上清液,補(bǔ)加1-2mL培養(yǎng)液后吹勻,將細(xì)胞懸液按1:2到1:5的比例分到新的含8ml培養(yǎng)基的新皿中或者瓶中。
操作步驟:
1. 樣品染色
1) 將Binding Buffer(10×)稀釋成1×Binding buffer工作液備用(1ml Binding Buffer(10×)需加入9ml無菌去離子水)。
2) 對于懸浮細(xì)胞,500-1000g離心5min收集細(xì)胞。
對于貼壁細(xì)胞,要用不含EDTA的胰酶消化細(xì)胞,胰酶消化時間不宜過長或過短,最好是在輕輕吹打可以使貼壁細(xì)胞吹打下來時,加入細(xì)胞培養(yǎng)液,將細(xì)胞輕輕吹打下來,轉(zhuǎn)移到離心管內(nèi),500-1000g離心5min收集細(xì)胞。
3) 收集細(xì)胞后,加入預(yù)冷PBS溶液輕搖或用移液器輕柔吹打洗滌,離心收集細(xì)胞,共洗滌兩次。
4) 在細(xì)胞沉淀中加入1×Binding buffer工作液,重懸細(xì)胞,使細(xì)胞濃度達(dá)到1×106 cell/ml。
5) 吸取100μl細(xì)胞懸液(細(xì)胞總數(shù)為1×105 cell)至一新管中,加入5μl Annexin V-FITC和5-10 μl PI,輕輕混勻,室溫避光孵育15min。
2. 樣品檢測
1) 流式細(xì)胞儀檢測:
染色孵育后,每管加入400μl 1×Binding Buffer工作液,混勻后使用流式細(xì)胞儀檢測(1小時內(nèi)檢測)。
建議設(shè)置經(jīng)凋亡誘導(dǎo)的正常細(xì)胞、PI單染和Annexin V-FITC單染3個對照組,正常細(xì)胞組可作為熒光補(bǔ)償調(diào)節(jié)去除光譜重疊和設(shè)定十字門的位置。結(jié)果可用CellQuest等軟件進(jìn)行分析,繪制雙色散點圖(two-color dot plot),F(xiàn)ITC為橫坐標(biāo),PI為縱坐標(biāo)。Annexin V-FITC和PI聯(lián)合使用時,活細(xì)胞僅有很低強(qiáng)度的背景熒光,早期凋亡細(xì)胞僅有較強(qiáng)的綠色熒光,晚期凋亡細(xì)胞有綠色和紅色雙重?zé)晒狻?/span>
2) 熒光顯微鏡檢測:
染色孵育后涂片,顯微鏡下觀察。使用熒光顯微鏡上的藍(lán)光和綠光通道分別觀察FITC和PI。被Annexin V-FITC結(jié)合的細(xì)胞顯示漿膜上有綠色光環(huán)。喪失細(xì)胞膜完整性的細(xì)胞,細(xì)胞核顯示紅色,膜上有綠色光環(huán)。
米曲霉F-box蛋白9抗體Human ZPBP ELISA Kit馬內(nèi)皮PAS結(jié)構(gòu)域蛋白1(EPAS1)免疫試劑盒
昆明靈芝脂肪?;€原1抗體Human ZO-2 ELISA Kit馬免疫球蛋白G(IgG)免疫試劑盒
輪紋大莖點菌生長抑制基因39蛋白抗體Human ZNF740 ELISA Kit馬免疫球蛋白E(IgE)免疫試劑盒
云芝栓孔菌(變色栓菌)磷神經(jīng)膜抗體Human ZNF74 ELISA Kit馬錳超氧化物歧化(Mn-SOD/SOD2)免疫試劑盒
貝倫格葡萄座腔菌梨生?;痛嘈?/span>X相關(guān)蛋白1抗體Human ZRANB2 ELISA Kit馬免疫試劑盒
鐮孢菌F-box蛋白家族FBXO31抗體Human ZNF746 ELISA Kit馬結(jié)合珠蛋白/觸珠蛋白(Hpt/HP)免疫試劑盒
Aureimonas ureilytica卵巢濾泡激抗體(BHD綜合征)Human ZRANB3 ELISA Kit馬窖蛋白Caveolin-1(CAV1)免疫試劑盒
霉擬蠟孔菌羊抗人纖維蛋白原抗體Human ZNF750 ELISA Kit馬黃體生成(LH)免疫試劑盒
薄黑孔菌FXYD離子轉(zhuǎn)運(yùn)調(diào)節(jié)因子7抗體Human ZNF785 ELISA Kit馬環(huán)磷腺苷(cAMP)免疫試劑盒
干草鞘單胞菌脂肪結(jié)合蛋白5抗體(上皮型)Human ZNF774 ELISA Kit馬環(huán)磷鳥苷(cGMP)免疫試劑盒
抗霉菌鏈霉菌脂氧受體1抗體Human ZNF846 ELISA Kit馬過氧化氫(CAT)免疫試劑盒
秀珍菇半胱蛋白8相關(guān)蛋白2抗體Human ZNF763 ELISA Kit馬谷胱甘肽還原(GSR)免疫試劑盒
尿氧化節(jié)桿菌叉頭蛋白F1抗體Human ZNF839 ELISA Kit馬睪(T)免疫試劑盒
枯草芽胞桿菌高嗜性粒綜合癥相關(guān)蛋白FIP1L1抗體Human ZNHIT1 ELISA Kit馬促腎上腺皮質(zhì)激(ACTH)免疫試劑盒
大腸埃希菌叉頭蛋白D4Human ZNHIT2 ELISA Kit馬促卵泡(FSH)免疫試劑盒
傳染性支氣管炎病磷化細(xì)絲蛋白A抗體Human ZNF703 ELISA Kit馬雌激(E)免疫試劑盒
大腸埃希菌Escherichia│coli 質(zhì)量規(guī)格:分析標(biāo)準(zhǔn)品,>99.5%(HPLC)羅漢果皂苷ⅢA1
鏈格孢Alternaria│sp. 質(zhì)量規(guī)格:分析標(biāo)準(zhǔn)品,99%靈芝A
米曲霉Aspergillus│oryzae 質(zhì)量規(guī)格:10μg/ml,u=2%異-羅漢果皂苷 V
人重組MAO-A抑制劑(CR4056)鹽阿可樂定/鹽安普樂定(標(biāo)準(zhǔn)品)英文名稱: Brivanib alaninate熱休克蛋白J2抗體包裝25g
鹽阿米洛利(標(biāo)準(zhǔn)品)英文名稱: Gentiobiose雙特異性酪磷化調(diào)節(jié)激1B抗體包裝5g
鹽阿米洛利雜質(zhì)(4-基-6--1,3-基二硫酰...英文名稱: Silodosin二?;视图?抗體包裝100g
鹽(標(biāo)準(zhǔn)品)英文名稱: SilodosinDNA依賴蛋白激催化亞基抗體包裝25g
鹽阿莫羅芬/鹽阿莫洛芬 (標(biāo)準(zhǔn)品)英文名稱: Brimonidine tartrate 雙同源框蛋白4抗體包裝500g
鹽阿那格雷(標(biāo)準(zhǔn)品)英文名稱: Brimonidine tartrate 無精癥缺失基因1抗體包裝5g
鹽阿糖胞苷(標(biāo)準(zhǔn)品)英文名稱: Imatinib磷化周期檢測點激2抗體包裝250mg
鹽阿扎司瓊(標(biāo)準(zhǔn)品)英文名稱: Aliskiren Inter-5通道蛋白DRK1抗體包裝1g
鹽埃羅替尼(標(biāo)準(zhǔn)品)英文名稱: GHKcu/Growth-modulating peptideGTP發(fā)育調(diào)控結(jié)合蛋白1抗體包裝5g
鹽艾司洛爾(標(biāo)準(zhǔn)品)英文名稱: Triamterene骨架4.1蛋白家族DAL1抗體包裝1G
(標(biāo)準(zhǔn)品)英文名稱: TriamtereneDAP凋亡誘導(dǎo)蛋白激2抗體包裝5G
鹽安他唑啉(標(biāo)準(zhǔn)品)英文名稱: Lafutidine信號轉(zhuǎn)導(dǎo)功能磷蛋白DAB2抗體包裝1g
鹽啉(標(biāo)準(zhǔn)品)英文名稱: Lafutidine命運(yùn)決定因子DACH1抗體包裝5g
鹽基葡萄糖(標(biāo)準(zhǔn)品)英文名稱: Tocofersolan,VE-TPGSDab2相互作用蛋白抗體包裝10mg
鹽溴索(標(biāo)準(zhǔn)品)英文名稱: Methoxyphenamine HCl線粒體2,4-雙烯酰還原1抗體包裝1g