商品介紹:
用途: 尿沉渣染色檢查 注意事項(xiàng): 染色后紅細(xì)胞呈紅色或無(wú)色,白細(xì)胞呈深藍(lán)、淡藍(lán)或無(wú)色。 儲(chǔ)存條件:4℃,避光,12個(gè)月 |
產(chǎn)品屬性:
中文名稱(chēng):尿沉渣染色液(Sternheimer法)
英文名稱(chēng):
產(chǎn)品規(guī)格:50ml|100ml
發(fā)貨周期:1~3天
公司產(chǎn)品僅用于科研
細(xì)胞生物學(xué)研究有以下幾個(gè)方面:
細(xì)胞生物學(xué)的研究?jī)?nèi)容十分廣泛,主要包括:
①細(xì)胞核、染色體以及基因表達(dá)的研究;
②生物膜與細(xì)胞器的研究;
③細(xì)胞骨架體系的研究;
④細(xì)胞增殖及其調(diào)控;
⑤細(xì)胞分化及其調(diào)控;
⑥細(xì)胞的衰老與編程性死亡(凋亡);
⑦細(xì)胞的起源與進(jìn)化;
⑧細(xì)胞工程.
實(shí)驗(yàn)報(bào)告:
一、分離與培養(yǎng):
1、無(wú)菌條件下,取出1-3d 齡SD大鼠心房組織,然后用PBS將此組織塊清洗2次,最后將1mm3左右大小;
2、往組織塊中加入4 mL酶消化液(0.1% 和0.1% I型膠原酶),混懸10s,置37℃條件下消化10min,之后用滴管吹打制成單細(xì)胞懸液,自然沉淀并收集上清,用含10% FBS培養(yǎng)基終止消化后4℃放置;
3、剩下的組織再加入3~4mL酶消化液,混懸10s,置37℃消化10 min后,按上述方法收集上清并終止消化后4℃放置,重復(fù)此步驟2-3次,直至組織*被消化;
4、用200目不銹鋼篩網(wǎng)過(guò)濾細(xì)胞消化液,1200r/min 離心10min,棄去上清,沉淀細(xì)胞用含有10% FBS DMEM/F12培養(yǎng)基混懸,接種于25cm2培養(yǎng)瓶,放置于37℃ ,5%CO2 培養(yǎng)箱中培養(yǎng);
5、差速貼壁1h后,吸出培養(yǎng)基,按實(shí)驗(yàn)需要接種于6孔板中繼續(xù)培養(yǎng);
二、免疫熒光鑒定:
1、待心房肌細(xì)胞生長(zhǎng)至80%融合時(shí),棄去培養(yǎng)基,用溫育的PBS沖洗細(xì)胞2次,每次10min,然后用4%多聚甲醛在室溫條件下固定細(xì)胞15min;
2、PBS沖洗細(xì)胞2次,每次10min,然后在4℃條件下,用0.1%Triton X-100透膜15min;
3、PBS沖洗細(xì)胞2次,每次10min,然后在室溫條件下,用4% BSA封閉細(xì)胞30min;
4、按1: 100的比例稀釋?duì)?actin一抗,然后將其放在4℃冰箱中孵育細(xì)胞過(guò)夜;
5、PBS沖洗細(xì)胞3次,每次10min,按1:150的比例稀釋抗α-actin的二抗, 37℃條件下放置1h;
6、用PBS沖洗3次,每次10min,最后在倒置熒光顯微鏡下觀察圖像并拍照。
操作規(guī)程
1、在96孔板加入細(xì)胞100μL/孔,通常細(xì)胞增殖實(shí)驗(yàn)每孔加入100微升2000個(gè)細(xì)胞,細(xì)胞毒性實(shí)驗(yàn)每孔加入100微升5000~10000個(gè)細(xì)胞(具體每孔所用的細(xì)胞的數(shù)目,需根據(jù)細(xì)胞的大小,細(xì)胞增殖速度的快慢等決定)。置37℃ 5%CO2細(xì)胞培養(yǎng)箱培養(yǎng)24小時(shí).
2、.加入適當(dāng)濃度的0~10μL 受試化合物。
3、將96孔板在37℃,含5% CO2空氣及100%濕度的細(xì)胞培養(yǎng)箱中孵育適當(dāng)時(shí)間。
4、將5×MTT 用稀釋液稀釋成1× MTT 溶液。
5、每孔加50μL 1× MTT 溶液,在37℃孵育4小時(shí),使MTT 還原為甲臜。
6、吸出上清液,每孔加150μL DMSO 使甲臜溶解,用平板搖床搖勻。
7、酶標(biāo)儀在570nm 波長(zhǎng)處檢測(cè)每孔的光密度(如無(wú)570nm 濾光片,可以使用560-600nm 的濾光片)。
8、結(jié)果分析
a、細(xì)胞的存活率:將各測(cè)試孔的OD 值減去本底OD 值(*培養(yǎng)基加MTT,無(wú)細(xì)胞)或空白藥物孔OD 值(*培養(yǎng)基加受試藥物的不同稀釋度加MTT,無(wú)細(xì)胞),各重復(fù)孔的OD 值取平均數(shù)±SD。細(xì)胞的存活率以T/C%表示,T 為加藥細(xì)胞的OD 值,C 為對(duì)照細(xì)胞的OD 值。細(xì)胞存活率% =(加藥細(xì)胞OD/對(duì)照細(xì)胞OD)×100
b、求出T/C = 50% 時(shí)的藥物濃度(IC50)及T/C = 10%時(shí)的藥物濃度(IC90)
洋川芎內(nèi)酯I(標(biāo)準(zhǔn)品)英文名稱(chēng): L-Alanamine Hydrochloride絲/蘇蛋白激蛋白抗體包裝25g
洋薊;1,5-二咖啡??鼘?標(biāo)準(zhǔn)品)英文名稱(chēng): L-Histidine monohydrate monohydrochlorideHAUS5蛋白抗體包裝1ml
氧代川南亭堿(標(biāo)準(zhǔn)品)英文名稱(chēng): L-Homoarginine Hydrochloride 組織H4受體抗體包裝1ml
氧化白藜蘆(標(biāo)準(zhǔn)品)英文名稱(chēng): TPCKmRNA cap基轉(zhuǎn)移抗體包裝1ml
氧化白藜蘆-2-O-β-D-吡喃葡萄糖苷英文名稱(chēng): TPCK5’-三磷聚核苷抗體包裝1g
氧化白藜蘆-3'-O-β-D-吡喃葡萄糖苷英文名稱(chēng): Ala-Gln 組三聚體核苷結(jié)合蛋白1抗體包裝25g
氧化槐定堿(標(biāo)準(zhǔn)品)英文名稱(chēng): H-Arg-OMe·2HCl狀腺促進(jìn)激alpha鏈包裝5g
氧化槐果堿(標(biāo)準(zhǔn)品)英文名稱(chēng): D-Alaninamide hydrochlorideA型流感病H7N9凝集抗體包裝1g
氧化苦參堿(標(biāo)準(zhǔn)品)英文名稱(chēng): Fenticonazole Nitrate組蛋白去乙?;?抗體包裝250mg
氧化前胡(標(biāo)準(zhǔn)品)英文名稱(chēng): 1-Benzyl D-Glutamate人乙肝表面抗原抗體(包被)包裝5g
氧化芍藥苷,羥基芍藥苷(標(biāo)準(zhǔn)品)英文名稱(chēng): D-Phenylalanine 腎損傷分子1抗體(型肝炎病受體1)包裝1ml
藥根堿(標(biāo)準(zhǔn)品)英文名稱(chēng): D-Alanine組富含脯糖蛋白抗體包裝1ml
野百合堿(標(biāo)準(zhǔn)品)英文名稱(chēng): β-AlanineHER3受體抗體包裝100g
野黃芩苷(標(biāo)準(zhǔn)品)英文名稱(chēng): β-Alanine磷化HER3受體抗體包裝25g
野黃芩(標(biāo)準(zhǔn)品)英文名稱(chēng): D-Tryptophan磷化HER3受體抗體包裝100g
強(qiáng)酒海桿菌Marinobacter│vinifirmus 質(zhì)量規(guī)格:HPLC≥98.0% ,標(biāo)準(zhǔn)品卵巢癌抗原X1試劑盒;Caffeine
陰溝腸桿菌Enterobacter│cloacae 質(zhì)量規(guī)格:>99%,AR離子胞內(nèi)通道蛋白4試劑盒卡比多巴;S-(-)-Carbidopa
: AS4.867資源名稱(chēng): 天藍(lán)色鏈霉菌 質(zhì)量規(guī)格:>98.5%,BR綠膿桿菌外A試劑盒基異茜草;Rubiadin、 1,3
尿沉渣染色液(Sternheimer法)枯草芽孢桿 N-Boc-DL--2-甲酸可溶性淀粉Elisa
植物乳桿植物亞種 (R)-(+)-啉-2-羧酸可溶性糖Elisa
大腸埃希 5-硝基酪氨酸脫羧Elisa
假單胞 1,1'-雙(二異基膦)二茂鐵磷酸果糖激Elisa
松樹(shù)噬幾丁質(zhì) 二氯(五甲基環(huán)戊二烯基)合釕(III)聚合物磷酸果糖激1Elisa
糞腸球 乙酸甲酯磷酸烯式酮酸羧化Elisa
球孢白僵 [1,1'-雙(二-苯基膦基)二茂鐵]氯化鈀(II),二氯復(fù)合物(1:1)磷酸烯式酮酸羧激Elisa
炭黑曲霉 4-氨基-2-氯嘧啶-5-甲磷脂酸Elisa
梭 2-溴-5-氟苯甲綠色熒光蛋白Elisa
釀酒酵母 煙酸甲酯酸Elisa
蕁麻青霉 4,5-二氯-3-羥基噠酸甲酯Elisa
豬鏈球 喹哪啶酸木質(zhì)Elisa
蘇云金芽胞桿 N-甲氧基-N-(基硅烷甲基)芐尿苷二磷酸Elisa
葡萄座腔 2-(溴甲基)苯酸脲Elisa
非無(wú)藥品 耐膽鹽革蘭陰性(陰性) 4-(2-萘基)苯酸檸檬酸合Elisa