異染顆粒染色液(改良Albert法)公司正在出售的產(chǎn)品：Phospho-Met (Tyr1003) /FITC 熒光標記化肝生長因子受體(原癌因)抗體IgG十二烷化銨 99%，離子對色譜級
Phospho-Met (Tyr1234/1235) /FITC 熒光標記化肝生長因子受體(原癌因)抗體IgG十二烷溴化銨 99%
Phospho-Met (Tyr1349) /FITC 熒光標記化肝生長

以下是細胞生物學試劑的詳細介紹：

商品介紹：

公司產(chǎn)品僅用于科研細胞培養(yǎng)操作規(guī)程：

一．培養(yǎng)基及培養(yǎng)凍存條件準備：

1）準備RPMI-1640培養(yǎng)基(RPMI-1640：GIBCO)，90%；優(yōu)質(zhì)胎牛血清，10%。

2）培養(yǎng)條件： 氣相：空氣，95%；二氧化碳，5%。 溫度：37℃，培養(yǎng)箱濕度為70%-80%。

3）凍存液：90%血清，10%DMSO，現(xiàn)用現(xiàn)配，液氮儲存。

二．細胞處理：

1）復蘇細胞：將含有1mL細胞懸液的凍存管迅速放入37℃水浴中（水面要低于凍存管蓋部）搖晃解凍，移入事先準備好的含有4mL培養(yǎng)基的15ml離心管中混合均勻。在1000RPM條件下離心4分鐘，棄去上清液，加入1mL培養(yǎng)基后吹勻。然后將所有細胞懸液移入含有5ml培養(yǎng)基的培養(yǎng)瓶中培養(yǎng)過夜。第二天換液并檢查細胞密度。

2）細胞傳代：如果細胞密度達80%-90%，即可進行傳代培養(yǎng)。

對于懸浮細胞，傳代可參考以下方法：

方法一：收集細胞，1000RPM，常溫條件下離心5分鐘，棄去上清液，補加1-2mL培養(yǎng)液后吹勻，將細胞懸液按1：2到1：5的比例分到新的含8ml培養(yǎng)基的新皿中或者瓶中。

操作步驟：

1. 樣品染色

1) 將Binding Buffer（10×）稀釋成1×Binding buffer工作液備用（1ml Binding Buffer（10×）需加入9ml無菌去離子水）。

2) 對于懸浮細胞，500-1000g離心5min收集細胞。

對于貼壁細胞，要用不含EDTA的胰酶消化細胞，胰酶消化時間不宜過長或過短，最好是在輕輕吹打可以使貼壁細胞吹打下來時，加入細胞培養(yǎng)液，將細胞輕輕吹打下來，轉(zhuǎn)移到離心管內(nèi)，500-1000g離心5min收集細胞。

3) 收集細胞后，加入預冷PBS溶液輕搖或用移液器輕柔吹打洗滌，離心收集細胞，共洗滌兩次。

4) 在細胞沉淀中加入1×Binding buffer工作液，重懸細胞，使細胞濃度達到1×106 cell/ml。

5) 吸取100μl細胞懸液（細胞總數(shù)為1×105 cell）至一新管中，加入5μl Annexin V-FITC和5-10 μl PI，輕輕混勻，室溫避光孵育15min。

2. 樣品檢測

1) 流式細胞儀檢測：

染色孵育后，每管加入400μl 1×Binding Buffer工作液，混勻后使用流式細胞儀檢測（1小時內(nèi)檢測）。

建議設置經(jīng)凋亡誘導的正常細胞、PI單染和Annexin V-FITC單染3個對照組，正常細胞組可作為熒光補償調(diào)節(jié)去除光譜重疊和設定十字門的位置。結果可用CellQuest等軟件進行分析，繪制雙色散點圖（two-color dot plot），F(xiàn)ITC為橫坐標，PI為縱坐標。Annexin V-FITC和PI聯(lián)合使用時，活細胞僅有很低強度的背景熒光，早期凋亡細胞僅有較強的綠色熒光，晚期凋亡細胞有綠色和紅色雙重熒光。

2) 熒光顯微鏡檢測：

染色孵育后涂片，顯微鏡下觀察。使用熒光顯微鏡上的藍光和綠光通道分別觀察FITC和PI。被Annexin V-FITC結合的細胞顯示漿膜上有綠色光環(huán)。喪失細胞膜完整性的細胞，細胞核顯示紅色，膜上有綠色光環(huán)。
山扁豆生棒孢α2C-AR腎上腺能受體抗體Human CAMK2B(Calcium/calmodulin-dependent protein kinase type II subunit beta) ELISA Kit豬D二聚體(D2D)免疫試劑盒

瑞氏青霉中心體蛋白AZI1抗體Human CDCA8(Cell division cycle-associated protein 8) ELISA Kit豬C肽(C-Peptide)免疫試劑盒

大麗花輪枝孢α蛋白激3抗體（心?。〩uman MAP4K4 ELISA Kit豬C反應蛋白(CRP)免疫試劑盒

葡枝根霉表皮型脂氧合3抗體（魚鱗病相關蛋白）Human MAP4K5 ELISA Kit豬c-fos 免疫試劑盒

研究團隊節(jié)桿菌錨蛋白重復域28抗體Human Matrilin 2 ELISA Kit豬B淋巴瘤因子2(Bcl-2)免疫試劑盒

芽孢八疊球菌屬淋巴相關AF4樣蛋白抗體Human MAPK11(Mitogen-activated protein kinase 11) ELISA Kit豬Bcl-2相關X蛋白(BAX)免疫試劑盒

乳酒假絲酵母錨蛋白重復結構域蛋白12抗體Human MAP7 ELISA Kit豬Apelin(APLN)免疫試劑盒

玫煙色棒束孢錨蛋白重復結構域蛋白13A抗體Human MAP7 ELISA Kit豬5羥色(5-HT)免疫試劑盒

秀珍菇錨蛋白重復結構域蛋白9抗體Human MAPK12 ELISA Kit豬Ⅲ型前膠原肽(PⅢNP)免疫試劑盒

冷溫木拉克酵母錨蛋白重復及SAM結構域蛋白1A抗體Human MAPK4 ELISA Kit豬Ⅲ型前膠原基末端肽(PⅢNP)免疫試劑盒

樹脂殼菌脂肪特定轉(zhuǎn)錄因子2抗體Human MAPK13 ELISA Kit豬Ⅲ型前膠原基端肽(PⅢNT)免疫試劑盒

金黃紅色球菌載脂蛋白L3抗體Human MAPK7 ELISA Kit豬Ⅲ型膠原(Col Ⅲ)免疫試劑盒

釀酒酵母腫瘤/抗原81抗體Human MAPK6 ELISA Kit豬25羥基維生D3(25 HVD3)免疫試劑盒

芽胞桿菌共濟失調(diào)蛋白7樣2抗體Human MAPKBP1 ELISA Kit豬Ⅰ型前膠原羧基端肽(PⅠCP)免疫試劑盒

釀酒酵母鹽耐藥蛋白ARS2抗體Human Marcks ELISA Kit豬17羥孕(17-OHP)免疫試劑盒

約氏乳桿菌芳香基硫酯1抗體Human MAPRE2 ELISA Kit豬1,25二羥基維生D3(1,25 DHVD3)免疫試劑盒

大腸埃希氏菌Escherichia│coli 質(zhì)量規(guī)格：>99%,AR二試劑盒異橙黃

巴斯德畢赤酵母Pichia│pastoris 質(zhì)量規(guī)格：>98%，BR轉(zhuǎn)/谷轉(zhuǎn)試劑盒月桂氮卓

枯草芽孢桿菌Bacillus│subtilis 質(zhì)量規(guī)格：>99%,AR別孕烯/3α,5α-四氫孕試劑盒油
異染顆粒染色液(改良Albert法)黑腐皮殼 8-甲氧基-2-甲基喹啉屋塵螨變應原Derp1 IgG抗體Elisa

衛(wèi)矛擬盤多毛孢 2-氨基-5-溴-4-甲基噻唑C-C趨化因子6Elisa

細鏈格孢 4-乙炔基甲酯肌漿;內(nèi)質(zhì)網(wǎng)鈣ATPElisa

蘋果鏈格孢 2-溴-3-(2-乙基己基)噻吩腦啡肽Elisa

小青霉 1,4-二氧六環(huán)-2-酮凝集Elisa

雙孢蘑菇 3-氟-4-溴-苯乙酮酪蛋白激2Elisa

大腸埃希 4-乙炔基苯RGD三肽Elisa

青色鏈霉 1-嘧啶2--4-羧酸癌標志物-CA153Elisa

褐疣柄牛肝 2,4-二-5-氟苯屋塵螨變應原Derp1 IgE抗體Elisa

枯草芽孢桿 3-甲氧基烯酸甲酯泛樣修飾因子激活1Elisa

新城疫病 3'-苯酮胰島樣生長因子結合蛋白5Elisa

黑曲霉 3-氨基-3-(3,4-二甲氧基苯基)酸IV型前膠原Elisa

裂褶 3-溴-4-甲氧基苯甲20S蛋白體Elisa

木拉克酵母屬 (S)-1-氨基-3--2-鹽酸鹽CD200分子Elisa

雞痘病 叔丁基磺酰過氧化4Elisa