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          上海谷研實(shí)業(yè)有限公司>>細(xì)胞生物學(xué)試劑>>細(xì)胞凋亡與增殖>>JC-1熒光探針

          JC-1熒光探針

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          • JC-1熒光探針

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          • 所在地 上海市

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          更新時(shí)間:2022-04-21 12:18:35瀏覽次數(shù):442

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          產(chǎn)品簡(jiǎn)介

          供貨周期 現(xiàn)貨 規(guī)格 1mg
          貨號(hào) GOY-01X9636 應(yīng)用領(lǐng)域 化工
          主要用途 公司產(chǎn)品僅供科研    
          JC-1熒光探針公司*的產(chǎn)品:Defensin Beta 2/DEFB2 防御β2抗體肉桂酯 98%
          Defensin Beta 2 防御β2抗體肉桂酯 99%
          DAP-5/p97 死亡相關(guān)蛋白5抗體戊酯 standard for GC, ≥99.5% (GC)
          DAPK1 凋亡相關(guān)蛋白激1抗體戊酯 98%
          DAPK2 凋亡相關(guān)蛋白激2抗體菠蘿酯 99%
          DAPK3 凋亡相關(guān)蛋白

          詳細(xì)介紹

          公司產(chǎn)品僅用于科研

          細(xì)胞生物學(xué)研究有以下幾個(gè)方面:

          細(xì)胞生物學(xué)的研究?jī)?nèi)容十分廣泛,主要包括:

          ①細(xì)胞核、染色體以及基因表達(dá)的研究;

          ②生物膜與細(xì)胞器的研究;

          ③細(xì)胞骨架體系的研究;

          ④細(xì)胞增殖及其調(diào)控;

          ⑤細(xì)胞分化及其調(diào)控;

          ⑥細(xì)胞的衰老與編程性死亡(凋亡);

          ⑦細(xì)胞的起源與進(jìn)化;

          ⑧細(xì)胞工程.

          產(chǎn)品屬性:

          中文名稱(chēng):JC-1熒光探針

          英文名稱(chēng):

          產(chǎn)品規(guī)格:1mg

          發(fā)貨周期:1~3天

          商品介紹:

          JC-1 用于檢測(cè)細(xì)胞的線粒體膜電位時(shí)常用的濃度范圍為 1~20 μg/ml,對(duì)于很多細(xì)胞適宜采用的 JC-1濃度為 10 μg/ml。

          JC-1 是一種廣泛用于檢測(cè)線粒體膜電△Ψm位的理想熒光探針。JC-1染料以電勢(shì)依賴性的方式積聚在線粒體內(nèi),可以用來(lái)檢測(cè)細(xì)胞、組織或純化的線粒體膜電位。正常線粒體內(nèi),JC-1聚集在線粒體基質(zhì)中形成聚合物,聚合物發(fā)出強(qiáng)烈的紅色熒光(Ex=585 nm, Em=590 nm);不健康的線粒體由于膜電位的下降或喪失,JC-1只能以單體的形式存在于胞漿中,產(chǎn)生綠色熒光(Ex=514 nm, Em=529 nm)。JC-1不僅可用于定性檢測(cè),因顏色的變化可以非常直接的反映出線粒體膜電位的變化。也可以用于定量檢測(cè),因線粒體的去極化程度可以通過(guò)紅/綠熒光強(qiáng)度的比例來(lái)衡量。觀察時(shí),只需使用常規(guī)的觀察紅色熒光和綠色熒光的設(shè)置即可。

          CAS:3520-43-2

          分子式:C25H27Cl4IN4

          分子量:652.23

          儲(chǔ)存條件:-20℃,干燥避光,有效期一年

          實(shí)驗(yàn)報(bào)告:

          一、分離與培養(yǎng):

          1、無(wú)菌條件下,取出1-3d 齡SD大鼠心房組織,然后用PBS將此組織塊清洗2次,最后將1mm3左右大??;

          2、往組織塊中加入4 mL酶消化液(0.1% 和0.1% I型膠原酶),混懸10s,置37℃條件下消化10min,之后用滴管吹打制成單細(xì)胞懸液,自然沉淀并收集上清,用含10% FBS培養(yǎng)基終止消化后4℃放置;

          3、剩下的組織再加入3~4mL酶消化液,混懸10s,置37℃消化10 min后,按上述方法收集上清并終止消化后4℃放置,重復(fù)此步驟2-3次,直至組織*被消化;

          4、用200目不銹鋼篩網(wǎng)過(guò)濾細(xì)胞消化液,1200r/min 離心10min,棄去上清,沉淀細(xì)胞用含有10% FBS DMEM/F12培養(yǎng)基混懸,接種于25cm2培養(yǎng)瓶,放置于37℃ ,5%CO2 培養(yǎng)箱中培養(yǎng);

          5、差速貼壁1h后,吸出培養(yǎng)基,按實(shí)驗(yàn)需要接種于6孔板中繼續(xù)培養(yǎng);

          二、免疫熒光鑒定:

          1、待心房肌細(xì)胞生長(zhǎng)至80%融合時(shí),棄去培養(yǎng)基,用溫育的PBS沖洗細(xì)胞2次,每次10min,然后用4%多聚甲醛在室溫條件下固定細(xì)胞15min;

          2、PBS沖洗細(xì)胞2次,每次10min,然后在4℃條件下,用0.1%Triton X-100透膜15min;

          3、PBS沖洗細(xì)胞2次,每次10min,然后在室溫條件下,用4% BSA封閉細(xì)胞30min;

          4、按1: 100的比例稀釋?duì)?actin一抗,然后將其放在4℃冰箱中孵育細(xì)胞過(guò)夜;

          5、PBS沖洗細(xì)胞3次,每次10min,按1:150的比例稀釋抗α-actin的二抗, 37℃條件下放置1h;

          6、用PBS沖洗3次,每次10min,最后在倒置熒光顯微鏡下觀察圖像并拍照。

          操作規(guī)程

          1、在96孔板加入細(xì)胞100μL/孔,通常細(xì)胞增殖實(shí)驗(yàn)每孔加入100微升2000個(gè)細(xì)胞,細(xì)胞毒性實(shí)驗(yàn)每孔加入100微升5000~10000個(gè)細(xì)胞(具體每孔所用的細(xì)胞的數(shù)目,需根據(jù)細(xì)胞的大小,細(xì)胞增殖速度的快慢等決定)。置37℃ 5%CO2細(xì)胞培養(yǎng)箱培養(yǎng)24小時(shí).

          2、.加入適當(dāng)濃度的0~10μL 受試化合物。

          3、將96孔板在37℃,含5% CO2空氣及100%濕度的細(xì)胞培養(yǎng)箱中孵育適當(dāng)時(shí)間。

          4、將5×MTT 用稀釋液稀釋成1× MTT 溶液。

          5、每孔加50μL 1× MTT 溶液,在37℃孵育4小時(shí),使MTT 還原為甲臜。

          6、吸出上清液,每孔加150μL DMSO 使甲臜溶解,用平板搖床搖勻。

          7、酶標(biāo)儀在570nm 波長(zhǎng)處檢測(cè)每孔的光密度(如無(wú)570nm 濾光片,可以使用560-600nm 的濾光片)。

          8、結(jié)果分析

          a、細(xì)胞的存活率:將各測(cè)試孔的OD 值減去本底OD 值(*培養(yǎng)基加MTT,無(wú)細(xì)胞)或空白藥物孔OD 值(*培養(yǎng)基加受試藥物的不同稀釋度加MTT,無(wú)細(xì)胞),各重復(fù)孔的OD 值取平均數(shù)±SD。細(xì)胞的存活率以T/C%表示,T 為加藥細(xì)胞的OD 值,C 為對(duì)照細(xì)胞的OD 值。細(xì)胞存活率% =(加藥細(xì)胞OD/對(duì)照細(xì)胞OD)×100

          b、求出T/C = 50% 時(shí)的藥物濃度(IC50)及T/C = 10%時(shí)的藥物濃度(IC90)

          硫氧還蛋白結(jié)合蛋白2(TBP2)英文名稱(chēng):TBP2 ELISA Kit2號(hào)染色體開(kāi)放閱讀框71抗體包裝1g

          硫氧還蛋白還原1(TrxR1)英文名稱(chēng):TrxR1 ELISA Kit質(zhì)膜微囊蛋白-1抗體包裝5g

          硫肝蛋白聚糖2(HSPG2)英文名稱(chēng):HSPG2 ELISA Kit腫瘤轉(zhuǎn)移抑制蛋白1抗體包裝1ml

          硫肝(HS)英文名稱(chēng):HS ELISA Kit半胱蛋白蛋白-12抗體包裝250mg

          鱗狀細(xì)胞癌抗原2(SCCA2)英文名稱(chēng):SCCA2 ELISA Kit角蛋白17抗體包裝100mg

          磷脂酰肌特異性磷酯Cβ1(PLCβ1)英文名稱(chēng):PLCβ1 ELISA KitCD38抗體包裝1g

          磷脂酰肌蛋白聚糖4(GPC4)英文名稱(chēng):GPC4 ELISA KitCD38抗體包裝5g

          磷脂酰肌蛋白聚糖1(GPC1)英文名稱(chēng):GPC1 ELISA Kit碳酐1抗體包裝25g

          磷脂A2激活蛋白(PLAA)英文名稱(chēng):PLAA ELISA Kit碳酐2抗體包裝5g

          磷烯式羧激1(PCK1)英文名稱(chēng):PCK1 ELISA Kit絲/蘇蛋白質(zhì)激抗體包裝1g

          磷張力蛋白同源物(PTEN)英文名稱(chēng):PTEN ELISA Kitα-連環(huán)蛋白抗體(鈣粘蛋白相關(guān)蛋白)Catenin α包裝100g

          磷肌依賴性蛋白激1(PDPK1)英文名稱(chēng):PDPK1 ELISA Kit癌易感基因2相互作用蛋白抗體包裝25g

          磷肌-3-激2α肽(PI3K2α)英文名稱(chēng):PI3K2α ELISA Kit質(zhì)連接蛋白1抗體包裝5g

          磷二酯12(PDE12)英文名稱(chēng):PDE12 ELISA Kit盤(pán)狀結(jié)構(gòu)域受體蛋白2抗體包裝1g

          淋巴細(xì)胞趨化因子(Lptn)英文名稱(chēng):Lptn ELISA Kit膜糖蛋白CD200抗體包裝25g

          埃希氏菌Escherichia│sp. 質(zhì)量規(guī)格:純度大于98.5%,BR中性粒防御3試劑盒紫菀;shionone

          豌豆根瘤菌Rhizobium│leguminosarum 質(zhì)量規(guī)格:HPLC>98%,標(biāo)準(zhǔn)品中性粒防御1-3試劑盒紫花前胡苷;nodakenin

          大腸埃希氏菌Escherichia│coli 質(zhì)量規(guī)格:>98%,合物,BR中心體紡錘體相關(guān)蛋白1試劑盒獐牙菜苷;Sweroside
          JC-1熒光探針梨形毛霉 1-氯乙基異基碳酸酯(1-氯乙基碳酸異酯)游離脂肪酸Elisa

          假黃單胞屬 2,4,7,9-四甲基-5-癸炔-4,7-二誘導(dǎo)型NO合Elisa

          凍土毛霉 3-氯異煙酸甲酯魚(yú)精蛋白Elisa

          兩歧雙歧桿 4--2-甲氧基吡啶鳶尾Elisa

          球形節(jié)桿 4,4,5,5-四甲基-2-(2-甲基-1-烯-1-基)-1,3,2-二氧戊環(huán)原癌基因pokemoElisa

          黃孢紫紅菇 3,5-二氯-4-氟原鈣粘蛋白18Elisa

          希瓦氏* 4-氨基-3,5-二吡啶孕二Elisa

          釀酒酵母 4-乙氧基-3-氟苯酚孕誘導(dǎo)阻斷因子Elisa

          果生鏈核盤(pán) 1-氨基-1-環(huán)丁基羧酸鹽酸鹽孕酮Elisa

          短芽孢桿 3-氨基-5-氯-2-羥基吡啶孕酮受體Elisa

          東方伊薩酵母 5-溴噻吩-2-甲酰肼載脂蛋白A1Elisa

          尖孢鐮刀 2-甲基-5-基吡載脂蛋白A2Elisa

          委內(nèi)瑞拉鏈霉 5-溴-2,3-二氯吡啶載脂蛋白A4Elisa

          新疆鹽地桿 5-二氟甲氧基-2-巰基-1H-苯并咪唑載脂蛋白B100Elisa

          球孢枝孢 3-溴-5-甲基-4-吡啶載脂蛋白B48Elisa


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