以下是細(xì)胞生物學(xué)試劑的詳細(xì)介紹:
商品介紹:
茜素紅S 是一種蒽醌衍生物:9,10-二氫-3,4-二羥基-9,10-二氧代-2-蒽磺酸單鈉鹽,又稱媒介紅3或茜素磺酸鈉。其分子式為C14H7NaO7S,分子量為342.25。茜素紅和鈣離子以鰲和方式形成復(fù)合物,用以識別組織細(xì)胞的鈣鹽成分。鈣鹽變化是骨細(xì)胞增殖分化和骨組織成骨潛能的標(biāo)志之一。通過茜紅素染色,產(chǎn)生桔紅色沉積,但會受到其它金屬元素的干擾。 本產(chǎn)品pH8.3 主要適用于動物原生代或培養(yǎng)細(xì)胞的鈣沉積和鈣化結(jié)節(jié)檢測。廣泛用于骨細(xì)胞或組織病理生理的研究。 注意:以6 孔板為例,每孔孵育的染色工作液為500μL,本試劑盒可以做20tests;以普通切片和96 孔細(xì)胞為例,每張玻片孵育的染色工作液為100μL,本試劑盒可以做100tests。 儲存:2-8℃,避光,有效期3個月。 |
公司產(chǎn)品僅用于科研細(xì)胞培養(yǎng)操作規(guī)程:
一.培養(yǎng)基及培養(yǎng)凍存條件準(zhǔn)備:
1)準(zhǔn)備RPMI-1640培養(yǎng)基(RPMI-1640:GIBCO),90%;優(yōu)質(zhì)胎牛血清,10%。
2)培養(yǎng)條件: 氣相:空氣,95%;二氧化碳,5%。 溫度:37℃,培養(yǎng)箱濕度為70%-80%。
3)凍存液:90%血清,10%DMSO,現(xiàn)用現(xiàn)配,液氮儲存。
二.細(xì)胞處理:
1)復(fù)蘇細(xì)胞:將含有1mL細(xì)胞懸液的凍存管迅速放入37℃水浴中(水面要低于凍存管蓋部)搖晃解凍,移入事先準(zhǔn)備好的含有4mL培養(yǎng)基的15ml離心管中混合均勻。在1000RPM條件下離心4分鐘,棄去上清液,加入1mL培養(yǎng)基后吹勻。然后將所有細(xì)胞懸液移入含有5ml培養(yǎng)基的培養(yǎng)瓶中培養(yǎng)過夜。第二天換液并檢查細(xì)胞密度。
2)細(xì)胞傳代:如果細(xì)胞密度達80%-90%,即可進行傳代培養(yǎng)。
對于懸浮細(xì)胞,傳代可參考以下方法:
方法一:收集細(xì)胞,1000RPM,常溫條件下離心5分鐘,棄去上清液,補加1-2mL培養(yǎng)液后吹勻,將細(xì)胞懸液按1:2到1:5的比例分到新的含8ml培養(yǎng)基的新皿中或者瓶中。
操作步驟:
1. 樣品染色
1) 將Binding Buffer(10×)稀釋成1×Binding buffer工作液備用(1ml Binding Buffer(10×)需加入9ml無菌去離子水)。
2) 對于懸浮細(xì)胞,500-1000g離心5min收集細(xì)胞。
對于貼壁細(xì)胞,要用不含EDTA的胰酶消化細(xì)胞,胰酶消化時間不宜過長或過短,最好是在輕輕吹打可以使貼壁細(xì)胞吹打下來時,加入細(xì)胞培養(yǎng)液,將細(xì)胞輕輕吹打下來,轉(zhuǎn)移到離心管內(nèi),500-1000g離心5min收集細(xì)胞。
3) 收集細(xì)胞后,加入預(yù)冷PBS溶液輕搖或用移液器輕柔吹打洗滌,離心收集細(xì)胞,共洗滌兩次。
4) 在細(xì)胞沉淀中加入1×Binding buffer工作液,重懸細(xì)胞,使細(xì)胞濃度達到1×106 cell/ml。
5) 吸取100μl細(xì)胞懸液(細(xì)胞總數(shù)為1×105 cell)至一新管中,加入5μl Annexin V-FITC和5-10 μl PI,輕輕混勻,室溫避光孵育15min。
2. 樣品檢測
1) 流式細(xì)胞儀檢測:
染色孵育后,每管加入400μl 1×Binding Buffer工作液,混勻后使用流式細(xì)胞儀檢測(1小時內(nèi)檢測)。
建議設(shè)置經(jīng)凋亡誘導(dǎo)的正常細(xì)胞、PI單染和Annexin V-FITC單染3個對照組,正常細(xì)胞組可作為熒光補償調(diào)節(jié)去除光譜重疊和設(shè)定十字門的位置。結(jié)果可用CellQuest等軟件進行分析,繪制雙色散點圖(two-color dot plot),F(xiàn)ITC為橫坐標(biāo),PI為縱坐標(biāo)。Annexin V-FITC和PI聯(lián)合使用時,活細(xì)胞僅有很低強度的背景熒光,早期凋亡細(xì)胞僅有較強的綠色熒光,晚期凋亡細(xì)胞有綠色和紅色雙重?zé)晒狻?/span>
2) 熒光顯微鏡檢測:
染色孵育后涂片,顯微鏡下觀察。使用熒光顯微鏡上的藍光和綠光通道分別觀察FITC和PI。被Annexin V-FITC結(jié)合的細(xì)胞顯示漿膜上有綠色光環(huán)。喪失細(xì)胞膜完整性的細(xì)胞,細(xì)胞核顯示紅色,膜上有綠色光環(huán)。
Bullatine G(標(biāo)準(zhǔn)品)英文名稱: Ammomium ferric citrate肝配蛋白A1受體抗體包裝100g
Cimiracemoside英文名稱: Choline chloride真核翻譯起始因子2C2抗體包裝25g
Clemaphenol A英文名稱: D-Gluconolactone眼睛發(fā)育缺失蛋白EYA2抗體包裝500g
Clematichinenoside C英文名稱: Forchlorfenuron,4-CPPU,CPPU,KT-30EYA4蛋白抗體包裝100g
Clematiunicinoside E英文名稱: Magnesium acetate, tetrahydrate血清反應(yīng)因子輔助蛋白1抗體包裝25g
Clematomandshurica saponin ...英文名稱: Sodium phosphate, monobasic, monohydrate吞噬運動蛋白2抗體包裝5g
Corylifol A(標(biāo)準(zhǔn)品)英文名稱: Calcium gluconate, hydrate紅膜條帶4.1蛋白抗體包裝1g
Crassicauline A(標(biāo)準(zhǔn)品)英文名稱: N-Dodecyl-b-maltoside磷化紅生成受體抗體包裝25g
Crovatin英文名稱: Aminourea hydrochloride轉(zhuǎn)錄調(diào)節(jié)因子E2F7抗體包裝5g
Croverin英文名稱: Streptomycin sulfate solution, 30 mg/ml膠質(zhì)谷運載蛋白4抗體包裝1g
D(十)-無葡萄糖(標(biāo)準(zhǔn)品)英文名稱: AcetamideerbB3結(jié)合蛋白1抗體包裝5g
D-(-)-奎寧(標(biāo)準(zhǔn)品)英文名稱: 1-Naphthylacetamide烯酰合1抗體包裝25g
D-阿拉伯糖(標(biāo)準(zhǔn)品)英文名稱: Iron granules烯酰合含結(jié)構(gòu)域蛋白2抗體包裝5g
D-果糖(標(biāo)準(zhǔn)品)英文名稱: Iron(III) citrate腫瘤壞死因子受體超家族成員EDAR抗體包裝1g
D-四氫藥根堿(標(biāo)準(zhǔn)品)英文名稱: DL-Lactic acid自身抗原EDC4抗體包裝5g
ATCC33842資源名稱: 哈氏弧菌 質(zhì)量規(guī)格:>98.5%髓磷脂堿性蛋白試劑盒20(R)人參g3 ;20(R)G
蘇云金芽孢桿菌Bacillus│thuringiensis 質(zhì)量規(guī)格:HPLC>98%,標(biāo)準(zhǔn)品髓磷脂P2蛋白試劑盒(S型)人參皂苷Rh2 ;20(S)-G
黑曲霉Aspergillus│niger 質(zhì)量規(guī)格:>99%髓過氧化物特異性抗中性粒胞質(zhì)抗體IgG試劑盒人參皂苷Rh4;Ginsenoside
茜素紅染色試劑盒(ph8.3)異常漢遜酵母 3-氯-2,4-二氟苯Janus激1Elisa
猴頭 2,4,5-三氟甲苯趨化因子配體9Elisa
亮白曲霉 3,4-二氯-2-氟苯紅富鐵Elisa
孢絲蓋傘 2-溴-5-氟苯乙血紅蛋白α亞基Elisa
橄欖色鏈霉 2,3-二溴-6,7-二氯喹喔啉神經(jīng)介UElisa
側(cè)耳 2-氟-4-三氟甲基芐可溶性血管黏附分子1Elisa
華麗側(cè)耳(佛羅里達側(cè)耳) 4-氟-3-三氟甲氧抗繆勒管抗體Elisa
滑菇 乙基紫磷脂酰乙-N-甲基轉(zhuǎn)移Elisa
野梧桐歐文氏 2-氯-6-氟-3-甲磷脂酰乙-N-甲基轉(zhuǎn)移Elisa
松口蘑 4-氯-2,6-二氟苯甲轉(zhuǎn)運蛋白Elisa
異常威克漢姆酵母 2-溴-4-氯-6-氟蛋白3Elisa
石面單胞屬 2-氯-6-氟-3-甲氧基黏蛋白Elisa
野野村氏屬 3,5-二氟-4-甲氧基抗肌內(nèi)膜抗體Elisa
谷氨酸棒桿 11-溴十一酸抗心磷脂IgM抗體Elisa
堆肥鞘氨桿 2,7-二溴-9,9-二甲基芴抗心磷脂IgG抗體Elisa