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詳細介紹
產品屬性：
中文名稱：廣譜Caspase抑制劑(Z-VAD-FMK)(20mM)
英文名稱：General Caspase Inhibitor Z-VAD-FMK (20 mM
產品規(guī)格：25μl
發(fā)貨周期：1～3天
公司產品僅用于科研
商品介紹：
Z-VAD-FMK是一種細胞滲透性，不可逆的泛caspase抑制劑，能夠抑制caspase家族蛋白酶活性和阻斷凋亡發(fā)生。Jurkat細胞中Z-VAD-FMK抑制Fas誘導的凋亡，胸腺細胞和肝細胞內抑制各種刺激因子激發(fā)的凋亡活動。高濃度Z-VAD-FMK (> 100μM)改善TNFα誘導的嗜中性粒細胞凋亡，相反低濃度（(1-30 μM)*阻止TNFα激活的凋亡發(fā)生。Z-VAD-FMK的促凋亡活性具有化合物特異性和ROS非依賴性的特點。Z-VAD-FMK 也具有體內活性。 不同于傳統(tǒng)的Z-VAD-FMK，提供的多肽在天冬氨酸的P1位點進行了O-甲基化的修飾，使其穩(wěn)定性和細胞滲透性都得以提高。一旦進入細胞，內源性酯酶水解甲基基團從而形成具生物活性的肽形式。 本品為溶于DMSO的儲存液，濃度為20mM。 英文別名：Benzyloxycarbonyl-Val-Ala-Asp(OMe)-fluoromethylketone; Z-VAD(OMe)-FMK,Z-Val-Ala-Asp(OMe)-FMK; CAS：187389-52-2 分子式：C22H30FN3O7 分子量：467.49 外觀：液體 純度：>94% 儲存條件：-20℃，有效期6個月 |
細胞生物學研究有以下幾個方面：
細胞生物學的研究內容十分廣泛,主要包括：
①細胞核、染色體以及基因表達的研究；
②生物膜與細胞器的研究；
③細胞骨架體系的研究；
④細胞增殖及其調控；
⑤細胞分化及其調控；
⑥細胞的衰老與編程性死亡(凋亡)；
⑦細胞的起源與進化；
⑧細胞工程.
實驗報告：
一、分離與培養(yǎng)：
1、無菌條件下，取出1-3d 齡SD大鼠心房組織，然后用PBS將此組織塊清洗2次，最后將1mm3左右大??；
2、往組織塊中加入4 mL酶消化液（0.1% 和0.1% I型膠原酶），混懸10s，置37℃條件下消化10min，之后用滴管吹打制成單細胞懸液，自然沉淀并收集上清，用含10% FBS培養(yǎng)基終止消化后4℃放置；
3、剩下的組織再加入3～4mL酶消化液，混懸10s，置37℃消化10 min后，按上述方法收集上清并終止消化后4℃放置，重復此步驟2-3次，直至組織*被消化；
4、用200目不銹鋼篩網過濾細胞消化液，1200r/min 離心10min，棄去上清，沉淀細胞用含有10％ FBS DMEM/F12培養(yǎng)基混懸，接種于25cm2培養(yǎng)瓶，放置于37℃ ，5％CO2 培養(yǎng)箱中培養(yǎng)；
5、差速貼壁1h后，吸出培養(yǎng)基，按實驗需要接種于6孔板中繼續(xù)培養(yǎng)；
二、免疫熒光鑒定：
1、待心房肌細胞生長至80%融合時，棄去培養(yǎng)基，用溫育的PBS沖洗細胞2次，每次10min，然后用4%多聚甲醛在室溫條件下固定細胞15min；
2、PBS沖洗細胞2次，每次10min，然后在4℃條件下，用0.1％Triton X-100透膜15min；
3、PBS沖洗細胞2次，每次10min，然后在室溫條件下，用4% BSA封閉細胞30min；
4、按1: 100的比例稀釋α-actin一抗，然后將其放在4℃冰箱中孵育細胞過夜；
5、PBS沖洗細胞3次，每次10min，按1：150的比例稀釋抗α-actin的二抗， 37℃條件下放置1h；
6、用PBS沖洗3次，每次10min，最后在倒置熒光顯微鏡下觀察圖像并拍照。
凝血因子ⅩⅢ(F13)英文名稱：F13 ELISA Kit囊性纖維化跨膜轉運調節(jié)因子抗體包裝250mg
凝血因子Ⅹ(F10)英文名稱：F10 ELISA Kit酪蛋白激2相互作用蛋白1抗體包裝1g
凝血因子Ⅸ(F9)英文名稱：F9 ELISA KitCD40L抗體包裝25g
凝血因子Ⅷ(F8)英文名稱：F8 ELISA Kitα-s1酪蛋白抗體包裝5g
凝血因子Ⅶ(F7)英文名稱：F7 ELISA KitCIDEB抗體包裝5ml
凝血因子Ⅴ(F5)英文名稱：F5 ELISA Kit高密度脂蛋白受體/清道夫受體抗體包裝25g
凝血因子Ⅱ(F2)英文名稱：F2 ELISA Kit信號轉導蛋白亞基7A抗體包裝5g
凝血/抗凝血復合體(TAT)英文名稱：TAT ELISA Kit凋亡抑制因子抗體包裝1g
凝溶膠蛋白(GS)英文名稱：GS ELISA KitD型產氣莢膜梭菌抗體包裝5g
凝集樣氧化低密度脂蛋白受體1(LOX1)英文名稱：LOX1 ELISA Kit降鈣抗體包裝1g
鎳紋蛋白(METRN)英文名稱：METRN ELISA Kit20號染色體開放閱讀框14抗體包裝250mg
尿調蛋白(UMOD)英文名稱：UMOD ELISA Kit結締組織生長因子抗體包裝25g
尿皮質3(UCN3)英文名稱：UCN3 ELISA Kit性T抗原-4抗體包裝1g
尿皮質2(UCN2)英文名稱：UCN2 ELISA Kit降鈣受體抗體包裝5g
尿皮質1(UCN1)英文名稱：UCN1 ELISA Kit1號染色體開放閱讀框38抗體包裝100mg
副球菌Paracoccus│sp. 質量規(guī)格：純度>97%腫瘤壞死因子可溶性受體Ⅰ試劑盒植;Phytic acid
泊庫島食烷菌Alcanivorax│borkumensis 質量規(guī)格：HPLC>98%,標準品腫瘤壞死因子超家族15試劑盒q;fraxinellone
釀酒酵母Saccharomyces│cerevisiae 質量規(guī)格：UV≥98%，標準品腫瘤壞死因子γ試劑盒芝麻酚;Sesamol
廣譜Caspase抑制劑(Z-VAD-FMK)(20mM)枯草芽孢桿 4,4'-雙(4-氨基苯氧基)二苯砜胰島樣生長因子結合蛋白-3Elisa
黑曲霉3.3928 氧化鈷(III)胰島樣生長因子結合蛋白4Elisa
米根霉 3-氯苯乙胰島樣生長因子結合蛋白-6Elisa
馬杜拉放線 2-甲氧基苯氧基乙酸乙酯胰島樣生長因子結合蛋白-7Elisa
總狀共頭霉 苯甲氧羰基-DL-色氨酸胰島樣因子5Elisa
釀酒酵母 烯草酮胰島原Elisa
多根硬皮馬勃 溴甲氧胰淀Elisa
釀酒酵母 (R)-N-芴甲氧羰基-3-氨基-3-苯基-1-胰高血糖Elisa
大葉胡枝子腐朽病 2-溴苯并噻唑-6-羧酸乙酯胰高血糖樣肽1Elisa
銅綠假單胞(綠膿桿) 3-氧代環(huán)丁基氨酸芐酯胰高血糖樣肽1.7-36Elisa
大豆慢生根瘤 4-氨甲基四氫吡喃胰高血糖樣肽2Elisa
豬瘟病間接ELISA抗體Elisa 5-溴-1,3-二氟-2-芐氧基苯胰羧肽B2Elisa
多粘類芽胞桿 2-氯-3-溴-5-胰腺癌標志物-CA242Elisa
嗜芽孢桿 5-氨基-2-溴-3-氯吡啶胰腺衍生因子Elisa
白色茶樹菇 2-羥基異丁酰胰脂肪Elisa
操作規(guī)程
1、在96孔板加入細胞100μL/孔，通常細胞增殖實驗每孔加入100微升2000個細胞，細胞毒性實驗每孔加入100微升5000～10000個細胞（具體每孔所用的細胞的數目，需根據細胞的大小，細胞增殖速度的快慢等決定）。置37℃ 5%CO2細胞培養(yǎng)箱培養(yǎng)24小時.
2、.加入適當濃度的0～10μL 受試化合物。
3、將96孔板在37℃，含5% CO2空氣及100%濕度的細胞培養(yǎng)箱中孵育適當時間。
4、將5×MTT 用稀釋液稀釋成1× MTT 溶液。
5、每孔加50μL 1× MTT 溶液，在37℃孵育4小時，使MTT 還原為甲臜。
6、吸出上清液，每孔加150μL DMSO 使甲臜溶解，用平板搖床搖勻。
7、酶標儀在570nm 波長處檢測每孔的光密度（如無570nm 濾光片，可以使用560-600nm 的濾光片）。
8、結果分析
a、細胞的存活率：將各測試孔的OD 值減去本底OD 值（*培養(yǎng)基加MTT，無細胞）或空白藥物孔OD 值（*培養(yǎng)基加受試藥物的不同稀釋度加MTT，無細胞），各重復孔的OD 值取平均數±SD。細胞的存活率以T/C%表示，T 為加藥細胞的OD 值，C 為對照細胞的OD 值。細胞存活率% =（加藥細胞OD/對照細胞OD）×100
b、求出T/C = 50% 時的藥物濃度(IC50)及T/C = 10%時的藥物濃度(IC90)
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