以下是細(xì)胞生物學(xué)試劑的詳細(xì)介紹:
中文名稱 | 英文名稱 | 產(chǎn)品規(guī)格 | 發(fā)貨周期 |
FLAP抑制劑(MK591) | MK591 | 1mL(10mM)|5mg|10mg|50mg|100mg | 1~3天 |
公司產(chǎn)品僅用于科研細(xì)胞培養(yǎng)操作規(guī)程:
一.培養(yǎng)基及培養(yǎng)凍存條件準(zhǔn)備:
1)準(zhǔn)備RPMI-1640培養(yǎng)基(RPMI-1640:GIBCO),90%;優(yōu)質(zhì)胎牛血清,10%。
2)培養(yǎng)條件: 氣相:空氣,95%;二氧化碳,5%。 溫度:37℃,培養(yǎng)箱濕度為70%-80%。
3)凍存液:90%血清,10%DMSO,現(xiàn)用現(xiàn)配,液氮儲(chǔ)存。
二.細(xì)胞處理:
1)復(fù)蘇細(xì)胞:將含有1mL細(xì)胞懸液的凍存管迅速放入37℃水浴中(水面要低于凍存管蓋部)搖晃解凍,移入事先準(zhǔn)備好的含有4mL培養(yǎng)基的15ml離心管中混合均勻。在1000RPM條件下離心4分鐘,棄去上清液,加入1mL培養(yǎng)基后吹勻。然后將所有細(xì)胞懸液移入含有5ml培養(yǎng)基的培養(yǎng)瓶中培養(yǎng)過夜。第二天換液并檢查細(xì)胞密度。
2)細(xì)胞傳代:如果細(xì)胞密度達(dá)80%-90%,即可進(jìn)行傳代培養(yǎng)。
對于懸浮細(xì)胞,傳代可參考以下方法:
方法一:收集細(xì)胞,1000RPM,常溫條件下離心5分鐘,棄去上清液,補(bǔ)加1-2mL培養(yǎng)液后吹勻,將細(xì)胞懸液按1:2到1:5的比例分到新的含8ml培養(yǎng)基的新皿中或者瓶中。
商品介紹:
MK591是選擇性的,特異性的FLAP抑制劑。 注:本品僅可用于科研實(shí)驗(yàn),嚴(yán)禁用于臨床醫(yī)療及其他用途! CAS號:147030-01-1 別名:Quiflapon sodium 純度:99.25% 分子量:609.15 儲(chǔ)存條件:-20℃,有效期2年,溶入溶劑后-20℃請盡量在一個(gè)月內(nèi)使用。 |
操作步驟:
1. 樣品染色
1) 將Binding Buffer(10×)稀釋成1×Binding buffer工作液備用(1ml Binding Buffer(10×)需加入9ml無菌去離子水)。
2) 對于懸浮細(xì)胞,500-1000g離心5min收集細(xì)胞。
對于貼壁細(xì)胞,要用不含EDTA的胰酶消化細(xì)胞,胰酶消化時(shí)間不宜過長或過短,最好是在輕輕吹打可以使貼壁細(xì)胞吹打下來時(shí),加入細(xì)胞培養(yǎng)液,將細(xì)胞輕輕吹打下來,轉(zhuǎn)移到離心管內(nèi),500-1000g離心5min收集細(xì)胞。
3) 收集細(xì)胞后,加入預(yù)冷PBS溶液輕搖或用移液器輕柔吹打洗滌,離心收集細(xì)胞,共洗滌兩次。
4) 在細(xì)胞沉淀中加入1×Binding buffer工作液,重懸細(xì)胞,使細(xì)胞濃度達(dá)到1×106 cell/ml。
5) 吸取100μl細(xì)胞懸液(細(xì)胞總數(shù)為1×105 cell)至一新管中,加入5μl Annexin V-FITC和5-10 μl PI,輕輕混勻,室溫避光孵育15min。
2. 樣品檢測
1) 流式細(xì)胞儀檢測:
染色孵育后,每管加入400μl 1×Binding Buffer工作液,混勻后使用流式細(xì)胞儀檢測(1小時(shí)內(nèi)檢測)。
建議設(shè)置經(jīng)凋亡誘導(dǎo)的正常細(xì)胞、PI單染和Annexin V-FITC單染3個(gè)對照組,正常細(xì)胞組可作為熒光補(bǔ)償調(diào)節(jié)去除光譜重疊和設(shè)定十字門的位置。結(jié)果可用CellQuest等軟件進(jìn)行分析,繪制雙色散點(diǎn)圖(two-color dot plot),F(xiàn)ITC為橫坐標(biāo),PI為縱坐標(biāo)。Annexin V-FITC和PI聯(lián)合使用時(shí),活細(xì)胞僅有很低強(qiáng)度的背景熒光,早期凋亡細(xì)胞僅有較強(qiáng)的綠色熒光,晚期凋亡細(xì)胞有綠色和紅色雙重?zé)晒狻?/span>
2) 熒光顯微鏡檢測:
染色孵育后涂片,顯微鏡下觀察。使用熒光顯微鏡上的藍(lán)光和綠光通道分別觀察FITC和PI。被Annexin V-FITC結(jié)合的細(xì)胞顯示漿膜上有綠色光環(huán)。喪失細(xì)胞膜完整性的細(xì)胞,細(xì)胞核顯示紅色,膜上有綠色光環(huán)。
枯草芽孢桿菌B淋巴淋巴瘤因子9抗體Human FREM1 ELISA Kit豚鼠血管緊張Ⅱ(ANG-Ⅱ)免疫試劑盒
枯草芽胞桿菌膽綠還原抗體Human Frizzled 8 ELISA Kit豚鼠纖溶抗纖溶復(fù)合物(PAP)免疫試劑盒
干酪乳桿菌BIVM蛋白抗體Human FRS3 ELISA Kit豚鼠晚期糖基化終末產(chǎn)物(AGEs)免疫試劑盒
煙曲霉血型Lewis A抗原抗體Human Frizzled 7 ELISA Kit豚鼠嗜性粒陽離子蛋白(ECP)免疫試劑盒
耐輻射奇球菌粘蛋白/巖藻糖基轉(zhuǎn)移3抗體Human Frizzled 10 ELISA Kit豚鼠生長激(GH)免疫試劑盒
橢孢小隔指孢Bloom綜合征相關(guān)蛋白抗體Human Frizzled 9 ELISA Kit豚鼠腎(Renin)免疫試劑盒
蠶豆葡萄孢骨形態(tài)發(fā)生蛋白8b抗體Human FRK ELISA Kit豚鼠神經(jīng)蛋白聚糖(NCAN)免疫試劑盒
肉色諾卡氏菌磷化非受體性蛋白酪激ETK抗體Human FOXD4 ELISA Kit豚鼠前列腺E2(PGE2)免疫試劑盒
弗氏檸檬桿菌磷化促凋亡調(diào)節(jié)蛋白BNIP3抗體Human FOXQ1 ELISA Kit豚鼠皮質(zhì)(Cortisol)免疫試劑盒
枯草芽胞桿菌168B淋巴特異性激活OCT結(jié)合蛋白1抗體Human FOXP4 ELISA Kit豚鼠內(nèi)皮型一氧化氮合成(eNOS)免疫試劑盒
球孢毛霉核糖體合成蛋白BOP1抗體Human FOXD4L6 ELISA Kit豚鼠內(nèi)皮1(ET-1)免疫試劑盒
類芽胞桿菌調(diào)節(jié)中心體分離早期相關(guān)激BORA抗體Human FOXE3 ELISA Kit豚鼠免疫球蛋白G(IgG)免疫試劑盒
腐霉萊姆病螺旋體抗體Human FOXG1 ELISA Kit豚鼠免疫球蛋白E(IgE)免疫試劑盒
芽孢桿菌屬成熟相關(guān)蛋白BOULE抗體Human FOXH1 ELISA Kit豚鼠免疫球蛋白A(IgA)免疫試劑盒
側(cè)耳伸長因子結(jié)合蛋白抗體Human FOXL2 ELISA Kit豚鼠卵清蛋白特異性IgG(OVA sIgG)免疫試劑盒
果生鏈核盤菌特異性堿性蛋白Y2抗體Human FOXO4 ELISA Kit豚鼠卵清蛋白特異性IgE(OVA sIgE)免疫試劑盒
: 馴Yu資源名稱: 瓊氏不動(dòng)桿菌 質(zhì)量規(guī)格:>98%,BRαN已酰基葡糖苷試劑盒氫化原阿片堿
地衣芽孢桿菌Bacillus│licheniformis 質(zhì)量規(guī)格:>98%,BRαL巖藻糖苷試劑盒7-羥基-5,8-二氧基黃烷
季也蒙畢赤酵母Pichia│guilliermondii 質(zhì)量規(guī)格:>98%,BRαL艾杜糖苷試劑盒10-羥基攀援山橙堿
FLAP抑制劑(MK591)紫蓳靈(標(biāo)準(zhǔn)品)英文名稱: tribendimidine活化T核因子1蛋白抗體包裝1g
紫荊皮(標(biāo)準(zhǔn)品)英文名稱: Jionoside B1谷受體1抗體包裝5g
紫萁(標(biāo)準(zhǔn)品)英文名稱: N6022神經(jīng)元抑制蛋白抗體包裝100g
紫色姜(標(biāo)準(zhǔn)品)英文名稱: Balsalazide神經(jīng)發(fā)育相關(guān)調(diào)控蛋白抗體包裝25g
紫杉(標(biāo)準(zhǔn)品)英文名稱: Epalrestat 核因子κB抑制蛋白α抗體(IκB-α)包裝25g
紫蘇梗(標(biāo)準(zhǔn)品)英文名稱: Olsalazine disodium磷化核因子NF-κB p65抗體包裝5g
紫蘇(標(biāo)準(zhǔn)品)英文名稱: Olsalazine disodium磷化核因子p50/k基因結(jié)合核因子抗體包裝1g
紫蘇烯英文名稱: Pioditazone hydrochloride磷化一氧化氮合成3(內(nèi)皮型)抗體包裝250mg
紫蘇葉(標(biāo)準(zhǔn)品)英文名稱: Doxifluridine/5-Fluoro-5′-deoxyuridine核酪蛋白激和周期蛋白依賴性激底物1抗體包裝5g
紫蘇子(標(biāo)準(zhǔn)品)英文名稱: IopromideNIFK蛋白抗體包裝100g
紫檀芪(標(biāo)準(zhǔn)品)英文名稱: TRISTEARIN磷化NIFK抗體包裝500g
紫檀香(標(biāo)準(zhǔn)品)英文名稱: Tizanidine hydrochloride核轉(zhuǎn)錄因子X盒結(jié)合蛋白1抗體包裝1g
紫菀(標(biāo)準(zhǔn)品)英文名稱: Tubastatin A Hydrochloride膜磷脂轉(zhuǎn)移蛋白1抗體包裝25g
紫菀(標(biāo)準(zhǔn)品)英文名稱: Moxonidine hydrochloride神經(jīng)降壓受體1抗體包裝5g
紫云英苷(標(biāo)準(zhǔn)品)英文名稱: Propiverine hydrochloride神經(jīng)降壓受體2抗體包裝25g