商品介紹:
GSK2190915(AM-803;Fiboflapon)是FLAP高效選擇性抑制劑,binding IC50值為2.9nM。 注:本品僅可用于科研實驗,嚴禁用于臨床醫(yī)療及其他用途! CAS號:936350-00-4 別名:AM-803;Fiboflapon 純度:98.91% 分子量:637.83 儲存條件:-20℃,有效期2年,溶入溶劑后-20℃請盡量在一個月內(nèi)使用。 |
以下是細胞生物學(xué)試劑的詳細介紹:
操作步驟:
1. 樣品染色
1) 將Binding Buffer(10×)稀釋成1×Binding buffer工作液備用(1ml Binding Buffer(10×)需加入9ml無菌去離子水)。
2) 對于懸浮細胞,500-1000g離心5min收集細胞。
對于貼壁細胞,要用不含EDTA的胰酶消化細胞,胰酶消化時間不宜過長或過短,最好是在輕輕吹打可以使貼壁細胞吹打下來時,加入細胞培養(yǎng)液,將細胞輕輕吹打下來,轉(zhuǎn)移到離心管內(nèi),500-1000g離心5min收集細胞。
3) 收集細胞后,加入預(yù)冷PBS溶液輕搖或用移液器輕柔吹打洗滌,離心收集細胞,共洗滌兩次。
4) 在細胞沉淀中加入1×Binding buffer工作液,重懸細胞,使細胞濃度達到1×106 cell/ml。
5) 吸取100μl細胞懸液(細胞總數(shù)為1×105 cell)至一新管中,加入5μl Annexin V-FITC和5-10 μl PI,輕輕混勻,室溫避光孵育15min。
2. 樣品檢測
1) 流式細胞儀檢測:
染色孵育后,每管加入400μl 1×Binding Buffer工作液,混勻后使用流式細胞儀檢測(1小時內(nèi)檢測)。
建議設(shè)置經(jīng)凋亡誘導(dǎo)的正常細胞、PI單染和Annexin V-FITC單染3個對照組,正常細胞組可作為熒光補償調(diào)節(jié)去除光譜重疊和設(shè)定十字門的位置。結(jié)果可用CellQuest等軟件進行分析,繪制雙色散點圖(two-color dot plot),F(xiàn)ITC為橫坐標(biāo),PI為縱坐標(biāo)。Annexin V-FITC和PI聯(lián)合使用時,活細胞僅有很低強度的背景熒光,早期凋亡細胞僅有較強的綠色熒光,晚期凋亡細胞有綠色和紅色雙重?zé)晒狻?/span>
2) 熒光顯微鏡檢測:
染色孵育后涂片,顯微鏡下觀察。使用熒光顯微鏡上的藍光和綠光通道分別觀察FITC和PI。被Annexin V-FITC結(jié)合的細胞顯示漿膜上有綠色光環(huán)。喪失細胞膜完整性的細胞,細胞核顯示紅色,膜上有綠色光環(huán)。
公司產(chǎn)品僅用于科研細胞培養(yǎng)操作規(guī)程:
一.培養(yǎng)基及培養(yǎng)凍存條件準備:
1)準備RPMI-1640培養(yǎng)基(RPMI-1640:GIBCO),90%;優(yōu)質(zhì)胎牛血清,10%。
2)培養(yǎng)條件: 氣相:空氣,95%;二氧化碳,5%。 溫度:37℃,培養(yǎng)箱濕度為70%-80%。
3)凍存液:90%血清,10%DMSO,現(xiàn)用現(xiàn)配,液氮儲存。
二.細胞處理:
1)復(fù)蘇細胞:將含有1mL細胞懸液的凍存管迅速放入37℃水浴中(水面要低于凍存管蓋部)搖晃解凍,移入事先準備好的含有4mL培養(yǎng)基的15ml離心管中混合均勻。在1000RPM條件下離心4分鐘,棄去上清液,加入1mL培養(yǎng)基后吹勻。然后將所有細胞懸液移入含有5ml培養(yǎng)基的培養(yǎng)瓶中培養(yǎng)過夜。第二天換液并檢查細胞密度。
2)細胞傳代:如果細胞密度達80%-90%,即可進行傳代培養(yǎng)。
對于懸浮細胞,傳代可參考以下方法:
方法一:收集細胞,1000RPM,常溫條件下離心5分鐘,棄去上清液,補加1-2mL培養(yǎng)液后吹勻,將細胞懸液按1:2到1:5的比例分到新的含8ml培養(yǎng)基的新皿中或者瓶中。
枯草芽孢桿菌色P450Ⅱj3抗體Human DTX3L(E3 ubiquitin-protein ligase DTX3L) ELISA Kit兔多肽YY(PYY)免疫試劑盒
類干酪乳桿菌鈣激活氯離子通道4抗體Human E2F4 ELISA Kit兔對氧磷-1(PON1)免疫試劑盒
毛栓孔菌周期依賴性激6抗體Human EDAR ELISA Kit兔膽堿乙酰轉(zhuǎn)移(CHAT)免疫試劑盒
枯草芽孢桿菌周期依賴性激7抗體Human EDC3 ELISA Kit兔超氧化物歧化1,可溶(SOD1)免疫試劑盒
黑曲霉3.3928周期依賴性激8抗體Human EDC4 ELISA Kit兔超氧化物歧化[Mn],線粒體(SOD2)免疫試劑盒
米根霉周期蛋白依賴激抑制因子1C抗體Human E2F7 ELISA Kit兔超敏C反應(yīng)蛋白(hs-CRP)免疫試劑盒
馬杜拉放線菌Ⅱ型膠原α1蛋白/軟骨鈣抗體Human E2F8 ELISA Kit兔叉頭框蛋白P3(FOXP3)免疫試劑盒
總狀共頭霉c-fos抗體Human DNAJC2/MPP11 ELISA Kit兔補體片斷5a(C5a)免疫試劑盒
釀酒酵母嗜鉻粒A抗體Human DAPK1 ELISA Kit兔補體蛋白3(C3)免疫試劑盒
多根硬皮馬勃CGRP降鈣基因相關(guān)肽抗體Human DOCK180 ELISA Kit兔二(MDA)免疫試劑盒
釀酒酵母ChAT膽堿乙酰轉(zhuǎn)移抗體Human DPPA4 ELISA Kit兔半胱蛋白抑制劑/胱抑C(Cys-C)免疫試劑盒
大葉胡枝子腐朽病周期蛋白N端結(jié)構(gòu)域蛋白2抗體Human DCBLD2 ELISA Kit兔白介7(IL7)免疫試劑盒
銅綠假單胞菌(綠膿桿菌)肌動蛋白結(jié)合蛋白CORO1A抗體Human DCC(Netrin receptor DCC) ELISA Kit兔白介-5(IL-5)免疫試劑盒
大豆慢生根瘤菌抗菌肽/天蠶抗體Human DcR2 ELISA Kit兔白介17(IL-17)免疫試劑盒
豬瘟病間接ELISA抗體ELISA Kit鈣/鈣調(diào)蛋白依賴蛋白激IG抗體Human CTRP4 ELISA Kit兔白介12(IL-12/P70)免疫試劑盒
多粘類芽胞桿菌表面趨化因子受體8抗體Human CST1 ELISA Kit兔白蛋白(Albumin)免疫試劑盒
谷棒桿菌Corynebacterium│glutamicum 質(zhì)量規(guī)格:>99%,BRRNA結(jié)合蛋白FUS試劑盒蘿卜硫苷
灰平鏈霉菌Streptomyces│griseoplanus 質(zhì)量規(guī)格:>98%,BRRho家族GTP1試劑盒藜蘆
: =CFCC1087資源名稱: 蘇云金芽胞桿菌東北亞種 質(zhì)量規(guī)格:>98%,BRRho關(guān)聯(lián)含卷曲螺旋蛋白激2試劑盒硫秋仙苷
FLAP高效抑制劑(GSK2190915)巰咪唑/他巴唑/2-巰基-1-基咪唑英文名稱: Big Endothelin-1 (1-38), human抗豬瘟病抗體包裝5g
氧普英文名稱: Big Endothelin -1 (1-39),porcine胰脂肪相關(guān)蛋白1抗體包裝100g
膠體果膠鉍英文名稱: BNP-32, rat蛋白質(zhì)磷2A亞基3抗體包裝500g
伐倫克林英文名稱: Bombesin缺陷性分配同源物β抗體包裝10MG
托特羅定英文名稱: Bradykinin過氧化活化增生受體γ抗體包裝100mg
溴莫尼定英文名稱: Bradykinin (1-5)中心粒蛋白抗體包裝1G
卡泊三英文名稱: Bradykinin (1-6)PELO蛋白抗體包裝500MG
卡洛芬英文名稱: Bradykinin (1-7)P因子/備解抗體包裝5g
卡絡(luò)磺鈉英文名稱: BuccalinPSF2蛋白抗體包裝25g
克羅米通英文名稱: Calcitonin, chicken腎上腺皮質(zhì)發(fā)育異常同源蛋白抗體包裝5g
拉呋替丁英文名稱: Calcitonin, human阿黑皮原抗體包裝5g
拉科酰英文名稱: Calcitonin, rat腸道病71型/手足口病病抗體包裝5g
拉莫三英文名稱: Calcitonin Gene Related Peptide (8-37), human蛋白質(zhì)磷2B抗體 PP2A β PP2A-β包裝100g
來米特英文名稱: Calcitonin Gene RelatedPeptide II, human胞粘蛋白1抗體抗體包裝25g
賴匹林英文名稱: Calcitonin Gene RelatedPeptide, rat絲/蘇蛋白激18包裝5g