商品介紹:
DprE1-IN-1是一種有效的DprE1抑制劑,IC50值為10nM,也抑制PDE6,IC50為6uM。 注:本品僅可用于科研實驗,嚴禁用于臨床醫(yī)療及其他用途! CAS號:1494675-86-3 別名:AZ 7371 分子量:355.39 儲存條件:-20℃,有效期2年,溶入溶劑后-20℃請盡量在一個月內(nèi)使用。 |
以下是細胞生物學(xué)試劑的詳細介紹:
操作步驟:
1. 樣品染色
1) 將Binding Buffer(10×)稀釋成1×Binding buffer工作液備用(1ml Binding Buffer(10×)需加入9ml無菌去離子水)。
2) 對于懸浮細胞,500-1000g離心5min收集細胞。
對于貼壁細胞,要用不含EDTA的胰酶消化細胞,胰酶消化時間不宜過長或過短,最好是在輕輕吹打可以使貼壁細胞吹打下來時,加入細胞培養(yǎng)液,將細胞輕輕吹打下來,轉(zhuǎn)移到離心管內(nèi),500-1000g離心5min收集細胞。
3) 收集細胞后,加入預(yù)冷PBS溶液輕搖或用移液器輕柔吹打洗滌,離心收集細胞,共洗滌兩次。
4) 在細胞沉淀中加入1×Binding buffer工作液,重懸細胞,使細胞濃度達到1×106 cell/ml。
5) 吸取100μl細胞懸液(細胞總數(shù)為1×105 cell)至一新管中,加入5μl Annexin V-FITC和5-10 μl PI,輕輕混勻,室溫避光孵育15min。
2. 樣品檢測
1) 流式細胞儀檢測:
染色孵育后,每管加入400μl 1×Binding Buffer工作液,混勻后使用流式細胞儀檢測(1小時內(nèi)檢測)。
建議設(shè)置經(jīng)凋亡誘導(dǎo)的正常細胞、PI單染和Annexin V-FITC單染3個對照組,正常細胞組可作為熒光補償調(diào)節(jié)去除光譜重疊和設(shè)定十字門的位置。結(jié)果可用CellQuest等軟件進行分析,繪制雙色散點圖(two-color dot plot),F(xiàn)ITC為橫坐標,PI為縱坐標。Annexin V-FITC和PI聯(lián)合使用時,活細胞僅有很低強度的背景熒光,早期凋亡細胞僅有較強的綠色熒光,晚期凋亡細胞有綠色和紅色雙重熒光。
2) 熒光顯微鏡檢測:
染色孵育后涂片,顯微鏡下觀察。使用熒光顯微鏡上的藍光和綠光通道分別觀察FITC和PI。被Annexin V-FITC結(jié)合的細胞顯示漿膜上有綠色光環(huán)。喪失細胞膜完整性的細胞,細胞核顯示紅色,膜上有綠色光環(huán)。
公司產(chǎn)品僅用于科研細胞培養(yǎng)操作規(guī)程:
一.培養(yǎng)基及培養(yǎng)凍存條件準備:
1)準備RPMI-1640培養(yǎng)基(RPMI-1640:GIBCO),90%;優(yōu)質(zhì)胎牛血清,10%。
2)培養(yǎng)條件: 氣相:空氣,95%;二氧化碳,5%。 溫度:37℃,培養(yǎng)箱濕度為70%-80%。
3)凍存液:90%血清,10%DMSO,現(xiàn)用現(xiàn)配,液氮儲存。
二.細胞處理:
1)復(fù)蘇細胞:將含有1mL細胞懸液的凍存管迅速放入37℃水浴中(水面要低于凍存管蓋部)搖晃解凍,移入事先準備好的含有4mL培養(yǎng)基的15ml離心管中混合均勻。在1000RPM條件下離心4分鐘,棄去上清液,加入1mL培養(yǎng)基后吹勻。然后將所有細胞懸液移入含有5ml培養(yǎng)基的培養(yǎng)瓶中培養(yǎng)過夜。第二天換液并檢查細胞密度。
2)細胞傳代:如果細胞密度達80%-90%,即可進行傳代培養(yǎng)。
對于懸浮細胞,傳代可參考以下方法:
方法一:收集細胞,1000RPM,常溫條件下離心5分鐘,棄去上清液,補加1-2mL培養(yǎng)液后吹勻,將細胞懸液按1:2到1:5的比例分到新的含8ml培養(yǎng)基的新皿中或者瓶中。
乳乳球菌白喉酰生物合成樣蛋白2抗體Human UCN2(Urocortin-2) ELISA Kit人促腎上皮質(zhì)激釋放激(CRH)免疫試劑盒
叢梗孢屬Notch信號通路Delta樣配體3抗體Human ITPA(Inosine triphosphate pyrophosphatase) ELISA Kit人促卵泡(FSH)免疫試劑盒
燼灰吸水鏈霉菌動力蛋白激活蛋白2抗體Human RAB8A(Ras-related protein Rab-8A) ELISA Kit人促甲狀腺受體(TSHR)抗體免疫試劑盒
紫棕炭團菌視神經(jīng)相關(guān)蛋白/早老結(jié)合蛋白抗體Human NDRG1(Protein NDRG1) ELISA Kit人促甲狀腺受體(TSHR)免疫試劑盒
弗氏鏈霉菌DHX螺旋抗體Human GBA(Glucosylceramidase) ELISA Kit人促甲狀腺釋放激(TRH)免疫試劑盒
地衣芽孢桿菌轉(zhuǎn)運蛋白DISP2抗體Human VSNL1(Visinin-like protein 1) ELISA Kit人促甲狀腺(TSH)免疫試劑盒
劣質(zhì)食用油鑒別速測包DNA聚合α2抗體Human OGG1(N-glycosylase/DNA lyase) ELISA Kit人促分裂原活化蛋白激激活的蛋白激3(MAPKAPK3)免疫試劑盒
肉梭菌 A型*短鏈脫氫/還原家族7B抗體Human FASN(Fatty acid synthase) ELISA Kit人次氧化免疫試劑盒
WAL 14507 [DSM 19850]膜二肽3抗體Human CA14(Carbonic anhydrase 14) ELISA Kit人雌(estrone,E1)免疫試劑盒
假灰鏈霉菌雙特異性磷13抗體Human RAP1GDS1(Rap1 GTPase-GDP dissociation stimulator 1) ELISA Kit人雌三(E3)免疫試劑盒
嗜糖黃桿菌DIM-7蛋白抗體Human PLIN1(Perilipin-1) ELISA Kit人雌激誘導(dǎo)蛋白PS2 免疫試劑盒
雙重輪絲鏈霉菌核糖核Dicer抗體Human ASRGL1(L-asparaginase) ELISA Kit人雌激受體β(ESR2)免疫試劑盒
頂青霉內(nèi)皮和平滑肌衍生的神經(jīng)纖毛蛋白抗體Human SOCS2(Suppressor of cytokine signaling 2) ELISA Kit人雌激硫轉(zhuǎn)移(SULT1E1)免疫試劑盒
Nesterenkonia flava含錨蛋白重復(fù)序列-因子信號抑制物盒蛋白家族2抗體Human WNT1(Proto-oncogene Wnt-1) ELISA Kit人雌激(E)免疫試劑盒
釀酒酵母DNA連接1抗體Human SOCS1(Suppressor of cytokine signaling 1) ELISA Kit人雌二受體(ER)免疫試劑盒
巴氏醋桿菌DHH蛋白抗體Human APEH(Acylamino-acid-releasing enzyme) ELISA Kit人雌二(E2)免疫試劑盒
鐮孢屬Fusarium│sp. 質(zhì)量規(guī)格:0.9923-羥基白樺
蘇云金芽孢桿菌Bacillus│thuringiensis Berliner 質(zhì)量規(guī)格:SP白頭翁皂苷A
米根霉Rhizopus│oryzae 質(zhì)量規(guī)格:型佛司可林
DprE1抑制劑(DprE1-IN-1)5-三基尿嘧啶(標準品)英文名稱: Rifabutin CD83抗體包裝250mg
5-硝基糠二乙酯(標準品)英文名稱: Rifapentine17號染色體開放閱讀框59抗體包裝50MG
6-氧基-2-萘乙(標準品)英文名稱: Rifapentine17號染色體開放閱讀框39抗體包裝25g
6-硫鳥嘌呤(標準品)英文名稱: Riluzole鈣敏感受體1抗體包裝5g
6-疏基嘌呤(標準品)英文名稱: Riluzole鈣結(jié)合蛋白Calponin抗體包裝1g
7-基去乙酰氧基頭孢烷(7-ADCA)(標準品)英文名稱: Deferasirox2號染色體開放閱讀框44抗體包裝25ml
808猩紅(標準品)英文名稱: Deferasirox2號染色體開放閱讀框55抗體包裝5g
Acarbose(標準品)英文名稱: Risperidone2號染色體開放閱讀框57抗體包裝250mg
Acyclovir(標準品)英文名稱: Risperidone2號染色體開放閱讀框29抗體包裝25g
Adiphenine HCl(標準品)英文名稱: Ritonavir3號染色體開放閱讀框21抗體包裝5g
Allylestrenol(標準品)英文名稱: Ritonavir1號染色體開放閱讀框74抗體包裝1g
alpha-亞麻(標準品)英文名稱: Rosiglitazone base補體C1q和腫瘤壞死因子相關(guān)蛋白10抗體包裝5g
Altrenogest(標準品)英文名稱: Rosiglitazone base1號染色體開放閱讀框93抗體包裝100g
Amisulpride(標準品)英文名稱: Rosiglitazone Maleate 1號染色體開放閱讀框94抗體包裝25g
Anastrozole(標準品)英文名稱: Rosiglitazone Maleate 1號染色體開放閱讀框96抗體包裝500g