產(chǎn)品屬性:
中文名稱:FLAP抑制劑(MK-0591)
英文名稱:MK-0591
產(chǎn)品規(guī)格:1mL(10mM)|5mg|10mg|50mg|100mg
發(fā)貨周期:1~3天
公司產(chǎn)品僅用于科研
商品介紹:
MK-0591是FLAP特異性抑制劑,IC50為1.6nM。 注:本品僅可用于科研實驗,嚴禁用于臨床醫(yī)療及其他用途! CAS號:136668-42-3 別名:Quiflapon 純度:95.0% 分子量:587.17 儲存條件:-20℃,有效期2年,溶入溶劑后-20℃請盡量在一個月內(nèi)使用。 |
細胞生物學研究有以下幾個方面:
細胞生物學的研究內(nèi)容十分廣泛,主要包括:
①細胞核、染色體以及基因表達的研究;
②生物膜與細胞器的研究;
③細胞骨架體系的研究;
④細胞增殖及其調(diào)控;
⑤細胞分化及其調(diào)控;
⑥細胞的衰老與編程性死亡(凋亡);
⑦細胞的起源與進化;
⑧細胞工程.
實驗報告:
一、分離與培養(yǎng):
1、無菌條件下,取出1-3d 齡SD大鼠心房組織,然后用PBS將此組織塊清洗2次,最后將1mm3左右大??;
2、往組織塊中加入4 mL酶消化液(0.1% 和0.1% I型膠原酶),混懸10s,置37℃條件下消化10min,之后用滴管吹打制成單細胞懸液,自然沉淀并收集上清,用含10% FBS培養(yǎng)基終止消化后4℃放置;
3、剩下的組織再加入3~4mL酶消化液,混懸10s,置37℃消化10 min后,按上述方法收集上清并終止消化后4℃放置,重復此步驟2-3次,直至組織*被消化;
4、用200目不銹鋼篩網(wǎng)過濾細胞消化液,1200r/min 離心10min,棄去上清,沉淀細胞用含有10% FBS DMEM/F12培養(yǎng)基混懸,接種于25cm2培養(yǎng)瓶,放置于37℃ ,5%CO2 培養(yǎng)箱中培養(yǎng);
5、差速貼壁1h后,吸出培養(yǎng)基,按實驗需要接種于6孔板中繼續(xù)培養(yǎng);
二、免疫熒光鑒定:
1、待心房肌細胞生長至80%融合時,棄去培養(yǎng)基,用溫育的PBS沖洗細胞2次,每次10min,然后用4%多聚甲醛在室溫條件下固定細胞15min;
2、PBS沖洗細胞2次,每次10min,然后在4℃條件下,用0.1%Triton X-100透膜15min;
3、PBS沖洗細胞2次,每次10min,然后在室溫條件下,用4% BSA封閉細胞30min;
4、按1: 100的比例稀釋α-actin一抗,然后將其放在4℃冰箱中孵育細胞過夜;
5、PBS沖洗細胞3次,每次10min,按1:150的比例稀釋抗α-actin的二抗, 37℃條件下放置1h;
6、用PBS沖洗3次,每次10min,最后在倒置熒光顯微鏡下觀察圖像并拍照。
淺灰綠色鏈霉菌磷化α-連環(huán)蛋白抗體Human GADL1(Glutamate Decarboxylase Like Protein 1) ELISA Kit人葡萄糖6磷異構(gòu)(GPI)免疫試劑盒
白肉迷孔菌周期E2抗體Human GAD-Ab(Anti-Glutamic Acid Decarboxylase antibody) ELISA Kit人葡萄糖6磷脫氫(G6PD)免疫試劑盒
印度毛殼磷化鈣/鈣調(diào)依賴蛋白激CAMK2B/D/G抗體Human GAL12(Galectin 12) ELISA Kit人葡萄糖-6-磷/葡萄糖-6-磷酯(G-6-Pase)免疫試劑盒
煙管菌腫瘤易感候選基因3抗體Human GAL8(Galectin 8) ELISA Kit人破傷風(Tetanus)抗體(IgG)免疫試劑盒
蘋果鏈格孢(蘋果斑點落葉病菌)磷化腫瘤易感候選基因3抗體Human GAL14(Galectin 14) ELISA Kit人蘋果脫氫1(MDH1)免疫試劑盒
貴州綠僵菌磷化CREB-1抗體Human GATA4(GATA Binding Protein 4) ELISA Kit人平滑肌肌動蛋白(SMA)免疫試劑盒
土曲霉磷化CREB-1抗體Human GARS(Glycyl tRNA Synthetase) ELISA Kit人嘌呤核苷磷化(PNP)免疫試劑盒
溜曲霉磷化周期依賴性激6抗體Human GCLM(Glutamate Cysteine Ligase, Modifier Subunit) ELISA Kit人脾臟酪激(Syk)免疫試劑盒
尖枝革菌原癌基因CBL2抗體Human GCSFR(Colony Stimulating Factor Receptor, Granulocyte) ELISA Kit人皮質(zhì)抑/皮質(zhì)穩(wěn)定蛋白(CORT)免疫試劑盒
短鏈諾卡氏菌磷化原癌基因CBL2抗體Human GDF3(Growth Differentiation Factor 3) ELISA Kit人皮質(zhì)/腎上腺(CORT)免疫試劑盒
赤曲霉β鏈接相互作用蛋白1抗體Human fT3(Free Triiodothyronine) ELISA Kit人皮質(zhì)-3(Cortxin-3)免疫試劑盒
臭紅菇磷化β鏈接相互作用蛋白1抗體Human GDF6(Growth Differentiation Factor 6) ELISA Kit人皮質(zhì)類固結(jié)合球蛋白(CBG)免疫試劑盒
Pseudomonas fluorescens PfO-1磷化β 連環(huán)蛋白抗體Human GDH/GLDH(Glutamate dehydrogenase) ELISA Kit人皮質(zhì)(Cortisol)免疫試劑盒
成團泛菌葉綠體蛋白抗體(植物)Human GDF7(Growth Differentiation Factor 7) ELISA Kit人皮膚淋巴相關抗原(CLA)免疫試劑盒
枯草芽孢桿菌磷化后期促進復合蛋白3抗體Human fT4(Free Thyroxine) ELISA Kit人皮膚蛋白(DPT)免疫試劑盒
放射形根瘤菌磷化絲切蛋白抗體Human FGα(Fibrinogen Alpha) ELISA Kit人皮動蛋白(CTTN)免疫試劑盒
釀酒酵母Saccharomyces│cerevisiae 質(zhì)量規(guī)格:>98%,BSB淋巴抗原試劑盒次大風子
鴨疫里氏桿菌Riemerella│anatipestifer 質(zhì)量規(guī)格:>98%,BRblca-4 ELISA Kit次
: IOCM30資源名稱: 豇豆慢生根瘤菌 質(zhì)量規(guī)格:>98%,BRblca-1 ELISA Kit催吐蘿芙木定
FLAP抑制劑(MK-0591)增殖潛能相關蛋白抗體包裝1g
RhoC抗體包裝25g
環(huán)指蛋白170抗體包裝5g
環(huán)指蛋白185抗體包裝1g
RHOG抗體包裝5g
RPS27A抗體包裝1g
核轉(zhuǎn)錄因子NF-κB受體抗體(核因子kB受體活化因子)包裝5g
維相關孤兒受體α抗體包裝250mg
呼吸道合胞病核蛋白抗體包裝25g
核糖體蛋白S6激家族RSK3抗體包裝5g
RCCD1蛋白抗體包裝1g
磷化周期檢查控制蛋白質(zhì)抗體包裝250mg
磷化減數(shù)分裂重組蛋白家族REC8抗體包裝5g
ATP依賴解旋RENT1抗體包裝1g
Ras相關雌調(diào)節(jié)生長抑制蛋白包裝25g
操作規(guī)程
1、在96孔板加入細胞100μL/孔,通常細胞增殖實驗每孔加入100微升2000個細胞,細胞毒性實驗每孔加入100微升5000~10000個細胞(具體每孔所用的細胞的數(shù)目,需根據(jù)細胞的大小,細胞增殖速度的快慢等決定)。置37℃ 5%CO2細胞培養(yǎng)箱培養(yǎng)24小時.
2、.加入適當濃度的0~10μL 受試化合物。
3、將96孔板在37℃,含5% CO2空氣及100%濕度的細胞培養(yǎng)箱中孵育適當時間。
4、將5×MTT 用稀釋液稀釋成1× MTT 溶液。
5、每孔加50μL 1× MTT 溶液,在37℃孵育4小時,使MTT 還原為甲臜。
6、吸出上清液,每孔加150μL DMSO 使甲臜溶解,用平板搖床搖勻。
7、酶標儀在570nm 波長處檢測每孔的光密度(如無570nm 濾光片,可以使用560-600nm 的濾光片)。
8、結(jié)果分析
a、細胞的存活率:將各測試孔的OD 值減去本底OD 值(*培養(yǎng)基加MTT,無細胞)或空白藥物孔OD 值(*培養(yǎng)基加受試藥物的不同稀釋度加MTT,無細胞),各重復孔的OD 值取平均數(shù)±SD。細胞的存活率以T/C%表示,T 為加藥細胞的OD 值,C 為對照細胞的OD 值。細胞存活率% =(加藥細胞OD/對照細胞OD)×100
b、求出T/C = 50% 時的藥物濃度(IC50)及T/C = 10%時的藥物濃度(IC90)