黑色標(biāo)本保色液公司正在出售的產(chǎn)品：PHD3 /FITC 熒光標(biāo)記脯氨羥化抗體IgG酰苯 99.8%，升華純化
phospho-FAK(pTyr577)/FITC 熒光標(biāo)記抗化粘著斑激抗體IgG酰苯 99.95%，升華純化
phospho-JNK1/2(pThr183/pTyr185)/FITC 熒光標(biāo)記抗化氨末端激1/2抗體IgG莰烯 75%
phospho GAP-43(pSer41)/

以下是細(xì)胞生物學(xué)試劑的詳細(xì)介紹：

 

公司產(chǎn)品僅用于科研細(xì)胞培養(yǎng)操作規(guī)程：

一．培養(yǎng)基及培養(yǎng)凍存條件準(zhǔn)備：

1）準(zhǔn)備RPMI-1640培養(yǎng)基(RPMI-1640：GIBCO)，90%；優(yōu)質(zhì)胎牛血清，10%。

2）培養(yǎng)條件： 氣相：空氣，95%；二氧化碳，5%。 溫度：37℃，培養(yǎng)箱濕度為70%-80%。

3）凍存液：90%血清，10%DMSO，現(xiàn)用現(xiàn)配，液氮儲(chǔ)存。

二．細(xì)胞處理：

1）復(fù)蘇細(xì)胞：將含有1mL細(xì)胞懸液的凍存管迅速放入37℃水浴中（水面要低于凍存管蓋部）搖晃解凍，移入事先準(zhǔn)備好的含有4mL培養(yǎng)基的15ml離心管中混合均勻。在1000RPM條件下離心4分鐘，棄去上清液，加入1mL培養(yǎng)基后吹勻。然后將所有細(xì)胞懸液移入含有5ml培養(yǎng)基的培養(yǎng)瓶中培養(yǎng)過(guò)夜。第二天換液并檢查細(xì)胞密度。

2）細(xì)胞傳代：如果細(xì)胞密度達(dá)80%-90%，即可進(jìn)行傳代培養(yǎng)。

對(duì)于懸浮細(xì)胞，傳代可參考以下方法：

方法一：收集細(xì)胞，1000RPM，常溫條件下離心5分鐘，棄去上清液，補(bǔ)加1-2mL培養(yǎng)液后吹勻，將細(xì)胞懸液按1：2到1：5的比例分到新的含8ml培養(yǎng)基的新皿中或者瓶中。
商品介紹：

操作步驟：

1. 樣品染色

1) 將Binding Buffer（10×）稀釋成1×Binding buffer工作液備用（1ml Binding Buffer（10×）需加入9ml無(wú)菌去離子水）。

2) 對(duì)于懸浮細(xì)胞，500-1000g離心5min收集細(xì)胞。

對(duì)于貼壁細(xì)胞，要用不含EDTA的胰酶消化細(xì)胞，胰酶消化時(shí)間不宜過(guò)長(zhǎng)或過(guò)短，最好是在輕輕吹打可以使貼壁細(xì)胞吹打下來(lái)時(shí)，加入細(xì)胞培養(yǎng)液，將細(xì)胞輕輕吹打下來(lái)，轉(zhuǎn)移到離心管內(nèi)，500-1000g離心5min收集細(xì)胞。

3) 收集細(xì)胞后，加入預(yù)冷PBS溶液輕搖或用移液器輕柔吹打洗滌，離心收集細(xì)胞，共洗滌兩次。

4) 在細(xì)胞沉淀中加入1×Binding buffer工作液，重懸細(xì)胞，使細(xì)胞濃度達(dá)到1×106 cell/ml。

5) 吸取100μl細(xì)胞懸液（細(xì)胞總數(shù)為1×105 cell）至一新管中，加入5μl Annexin V-FITC和5-10 μl PI，輕輕混勻，室溫避光孵育15min。

2. 樣品檢測(cè)

1) 流式細(xì)胞儀檢測(cè)：

染色孵育后，每管加入400μl 1×Binding Buffer工作液，混勻后使用流式細(xì)胞儀檢測(cè)（1小時(shí)內(nèi)檢測(cè)）。

建議設(shè)置經(jīng)凋亡誘導(dǎo)的正常細(xì)胞、PI單染和Annexin V-FITC單染3個(gè)對(duì)照組，正常細(xì)胞組可作為熒光補(bǔ)償調(diào)節(jié)去除光譜重疊和設(shè)定十字門(mén)的位置。結(jié)果可用CellQuest等軟件進(jìn)行分析，繪制雙色散點(diǎn)圖（two-color dot plot），F(xiàn)ITC為橫坐標(biāo)，PI為縱坐標(biāo)。Annexin V-FITC和PI聯(lián)合使用時(shí)，活細(xì)胞僅有很低強(qiáng)度的背景熒光，早期凋亡細(xì)胞僅有較強(qiáng)的綠色熒光，晚期凋亡細(xì)胞有綠色和紅色雙重?zé)晒狻?/span>

2) 熒光顯微鏡檢測(cè)：

染色孵育后涂片，顯微鏡下觀察。使用熒光顯微鏡上的藍(lán)光和綠光通道分別觀察FITC和PI。被Annexin V-FITC結(jié)合的細(xì)胞顯示漿膜上有綠色光環(huán)。喪失細(xì)胞膜完整性的細(xì)胞，細(xì)胞核顯示紅色，膜上有綠色光環(huán)。

金針菇β晶體蛋白B1抗體Human GBP4 ELISA Kit小鼠G蛋白偶聯(lián)膽汁受體1(GPBAR1)免疫試劑盒

粉紅單端孢磷化Bax抗體Human GDAP2 ELISA Kit小鼠GTP KRas 免疫試劑盒

大腸埃希氏菌磷化癌抗雌激耐藥蛋白1抗體Human GDE1 ELISA Kit小鼠GATA結(jié)合蛋白4(GATA4)免疫試劑盒

狂犬病病磷化癌抗雌激耐藥蛋白1抗體Human GDI1 ELISA Kit小鼠FMS樣酪激3配體(Flt3L)免疫試劑盒

黑曲霉磷化癌抗雌激耐藥蛋白1抗體Human GBP5 ELISA Kit小鼠FMS樣酪激3(Flt3)免疫試劑盒

雙孢蘑菇磷化相關(guān)死亡促進(jìn)因子抗體Human GDI2 ELISA Kit小鼠FAM84A蛋白(FAM84A)免疫試劑盒

靈芝(紅芝, 赤芝)肌動(dòng)蛋白樣蛋白6A抗體Human GBP6 ELISA Kit小鼠FAM172A蛋白(FAM172A)免疫試劑盒

佛羅里達(dá)側(cè)耳磷化紅陰離子交換蛋白1抗體Human GCAT ELISA Kit小鼠E選擇(E-Selectin/CD62E)免疫試劑盒

玫煙色棒束孢磷化紅陰離子交換蛋白1抗體Human GAS8 ELISA Kit小鼠E鈣粘著蛋白/上皮性鈣黏附蛋白(E-Cad)免疫試劑盒

香菇障礙自整合蛋白BAF抗體Human GATA1 ELISA Kit小鼠E3泛蛋白連接TRIM68(TRIM68)免疫試劑盒

網(wǎng)紋馬勃磷化轉(zhuǎn)錄因子MYB相關(guān)蛋白B抗體Human GATA3(GATA Binding Protein 3) ELISA Kit小鼠D-乳脫氫(D-LDH)免疫試劑盒

劉氏菌屬磷化轉(zhuǎn)錄因子MYB相關(guān)蛋白B抗體Human GATA6 ELISA Kit小鼠D-乳免疫試劑盒

微白黃鏈霉菌磷化B-Raf抗體Human GATAD2B ELISA Kit小鼠D-甘油3-磷免疫試劑盒

碗狀瘤杯菌磷化B-Raf抗體Human GATC ELISA Kit小鼠D二聚體(D2D)免疫試劑盒

大腸埃希菌磷化B-Raf抗體Human GBA2 ELISA Kit小鼠DNA(胞嘧啶-5)甲基轉(zhuǎn)移3B(DNMT3B)免疫試劑盒

無(wú)磷化B-Raf抗體Human GATM ELISA Kit小鼠DNA(胞嘧啶-5)甲基轉(zhuǎn)移3A(DNMT3A)免疫試劑盒

鹽單胞菌Halomonas│sp. 質(zhì)量規(guī)格：>0.1 U/mg,BCβ,β胡蘿卜9',10'加氧試劑盒七葉樹(shù)皂苷B

曲霉屬Aspergillus│sp. 質(zhì)量規(guī)格：染料含量：>80%,BSα-烯化試劑盒8-去乙?；釣鯄A

扁刺齒菌Steccherinum│rawakense (Pers.) Banker 質(zhì)量規(guī)格：>98%，BRα戊二脫氫試劑盒羥基吳茱萸堿
黑色標(biāo)本保色液北里胞 N-Boc-酪D-乳酸脫氫Elisa

海南根瘤 2-氨基-2',4'-二氟苯乙酮EndoglinElisa

對(duì)照液 2-酰E鈣粘著蛋白;上皮性鈣黏附蛋白Elisa

隆紋黑蛋巢 四氫堿鹽酸鹽E選擇Elisa

福氏志賀氏 三羥甲基烷-三[3-(2-甲基吖啶基)酸酯]GATA結(jié)合蛋白3Elisa

釀酒酵母 1-基哌二氫GRO;KCElisa

早熟禾鐮孢 4-環(huán)己基嗎啉III型前膠原Elisa

黃海海桿狀 1,2-二氟-3-苯IV型膠原Elisa

暗擬莖點(diǎn)霉 硝酸奧昔康唑IX型膠原Elisa

水堿 降烯-2,3-二羧基亞基叔丁基碳酸酯IκB激-βElisa

腐皮鐮孢 4--5-羥基3(2H)-噠I型膠原Elisa

米曲霉疏展變種 2-氟-4-苯肼鹽酸鹽I型膠原羥基端肽β降解產(chǎn)物Elisa

平臍蠕孢 3-硝基鄰苯二甲酸酐I型膠原羧基端前肽Elisa

鞘氨單胞 5-溴苯酞I型前膠原羧基端肽Elisa

Massilia namucuonensis 3-氟甲酯I型前膠原N端前肽Elisa