邁格林華染色液(May-Grunwald Stain)公司正在出售的產(chǎn)品：TPSB2/Tryptase Beta2/FITC 熒光標(biāo)記兔抗人、大、小鼠肥大類胰蛋白β2IgG3-雙(2-羥)氨-2-羥磺 超純級(jí)
MCT1/FITC 熒光標(biāo)記單羧轉(zhuǎn)運(yùn)蛋白-1抗體IgG麥芽三糖，水合 95%
MDM2/FITC 熒光標(biāo)記雙微體2癌因抗體IgG藍(lán)四氮唑 超純級(jí)
Phospho-MDM2 (Ser16

以下是細(xì)胞生物學(xué)試劑的詳細(xì)介紹：

商品介紹：

公司產(chǎn)品僅用于科研細(xì)胞培養(yǎng)操作規(guī)程：

一．培養(yǎng)基及培養(yǎng)凍存條件準(zhǔn)備：

1）準(zhǔn)備RPMI-1640培養(yǎng)基(RPMI-1640：GIBCO)，90%；優(yōu)質(zhì)胎牛血清，10%。

2）培養(yǎng)條件： 氣相：空氣，95%；二氧化碳，5%。 溫度：37℃，培養(yǎng)箱濕度為70%-80%。

3）凍存液：90%血清，10%DMSO，現(xiàn)用現(xiàn)配，液氮儲(chǔ)存。

二．細(xì)胞處理：

1）復(fù)蘇細(xì)胞：將含有1mL細(xì)胞懸液的凍存管迅速放入37℃水浴中（水面要低于凍存管蓋部）搖晃解凍，移入事先準(zhǔn)備好的含有4mL培養(yǎng)基的15ml離心管中混合均勻。在1000RPM條件下離心4分鐘，棄去上清液，加入1mL培養(yǎng)基后吹勻。然后將所有細(xì)胞懸液移入含有5ml培養(yǎng)基的培養(yǎng)瓶中培養(yǎng)過夜。第二天換液并檢查細(xì)胞密度。

2）細(xì)胞傳代：如果細(xì)胞密度達(dá)80%-90%，即可進(jìn)行傳代培養(yǎng)。

對(duì)于懸浮細(xì)胞，傳代可參考以下方法：

方法一：收集細(xì)胞，1000RPM，常溫條件下離心5分鐘，棄去上清液，補(bǔ)加1-2mL培養(yǎng)液后吹勻，將細(xì)胞懸液按1：2到1：5的比例分到新的含8ml培養(yǎng)基的新皿中或者瓶中。

操作步驟：

1. 樣品染色

1) 將Binding Buffer（10×）稀釋成1×Binding buffer工作液備用（1ml Binding Buffer（10×）需加入9ml無菌去離子水）。

2) 對(duì)于懸浮細(xì)胞，500-1000g離心5min收集細(xì)胞。

對(duì)于貼壁細(xì)胞，要用不含EDTA的胰酶消化細(xì)胞，胰酶消化時(shí)間不宜過長(zhǎng)或過短，最好是在輕輕吹打可以使貼壁細(xì)胞吹打下來時(shí)，加入細(xì)胞培養(yǎng)液，將細(xì)胞輕輕吹打下來，轉(zhuǎn)移到離心管內(nèi)，500-1000g離心5min收集細(xì)胞。

3) 收集細(xì)胞后，加入預(yù)冷PBS溶液輕搖或用移液器輕柔吹打洗滌，離心收集細(xì)胞，共洗滌兩次。

4) 在細(xì)胞沉淀中加入1×Binding buffer工作液，重懸細(xì)胞，使細(xì)胞濃度達(dá)到1×106 cell/ml。

5) 吸取100μl細(xì)胞懸液（細(xì)胞總數(shù)為1×105 cell）至一新管中，加入5μl Annexin V-FITC和5-10 μl PI，輕輕混勻，室溫避光孵育15min。

2. 樣品檢測(cè)

1) 流式細(xì)胞儀檢測(cè)：

染色孵育后，每管加入400μl 1×Binding Buffer工作液，混勻后使用流式細(xì)胞儀檢測(cè)（1小時(shí)內(nèi)檢測(cè)）。

建議設(shè)置經(jīng)凋亡誘導(dǎo)的正常細(xì)胞、PI單染和Annexin V-FITC單染3個(gè)對(duì)照組，正常細(xì)胞組可作為熒光補(bǔ)償調(diào)節(jié)去除光譜重疊和設(shè)定十字門的位置。結(jié)果可用CellQuest等軟件進(jìn)行分析，繪制雙色散點(diǎn)圖（two-color dot plot），F(xiàn)ITC為橫坐標(biāo)，PI為縱坐標(biāo)。Annexin V-FITC和PI聯(lián)合使用時(shí)，活細(xì)胞僅有很低強(qiáng)度的背景熒光，早期凋亡細(xì)胞僅有較強(qiáng)的綠色熒光，晚期凋亡細(xì)胞有綠色和紅色雙重?zé)晒狻?/span>

2) 熒光顯微鏡檢測(cè)：

染色孵育后涂片，顯微鏡下觀察。使用熒光顯微鏡上的藍(lán)光和綠光通道分別觀察FITC和PI。被Annexin V-FITC結(jié)合的細(xì)胞顯示漿膜上有綠色光環(huán)。喪失細(xì)胞膜完整性的細(xì)胞，細(xì)胞核顯示紅色，膜上有綠色光環(huán)。
巨大芽胞桿菌自噬相關(guān)蛋白18抗體Human MARVELD3 ELISA Kit豬白介22(IL-22)免疫試劑盒

杏鮑菇自噬相關(guān)蛋白4A抗體Human MAS1L ELISA Kit豬白介2(IL-2)免疫試劑盒

鮮綠青霉載脂蛋白A4抗體Human MAST1 ELISA Kit豬白介1受體拮抗劑(IL1Ra)免疫試劑盒

芽孢桿菌12脂氧合抗體Human MAST3 ELISA Kit豬白介1β (IL-1β)免疫試劑盒

血紅紅曲菌血管緊張III抗體Human C10orf58(Redox-regulatory protein FAM213A) ELISA Kit豬白介1α(IL-1α)免疫試劑盒

乳桿菌屬腺苷環(huán)化3抗體Human NY-ESO-1(Cancer/testis antigen 1) ELISA Kit豬白介18(IL-18)免疫試劑盒

蘇云金芽孢桿菌肯尼亞亞種血管動(dòng)蛋白抗體Human Caspase 12 ELISA Kit豬白介17(IL-17)免疫試劑盒

水稻漢納酵母腺病早期E1A蛋白抗體Human CD320 ELISA Kit豬白介15(IL-15)免疫試劑盒

球形賴芽孢桿菌磷化活化復(fù)制因子2抗體Human C1orf31(Cytochrome c oxidase assembly factor 6 homolog) ELISA Kit豬白介13(IL-13)免疫試劑盒

Aureimonas pseudogalii磷化活化復(fù)制因子2抗體Human TMPRSS15(Enteropeptidase) ELISA Kit豬白介12(IL-12/P70)免疫試劑盒

大腸埃希氏菌磷化失調(diào)癥蛋白1抗體Human SPAST(Spastin) ELISA Kit豬白介12(IL-12/P40)免疫試劑盒

香菇錨蛋白重復(fù)結(jié)構(gòu)域蛋白17抗體Human MLKL(mixed lineage kinase domain-like) ELISA Kit豬白介10(IL-10)免疫試劑盒

果生假絲酵母胞質(zhì)乙脫氫1抗體Human TOM20(translocase of outer mitochondrial membrane 20 homolog) ELISA Kit豬白介1(IL-1)免疫試劑盒

天藍(lán)色鏈霉菌ADP核糖基化樣因子ARL3抗體Human HSD3B7(3 beta-hydroxysteroid dehydrogenase type 7) ELISA Kit豬白蛋白免疫試劑盒

三葉草根瘤菌花生四烯15脂氧合1抗體Human MVK(Mevalonate kinase) ELISA Kit豬γ干擾(IFN-γ)免疫試劑盒

解幾丁質(zhì)纖維單胞菌癌增強(qiáng)蛋白2抗體Human CD97(CD97 antigen) ELISA Kit豬γ淀粉(AMY)免疫試劑盒

羅伊赫海源菌Idiomarina│loihiensis 質(zhì)量規(guī)格：比活度：>5000 U/mg,BC烯試劑盒鹽

硫色曲霉Aspergillus│sulphureus 質(zhì)量規(guī)格：>98%,植物激級(jí)脫氫E1試劑盒乙氧基血根堿

青霉屬Penicillium│sp. 質(zhì)量規(guī)格：>98.0%，BR激R型同工試劑盒遠(yuǎn)華蟾蜍精
邁格林華染色液(May-Grunwald Stain)仁果殼小圓孢 苯并呋喃-3-酸弓形蟲IgM抗體Elisa

嗜熱脂肪地芽孢桿 2-氨基-3-甲氧基酪蛋白Elisa

耐寒短桿 反式-(1R,2R)-2-氨基環(huán)戊鹽酸鹽a膠質(zhì)系來源的神經(jīng)營(yíng)養(yǎng)因子Elisa

黑曲霉 2,4-二-5-基嘧啶b膠質(zhì)系來源的神經(jīng)營(yíng)養(yǎng)因子Elisa

西宮皮生球 3-甲基-1H-吲唑乙型肝炎病表面IgG抗體Elisa

阿魏側(cè)耳 3,3'-雙噻吩絡(luò)絲蛋白Elisa

枯草芽孢桿 N,1-雙(叔丁氧羰基)-L-組氨酸雙環(huán)己鹽抗神經(jīng)節(jié)苷脂抗體Elisa

蘇云金芽孢桿 2-甲基-5-甲氧基反神經(jīng)調(diào)節(jié)苷脂抗體Elisa

佛雷德里克斯堡假單胞 2-氨基嘧啶-5-羧酸神經(jīng)節(jié)苷脂Elisa

單胞屬 *貝特6-磷酸果糖激-1Elisa

灰略紅鏈霉 甲基-4,6-O-亞芐基-Α-D-吡喃葡糖苷II型膠原蛋白Elisa

大腸埃希氏 3,5-二羥基苯甲酰肥大蛋白Elisa

草菇 2-氨基-3--5-26S蛋白體Elisa

禿裸鏈霉 O-乙基異脲鹽酸鹽嗜酸性粒過氧化物Elisa

Actinokineospora 2-二苯并[b,f][1,4]氧氮雜卓-11(10H)-酮凝血因子ⅡElisa