公司產(chǎn)品僅用于科研
細(xì)胞生物學(xué)研究有以下幾個(gè)方面:
細(xì)胞生物學(xué)的研究?jī)?nèi)容十分廣泛,主要包括:
①細(xì)胞核、染色體以及基因表達(dá)的研究;
②生物膜與細(xì)胞器的研究;
③細(xì)胞骨架體系的研究;
④細(xì)胞增殖及其調(diào)控;
⑤細(xì)胞分化及其調(diào)控;
⑥細(xì)胞的衰老與編程性死亡(凋亡);
⑦細(xì)胞的起源與進(jìn)化;
⑧細(xì)胞工程.
產(chǎn)品屬性:
中文名稱:細(xì)胞增殖與毒性檢測(cè)試劑盒(CCK-8)
英文名稱:
產(chǎn)品規(guī)格:100次/500次/3000次/10000次
發(fā)貨周期:1~3天
商品介紹:
產(chǎn)品原理: Cell Counting Kit(細(xì)胞增殖與毒性檢測(cè)試劑盒)是一種基于WST-8的廣泛應(yīng)用于細(xì)胞增殖和細(xì)胞毒性的快速高靈敏度檢測(cè)試劑盒,其性能優(yōu)于目前市面上進(jìn)口的CCK-8試劑盒。 WST-8是一種類似于MTT的化合物,在電子耦合試劑1-Methoxy PMS存在的情況下,可以被還原生成橙黃色水溶性的甲臜(Formazan)。細(xì)胞增殖越多越快,則顏色越深;細(xì)胞毒性越大,則顏色越淺。對(duì)于同樣的細(xì)胞,顏色的深淺和細(xì)胞數(shù)目呈線性關(guān)系。 產(chǎn)品優(yōu)勢(shì): 可用于細(xì)胞因子誘導(dǎo)的細(xì)胞增殖檢測(cè)、抗癌藥物等對(duì)細(xì)胞有毒試劑誘導(dǎo)的細(xì)胞毒性檢測(cè)、一些藥物誘導(dǎo)的細(xì)胞生長(zhǎng)抑制檢測(cè);操作方法非常便捷、快速。 保存條件:4°保存一年,-20°兩年。 |
實(shí)驗(yàn)報(bào)告:
一、分離與培養(yǎng):
1、無(wú)菌條件下,取出1-3d 齡SD大鼠心房組織,然后用PBS將此組織塊清洗2次,最后將1mm3左右大?。?/span>
2、往組織塊中加入4 mL酶消化液(0.1% 和0.1% I型膠原酶),混懸10s,置37℃條件下消化10min,之后用滴管吹打制成單細(xì)胞懸液,自然沉淀并收集上清,用含10% FBS培養(yǎng)基終止消化后4℃放置;
3、剩下的組織再加入3~4mL酶消化液,混懸10s,置37℃消化10 min后,按上述方法收集上清并終止消化后4℃放置,重復(fù)此步驟2-3次,直至組織*被消化;
4、用200目不銹鋼篩網(wǎng)過濾細(xì)胞消化液,1200r/min 離心10min,棄去上清,沉淀細(xì)胞用含有10% FBS DMEM/F12培養(yǎng)基混懸,接種于25cm2培養(yǎng)瓶,放置于37℃ ,5%CO2 培養(yǎng)箱中培養(yǎng);
5、差速貼壁1h后,吸出培養(yǎng)基,按實(shí)驗(yàn)需要接種于6孔板中繼續(xù)培養(yǎng);
二、免疫熒光鑒定:
1、待心房肌細(xì)胞生長(zhǎng)至80%融合時(shí),棄去培養(yǎng)基,用溫育的PBS沖洗細(xì)胞2次,每次10min,然后用4%多聚甲醛在室溫條件下固定細(xì)胞15min;
2、PBS沖洗細(xì)胞2次,每次10min,然后在4℃條件下,用0.1%Triton X-100透膜15min;
3、PBS沖洗細(xì)胞2次,每次10min,然后在室溫條件下,用4% BSA封閉細(xì)胞30min;
4、按1: 100的比例稀釋?duì)?actin一抗,然后將其放在4℃冰箱中孵育細(xì)胞過夜;
5、PBS沖洗細(xì)胞3次,每次10min,按1:150的比例稀釋抗α-actin的二抗, 37℃條件下放置1h;
6、用PBS沖洗3次,每次10min,最后在倒置熒光顯微鏡下觀察圖像并拍照。
操作規(guī)程
1、在96孔板加入細(xì)胞100μL/孔,通常細(xì)胞增殖實(shí)驗(yàn)每孔加入100微升2000個(gè)細(xì)胞,細(xì)胞毒性實(shí)驗(yàn)每孔加入100微升5000~10000個(gè)細(xì)胞(具體每孔所用的細(xì)胞的數(shù)目,需根據(jù)細(xì)胞的大小,細(xì)胞增殖速度的快慢等決定)。置37℃ 5%CO2細(xì)胞培養(yǎng)箱培養(yǎng)24小時(shí).
2、.加入適當(dāng)濃度的0~10μL 受試化合物。
3、將96孔板在37℃,含5% CO2空氣及100%濕度的細(xì)胞培養(yǎng)箱中孵育適當(dāng)時(shí)間。
4、將5×MTT 用稀釋液稀釋成1× MTT 溶液。
5、每孔加50μL 1× MTT 溶液,在37℃孵育4小時(shí),使MTT 還原為甲臜。
6、吸出上清液,每孔加150μL DMSO 使甲臜溶解,用平板搖床搖勻。
7、酶標(biāo)儀在570nm 波長(zhǎng)處檢測(cè)每孔的光密度(如無(wú)570nm 濾光片,可以使用560-600nm 的濾光片)。
8、結(jié)果分析
a、細(xì)胞的存活率:將各測(cè)試孔的OD 值減去本底OD 值(*培養(yǎng)基加MTT,無(wú)細(xì)胞)或空白藥物孔OD 值(*培養(yǎng)基加受試藥物的不同稀釋度加MTT,無(wú)細(xì)胞),各重復(fù)孔的OD 值取平均數(shù)±SD。細(xì)胞的存活率以T/C%表示,T 為加藥細(xì)胞的OD 值,C 為對(duì)照細(xì)胞的OD 值。細(xì)胞存活率% =(加藥細(xì)胞OD/對(duì)照細(xì)胞OD)×100
b、求出T/C = 50% 時(shí)的藥物濃度(IC50)及T/C = 10%時(shí)的藥物濃度(IC90)
泛鈣,維生B5英文名稱: Indapamide4號(hào)染色體開放閱讀框51抗體包裝1g
泛鈉(標(biāo)準(zhǔn)品)英文名稱: Indapamide分支GBE1抗體包裝25g
泛昔洛韋(標(biāo)準(zhǔn)品)英文名稱: Iopamidol磷化絲切蛋白抗體包裝5g
泛影(標(biāo)準(zhǔn)品)英文名稱: Iopamidol補(bǔ)體成分5受體1抗體包裝1g
非布索坦(標(biāo)準(zhǔn)品)英文名稱: Loperamide HCl分裂周期2樣蛋白激6抗體包裝250mg
非洛地平(標(biāo)準(zhǔn)品)英文名稱: Loperamide HCl補(bǔ)體C3IP1抗體包裝5g
非洛地平雜質(zhì)Ⅰ(標(biāo)準(zhǔn)品)英文名稱: Ketorolac Tromethamine 磷化周期檢測(cè)點(diǎn)激2抗體包裝500mg
非那西丁(標(biāo)準(zhǔn)品)英文名稱: Ketorolac Tromethamine 周期依賴性激11抗體包裝1g
非諾貝特雜質(zhì)Ⅰ(標(biāo)準(zhǔn)品)英文名稱: Lansoprazole 周期依賴性激10包裝5g
非諾貝特雜質(zhì)Ⅱ(標(biāo)準(zhǔn)品)英文名稱: Lansoprazole 8號(hào)染色體開放閱讀框86抗體包裝100g
非諾洛芬鈣(標(biāo)準(zhǔn)品)英文名稱: L base磷化分裂周期蛋白25B抗體包裝10g
非普拉宗(標(biāo)準(zhǔn)品)英文名稱: Levonorgestrel磷化分裂周期蛋白25B抗體包裝25g
芬達(dá)唑;硫咪唑(標(biāo)準(zhǔn)品)英文名稱: Levonorgestrel磷化半胱蛋白蛋白6抗體包裝25MG
芬布芬(標(biāo)準(zhǔn)品)英文名稱: Levosulpiride9號(hào)染色體開放閱讀框172抗體包裝100g
酚磺乙(標(biāo)準(zhǔn)品)英文名稱: Levosulpiride磷化P27抗體/周期依賴激抑制劑包裝25g
: AS3.16資源名稱: 曲霉 質(zhì)量規(guī)格:>98.0%,JP2002胸苷合成試劑盒五味子酚;Schisanhenol
糖霉菌Glycomyces│sp. 質(zhì)量規(guī)格:HPLC>98%,標(biāo)準(zhǔn)品性激結(jié)合球蛋白試劑盒衛(wèi)矛;Dulcitol
聚生殼菌Botryosphaeria│ribis Grossenb. & Duggar 質(zhì)量規(guī)格:>98.5%性別決定區(qū)Y蛋白試劑盒1,2,3,4,6-O-五沒食子酰葡萄
細(xì)胞增殖與毒性檢測(cè)試劑盒(CCK-8)大腸埃希 3-氯磺?;?4-氟沙眼衣原體IgMElisa
玉米黑粉 4-氯苯磺酰脲肝Elisa
香菇Cr04 β-內(nèi)啡肽,鼠前腦源性神經(jīng)營(yíng)養(yǎng)因子Elisa
大腸埃希氏桿 2,5-二氟苯皰疹病-8型感染IgG抗體Elisa
尖孢鐮孢 甲基烯酸十二氟庚酯皰疹病-8型感染IgM抗體Elisa
彩色豆馬勃 2-(甲硫基)乙酰單純皰疹病1IgG抗體Elisa
熒光假單胞 Cys-Gly, oxidized單純皰疹病1IgM抗體Elisa
尖孢鐮刀 1-(4-氟苯基)哌EB病IgG抗體Elisa
扁柄側(cè)耳 2-氯-4-氟巨病IgM抗體Elisa
紅曲紅曲 2-氯-5-氟單純皰疹病2IgG抗體Elisa
褐囊蜜環(huán) 4-氨基-3-氟吡啶人類嗜T病抗體Elisa
釀酒酵母 Nefiracetam型肝炎病抗體Elisa
枯草芽孢桿 4-羥基吡啶-2-羧酸核糖核酸HElisa
黑曲霉 2-羥基甲酯EB病抗體Elisa
釀酒酵母 2-苯氧基血吸蟲抗體Elisa