產(chǎn)品屬性:
中文名稱:CRAC channels抑制劑(YM-58483)
英文名稱:YM-58483
產(chǎn)品規(guī)格:1mL(10mM)|2mg|5mg|10mg|25mg|50mg|100mg
發(fā)貨周期:1~3天
公司產(chǎn)品僅用于科研
商品介紹:
YM-58483是一種有效的CRAC channels抑制劑,能夠抑制Ca2+信號。 注:本品僅可用于科研實驗,嚴(yán)禁用于臨床醫(yī)療及其他用途! CAS號:223499-30-7 別名:BTP2 純度:98.31% 分子量:421.32 儲存條件:-20℃,有效期2年,溶入溶劑后-20℃請盡量在一個月內(nèi)使用。 |
細(xì)胞生物學(xué)研究有以下幾個方面:
細(xì)胞生物學(xué)的研究內(nèi)容十分廣泛,主要包括:
①細(xì)胞核、染色體以及基因表達(dá)的研究;
②生物膜與細(xì)胞器的研究;
③細(xì)胞骨架體系的研究;
④細(xì)胞增殖及其調(diào)控;
⑤細(xì)胞分化及其調(diào)控;
⑥細(xì)胞的衰老與編程性死亡(凋亡);
⑦細(xì)胞的起源與進(jìn)化;
⑧細(xì)胞工程.
實驗報告:
一、分離與培養(yǎng):
1、無菌條件下,取出1-3d 齡SD大鼠心房組織,然后用PBS將此組織塊清洗2次,最后將1mm3左右大??;
2、往組織塊中加入4 mL酶消化液(0.1% 和0.1% I型膠原酶),混懸10s,置37℃條件下消化10min,之后用滴管吹打制成單細(xì)胞懸液,自然沉淀并收集上清,用含10% FBS培養(yǎng)基終止消化后4℃放置;
3、剩下的組織再加入3~4mL酶消化液,混懸10s,置37℃消化10 min后,按上述方法收集上清并終止消化后4℃放置,重復(fù)此步驟2-3次,直至組織*被消化;
4、用200目不銹鋼篩網(wǎng)過濾細(xì)胞消化液,1200r/min 離心10min,棄去上清,沉淀細(xì)胞用含有10% FBS DMEM/F12培養(yǎng)基混懸,接種于25cm2培養(yǎng)瓶,放置于37℃ ,5%CO2 培養(yǎng)箱中培養(yǎng);
5、差速貼壁1h后,吸出培養(yǎng)基,按實驗需要接種于6孔板中繼續(xù)培養(yǎng);
二、免疫熒光鑒定:
1、待心房肌細(xì)胞生長至80%融合時,棄去培養(yǎng)基,用溫育的PBS沖洗細(xì)胞2次,每次10min,然后用4%多聚甲醛在室溫條件下固定細(xì)胞15min;
2、PBS沖洗細(xì)胞2次,每次10min,然后在4℃條件下,用0.1%Triton X-100透膜15min;
3、PBS沖洗細(xì)胞2次,每次10min,然后在室溫條件下,用4% BSA封閉細(xì)胞30min;
4、按1: 100的比例稀釋α-actin一抗,然后將其放在4℃冰箱中孵育細(xì)胞過夜;
5、PBS沖洗細(xì)胞3次,每次10min,按1:150的比例稀釋抗α-actin的二抗, 37℃條件下放置1h;
6、用PBS沖洗3次,每次10min,最后在倒置熒光顯微鏡下觀察圖像并拍照。
大腸埃希氏菌自噬相關(guān)蛋白7抗體Human HLA-DQB2(HLA class II histocompatibility antigen, DQ beta 2 chain) ELISA Kit小鼠胱天蛋白9(Casp-9)免疫試劑盒
巨大芽孢桿菌炭疽受體2抗體Human HLA-F ELISA Kit小鼠胱天蛋白7(Casp-7)免疫試劑盒
韓芝自噬相關(guān)蛋白4C抗體Human HIP14/ZDHHC17 ELISA Kit小鼠胱天蛋白5(CASP-5)免疫試劑盒
植物乳桿菌自噬蛋白5/凋亡的特異性蛋白抗體Human HIRIP3 ELISA Kit小鼠胱天蛋白3(Casp-3)免疫試劑盒
淡紫擬青霉芳基硫酯A抗體Human hIST1 ELISA Kit小鼠胱天蛋白10(CASP-10)免疫試劑盒
麥芽糖假絲酵母擬南芥ACA11抗體Human HLTF ELISA Kit小鼠骨粘連蛋白(ON)免疫試劑盒
莖點霉屬AHA3抗體(擬南芥)Human HLX ELISA Kit小鼠骨形成蛋白6(BMP-6)免疫試劑盒
香菇磷化鈉ATP蛋白a1抗體Human HIST1H1T ELISA Kit小鼠骨形成蛋白(BMPs)免疫試劑盒
蘇云金芽孢桿菌殺蟲亞種磷化凋亡信號調(diào)節(jié)激1抗體Human HMBOX1 ELISA Kit小鼠骨涎蛋白(BSP)免疫試劑盒
釀酒酵母中性膽固酯水解1抗體Human HIST1H2AC ELISA Kit小鼠骨特異性堿性磷B(ALP-B)免疫試劑盒
豌豆根瘤菌人星形膠質(zhì)抗體Human HS3ST1 ELISA Kit小鼠骨特性堿性磷C端肽免疫試劑盒
假黃色單胞菌縮A抗體Human HS1BP3 ELISA Kit小鼠骨特性堿性磷(BALP)免疫試劑盒
毛木耳膜粘連蛋白6抗體Human HS2ST1 ELISA Kit小鼠骨橋(OPN)免疫試劑盒
堆形艾美耳球蟲β淀粉樣肽(25-35)抗體Human HSBP1 ELISA Kit小鼠骨膠原交聯(lián)(Cr)免疫試劑盒
乳片球菌血管緊張I抗體Human HSD11B2 ELISA Kit小鼠骨鈣/骨谷蛋白(OT/BGP)免疫試劑盒
分枝節(jié)桿菌腎上腺髓質(zhì)抗體(N端20肽)Human HSCB ELISA Kit小鼠骨成型蛋白受體Ⅱ(BMPR-Ⅱ)免疫試劑盒
青霉Penicillium│sp. 質(zhì)量規(guī)格:BC Grade癌抗原27-29試劑盒石蒜堿
球孢白僵菌Beauveria│bassiana (Bals.-Criv.) Vuill. 質(zhì)量規(guī)格:>95%,植物激級癌基因蛋白質(zhì)p190/bcr-abl ELISA Kit山豆根色滿二氫黃Ⅰ
青銅小單孢菌Micromonospora│chalcea 質(zhì)量規(guī)格:分子生物學(xué)級阿立新A試劑盒山椒子烯
CRAC channels抑制劑(YM-58483)升麻(標(biāo)準(zhǔn)品)英文名稱: (R)-(+)-Corypalmine髓磷酯髓鞘蛋白1抗體包裝5g
升麻苷(標(biāo)準(zhǔn)品)英文名稱: D-Pinitol巨噬克激因子抗體包裝1g
升麻-3-O-α-L-拉伯糖苷(標(biāo)準(zhǔn)品)英文名稱: Echinacoside膜相關(guān)環(huán)指蛋白4抗體包裝250mg
生脈提取物(標(biāo)準(zhǔn)品)英文名稱: Usnic acid肌球蛋白輕鏈激抗體包裝1g
勝紅薊(標(biāo)準(zhǔn)品)英文名稱: Jujuboside A單紡錘體蛋白激1抗體包裝25g
圣草次苷(標(biāo)準(zhǔn)品)英文名稱: Jujuboside B有絲分裂阻滯缺陷2樣蛋白2抗體包裝5g
圣草酚(標(biāo)準(zhǔn)品)英文名稱: Amentoflavone單氧化B抗體包裝100g
蓍草(標(biāo)準(zhǔn)品)英文名稱: Hupehenine微小染色體維持缺陷蛋白4抗體包裝25g
十七碳酯(標(biāo)準(zhǔn)品)英文名稱: Specnuezhenide自噬微管相關(guān)蛋白輕鏈3抗體包裝500g
石菖蒲(標(biāo)準(zhǔn)品)英文名稱: Gastrodin髓鞘基因調(diào)控因子抗體包裝5ml
石吊蘭(標(biāo)準(zhǔn)品)英文名稱: Gastrodin肌球蛋白結(jié)合蛋白C抗體包裝1g
石吊蘭英文名稱: Stevioside磷化絲裂原活化蛋白激磷1抗體包裝25g
石斛酚(標(biāo)準(zhǔn)品)英文名稱: Tubeimoside I促代謝型谷受體2抗體包裝5g
石斛堿(標(biāo)準(zhǔn)品)英文名稱: Pseudolaric Acid B代謝型谷受體-3抗體包裝1g
石見穿(標(biāo)準(zhǔn)品)英文名稱: Alantolactone巨噬炎癥蛋白2( GROβ)抗體包裝5g
操作規(guī)程
1、在96孔板加入細(xì)胞100μL/孔,通常細(xì)胞增殖實驗每孔加入100微升2000個細(xì)胞,細(xì)胞毒性實驗每孔加入100微升5000~10000個細(xì)胞(具體每孔所用的細(xì)胞的數(shù)目,需根據(jù)細(xì)胞的大小,細(xì)胞增殖速度的快慢等決定)。置37℃ 5%CO2細(xì)胞培養(yǎng)箱培養(yǎng)24小時.
2、.加入適當(dāng)濃度的0~10μL 受試化合物。
3、將96孔板在37℃,含5% CO2空氣及100%濕度的細(xì)胞培養(yǎng)箱中孵育適當(dāng)時間。
4、將5×MTT 用稀釋液稀釋成1× MTT 溶液。
5、每孔加50μL 1× MTT 溶液,在37℃孵育4小時,使MTT 還原為甲臜。
6、吸出上清液,每孔加150μL DMSO 使甲臜溶解,用平板搖床搖勻。
7、酶標(biāo)儀在570nm 波長處檢測每孔的光密度(如無570nm 濾光片,可以使用560-600nm 的濾光片)。
8、結(jié)果分析
a、細(xì)胞的存活率:將各測試孔的OD 值減去本底OD 值(*培養(yǎng)基加MTT,無細(xì)胞)或空白藥物孔OD 值(*培養(yǎng)基加受試藥物的不同稀釋度加MTT,無細(xì)胞),各重復(fù)孔的OD 值取平均數(shù)±SD。細(xì)胞的存活率以T/C%表示,T 為加藥細(xì)胞的OD 值,C 為對照細(xì)胞的OD 值。細(xì)胞存活率% =(加藥細(xì)胞OD/對照細(xì)胞OD)×100
b、求出T/C = 50% 時的藥物濃度(IC50)及T/C = 10%時的藥物濃度(IC90)