商品介紹:
BMS-303141是具有高效性和細(xì)胞可滲透性的ACL抑制劑,IC50值為0.13μM。 注:本品僅可用于科研實(shí)驗(yàn),嚴(yán)禁用于臨床醫(yī)療及其他用途! CAS號(hào):943962-47-8 純度:98.99% 分子量:424.3 儲(chǔ)存條件:-20℃,有效期2年,溶入溶劑后-20℃請(qǐng)盡量在一個(gè)月內(nèi)使用。 |
以下是細(xì)胞生物學(xué)試劑的詳細(xì)介紹:
操作步驟:
1. 樣品染色
1) 將Binding Buffer(10×)稀釋成1×Binding buffer工作液備用(1ml Binding Buffer(10×)需加入9ml無菌去離子水)。
2) 對(duì)于懸浮細(xì)胞,500-1000g離心5min收集細(xì)胞。
對(duì)于貼壁細(xì)胞,要用不含EDTA的胰酶消化細(xì)胞,胰酶消化時(shí)間不宜過長或過短,最好是在輕輕吹打可以使貼壁細(xì)胞吹打下來時(shí),加入細(xì)胞培養(yǎng)液,將細(xì)胞輕輕吹打下來,轉(zhuǎn)移到離心管內(nèi),500-1000g離心5min收集細(xì)胞。
3) 收集細(xì)胞后,加入預(yù)冷PBS溶液輕搖或用移液器輕柔吹打洗滌,離心收集細(xì)胞,共洗滌兩次。
4) 在細(xì)胞沉淀中加入1×Binding buffer工作液,重懸細(xì)胞,使細(xì)胞濃度達(dá)到1×106 cell/ml。
5) 吸取100μl細(xì)胞懸液(細(xì)胞總數(shù)為1×105 cell)至一新管中,加入5μl Annexin V-FITC和5-10 μl PI,輕輕混勻,室溫避光孵育15min。
2. 樣品檢測(cè)
1) 流式細(xì)胞儀檢測(cè):
染色孵育后,每管加入400μl 1×Binding Buffer工作液,混勻后使用流式細(xì)胞儀檢測(cè)(1小時(shí)內(nèi)檢測(cè))。
建議設(shè)置經(jīng)凋亡誘導(dǎo)的正常細(xì)胞、PI單染和Annexin V-FITC單染3個(gè)對(duì)照組,正常細(xì)胞組可作為熒光補(bǔ)償調(diào)節(jié)去除光譜重疊和設(shè)定十字門的位置。結(jié)果可用CellQuest等軟件進(jìn)行分析,繪制雙色散點(diǎn)圖(two-color dot plot),F(xiàn)ITC為橫坐標(biāo),PI為縱坐標(biāo)。Annexin V-FITC和PI聯(lián)合使用時(shí),活細(xì)胞僅有很低強(qiáng)度的背景熒光,早期凋亡細(xì)胞僅有較強(qiáng)的綠色熒光,晚期凋亡細(xì)胞有綠色和紅色雙重?zé)晒狻?/span>
2) 熒光顯微鏡檢測(cè):
染色孵育后涂片,顯微鏡下觀察。使用熒光顯微鏡上的藍(lán)光和綠光通道分別觀察FITC和PI。被Annexin V-FITC結(jié)合的細(xì)胞顯示漿膜上有綠色光環(huán)。喪失細(xì)胞膜完整性的細(xì)胞,細(xì)胞核顯示紅色,膜上有綠色光環(huán)。
公司產(chǎn)品僅用于科研細(xì)胞培養(yǎng)操作規(guī)程:
一.培養(yǎng)基及培養(yǎng)凍存條件準(zhǔn)備:
1)準(zhǔn)備RPMI-1640培養(yǎng)基(RPMI-1640:GIBCO),90%;優(yōu)質(zhì)胎牛血清,10%。
2)培養(yǎng)條件: 氣相:空氣,95%;二氧化碳,5%。 溫度:37℃,培養(yǎng)箱濕度為70%-80%。
3)凍存液:90%血清,10%DMSO,現(xiàn)用現(xiàn)配,液氮儲(chǔ)存。
二.細(xì)胞處理:
1)復(fù)蘇細(xì)胞:將含有1mL細(xì)胞懸液的凍存管迅速放入37℃水浴中(水面要低于凍存管蓋部)搖晃解凍,移入事先準(zhǔn)備好的含有4mL培養(yǎng)基的15ml離心管中混合均勻。在1000RPM條件下離心4分鐘,棄去上清液,加入1mL培養(yǎng)基后吹勻。然后將所有細(xì)胞懸液移入含有5ml培養(yǎng)基的培養(yǎng)瓶中培養(yǎng)過夜。第二天換液并檢查細(xì)胞密度。
2)細(xì)胞傳代:如果細(xì)胞密度達(dá)80%-90%,即可進(jìn)行傳代培養(yǎng)。
對(duì)于懸浮細(xì)胞,傳代可參考以下方法:
方法一:收集細(xì)胞,1000RPM,常溫條件下離心5分鐘,棄去上清液,補(bǔ)加1-2mL培養(yǎng)液后吹勻,將細(xì)胞懸液按1:2到1:5的比例分到新的含8ml培養(yǎng)基的新皿中或者瓶中。
蘇云金芽孢桿菌真核翻譯起始因子4G抗體Human LMO2 (Rhombotin-2) ELISA KIT人8異前列腺F2α(8-iso-PGF2a)免疫試劑盒
束狀盤孢*β4整合結(jié)合蛋白抗體Human LPGAT1 (Acyl-CoA:lysophosphatidylglycerol acyltransferase 1) ELISA KIT人8異前列腺(8-iso-PG)免疫試劑盒
白被黑蛋巢食道癌相關(guān)基因4蛋白抗體Human P3H1(Prolyl 3-hydroxylase 1) ELISA Kit人8-異構(gòu)前列腺F2α(8-epi-PGF2α)免疫試劑盒
擬囊體側(cè)耳、(鮑魚菇)紅生成抗體Human LNP (Protein lunapark) ELISA KIT人8羥基脫氧鳥苷(8-OHdG)免疫試劑盒
辣椒枯萎胞漿環(huán)氧化物水解抗體Human KSR1 (Kinase suppressor of Ras 1) ELISA KIT人8-羥基鳥嘌呤DNA糖苷(OGG1)免疫試劑盒
紅大耳雌激受體相關(guān)蛋白3抗體Human LRFN1 (Leucine-rich repeat and fibronectin type III domain-containing protein 1) ELISA KIT人6前列腺F1a(6-keto-PGF1a)免疫試劑盒
釀酒酵母雌激相關(guān)受體β抗體Human KREMEN1 (Kremen protein 1) ELISA KIT人6前列腺(6-K-PG)免疫試劑盒
紅色瑞恩氏酵母上皮膜蛋白2抗體Human KMO(Kynurenine 3-monooxygenase) ELISA Kit人6-羥多巴(6-OHDA)免疫試劑盒
雞傷寒沙門氏菌甲基固羥化單加氧1抗體Human LRRN1 (Leucine-rich repeat neuronal protein 1) ELISA KIT人60S核糖體蛋白L36a-樣(RPL36AL)免疫試劑盒
秦氏蜜環(huán)菌端粒結(jié)合蛋白EST1A抗體Human LRRK1 (Leucine-rich repeat serine/threonine-protein kinase 1) ELISA KIT人60S核糖體蛋白L17(RPL17)免疫試劑盒
丁香假單胞桿菌番茄致病變種*組蛋白賴N-甲基EZH1抗體Human LCT (Lactase-phlorizin hydrolase) ELISA KIT人5-羥色受體6(HTR6)免疫試劑盒
紅硬囊果青霉上皮間質(zhì)相互作用蛋白1抗體Human LACE1 (Lactation elevated protein 1) ELISA KIT人5羥色/血清/血清(5HT/ST)抗體(IgM)免疫試劑盒
枯草芽孢桿菌雌激誘導(dǎo)基因121蛋白抗體Human LRGUK (Leucine-rich repeat and guanylate kinase domain-containing protein) ELISA KIT人5羥色/血清/血清(5HT/ST)抗體(IgG)免疫試劑盒
白假絲酵母內(nèi)皮粘蛋白EMCN抗體Human LYVE1 (Lymphatic vessel endothelial hyaluronic acid receptor 1) ELISA KIT人5羥色/血清/血清(5HT/ST)抗體(IgA)免疫試劑盒
銳齒櫟蛙眼骨架連接質(zhì)膜蛋白抗體Human LST1 (Leukocyte-specific transcript 1 protein) ELISA KIT人5羥色(5-HT)免疫試劑盒
沙阿霉鏈霉菌吞噬運(yùn)動(dòng)蛋白1抗體Human LFNG(Beta-1,3-N-acetylglucosaminyltransferase lunatic fringe) ELISA Kit人5羥基吲哚乙(5-HIAA)免疫試劑盒
平菇Pleurotus│ostreatus (Jacq.) P. Kumm. 質(zhì)量規(guī)格:分析標(biāo)準(zhǔn)品人參皂苷Rk2
釀酒酵母Saccharomyces│cerevisiae 質(zhì)量規(guī)格:分析標(biāo)準(zhǔn)品葫蘆巴堿
: 43510資源名稱: 戈登分枝桿菌 質(zhì)量規(guī)格:10μg/ml,u=5%蘋果
ACL抑制劑(BMS-303141)琥珀舒馬曲普坦(標(biāo)準(zhǔn)品)英文名稱: (S)-Carbidopa腦衰蛋白反應(yīng)調(diào)節(jié)蛋白4抗體包裝25g
琥乙紅霉(標(biāo)準(zhǔn)品)英文名稱: Chlormadinone Acetate卷曲螺旋結(jié)構(gòu)域蛋白87抗體包裝5g
花生四烯(AA)英文名稱: Chlormadinone Acetate卷曲螺旋結(jié)構(gòu)域蛋白92抗體包裝25g
華蟾它靈;華蟾(標(biāo)準(zhǔn)品)英文名稱: Ciprofloxacin HCL卷曲螺旋結(jié)構(gòu)域蛋白CHCHD8抗體包裝5g
華法林(標(biāo)準(zhǔn)品)英文名稱: Ciprofloxacin HCL大腦亮拉鏈結(jié)構(gòu)域蛋白抗體包裝100g
華法林鈉(標(biāo)準(zhǔn)品)英文名稱: Cisatracurium besilate卷曲螺旋結(jié)構(gòu)域蛋白93抗體包裝25g
環(huán)吡司; 環(huán)吡(標(biāo)準(zhǔn)品)英文名稱: Cortisone 21-acetate卷曲螺旋結(jié)構(gòu)域蛋白96抗體包裝5g
環(huán)吡;環(huán)匹羅司(標(biāo)準(zhǔn)品)英文名稱: Cortisone 21-acetate卷曲螺旋結(jié)構(gòu)域蛋白CHCHD5抗體包裝1g
環(huán)扁桃酯(標(biāo)準(zhǔn)品)英文名稱: Dantrolene sodium 卷曲螺旋結(jié)構(gòu)域蛋白CHCHD6抗體包裝5g
環(huán);滅蠅(標(biāo)準(zhǔn)品)英文名稱: Dantrolene sodium 卷曲螺旋結(jié)構(gòu)域蛋白CHCHD6抗體包裝1g
環(huán)沙星(標(biāo)準(zhǔn)品)英文名稱: D-Calcium Panthotenate(Vitamin B5)周期通道和神經(jīng)分化蛋白1抗體包裝5g
環(huán)磷腺苷,環(huán)腺苷(標(biāo)準(zhǔn)品)英文名稱: Desloratadine凝集蛋白家族10抗體(肝)包裝1g
環(huán)戊噻(標(biāo)準(zhǔn)品)英文名稱: Desloratadine銅代謝結(jié)構(gòu)域蛋白7抗體包裝5g
磺吡啶(標(biāo)準(zhǔn)品)英文名稱: Dexamethasone Sodium PhosphateCOMM結(jié)構(gòu)域蛋白4抗體包裝1g
磺醋酰鈉 SA-NA(標(biāo)準(zhǔn)品)英文名稱: Dexamethasone Sodium PhosphateCordon bleu蛋白樣1抗體包裝100ml