商品介紹:
溴脫氧尿苷(5-溴代-2'-脫氧尿苷, BrdU) 是一種合成的核苷酸即胸苷的類似物。BrdU 通常被用于檢測(cè)活組織中再生的細(xì)胞。BrdU 可以摻合到復(fù)制細(xì)胞中新的合成DNA 中(在細(xì)胞周期S 期),在DNA 復(fù)制可代替胸苷。利用抗BrdU 的特異性抗體便可以用于檢測(cè)這個(gè)插入的化學(xué)品,從而檢測(cè)出細(xì)胞是否在復(fù)制其DNA。本試劑盒細(xì)胞增殖檢測(cè)通過(guò)檢測(cè)BrdU 的摻合程度,監(jiān)測(cè)細(xì)胞健康程度,估量DNA 合成從而監(jiān)測(cè)細(xì)胞分裂。 |
產(chǎn)品屬性:
中文名稱:Brdu細(xì)胞增殖檢測(cè)試劑盒(IHC法)
英文名稱:BrdU cell proliferation Detection Kit(IHC)
產(chǎn)品規(guī)格:50T
發(fā)貨周期:1~3天
公司產(chǎn)品僅用于科研
細(xì)胞生物學(xué)研究有以下幾個(gè)方面:
細(xì)胞生物學(xué)的研究?jī)?nèi)容十分廣泛,主要包括:
①細(xì)胞核、染色體以及基因表達(dá)的研究;
②生物膜與細(xì)胞器的研究;
③細(xì)胞骨架體系的研究;
④細(xì)胞增殖及其調(diào)控;
⑤細(xì)胞分化及其調(diào)控;
⑥細(xì)胞的衰老與編程性死亡(凋亡);
⑦細(xì)胞的起源與進(jìn)化;
⑧細(xì)胞工程.
實(shí)驗(yàn)報(bào)告:
一、分離與培養(yǎng):
1、無(wú)菌條件下,取出1-3d 齡SD大鼠心房組織,然后用PBS將此組織塊清洗2次,最后將1mm3左右大??;
2、往組織塊中加入4 mL酶消化液(0.1% 和0.1% I型膠原酶),混懸10s,置37℃條件下消化10min,之后用滴管吹打制成單細(xì)胞懸液,自然沉淀并收集上清,用含10% FBS培養(yǎng)基終止消化后4℃放置;
3、剩下的組織再加入3~4mL酶消化液,混懸10s,置37℃消化10 min后,按上述方法收集上清并終止消化后4℃放置,重復(fù)此步驟2-3次,直至組織*被消化;
4、用200目不銹鋼篩網(wǎng)過(guò)濾細(xì)胞消化液,1200r/min 離心10min,棄去上清,沉淀細(xì)胞用含有10% FBS DMEM/F12培養(yǎng)基混懸,接種于25cm2培養(yǎng)瓶,放置于37℃ ,5%CO2 培養(yǎng)箱中培養(yǎng);
5、差速貼壁1h后,吸出培養(yǎng)基,按實(shí)驗(yàn)需要接種于6孔板中繼續(xù)培養(yǎng);
二、免疫熒光鑒定:
1、待心房肌細(xì)胞生長(zhǎng)至80%融合時(shí),棄去培養(yǎng)基,用溫育的PBS沖洗細(xì)胞2次,每次10min,然后用4%多聚甲醛在室溫條件下固定細(xì)胞15min;
2、PBS沖洗細(xì)胞2次,每次10min,然后在4℃條件下,用0.1%Triton X-100透膜15min;
3、PBS沖洗細(xì)胞2次,每次10min,然后在室溫條件下,用4% BSA封閉細(xì)胞30min;
4、按1: 100的比例稀釋?duì)?actin一抗,然后將其放在4℃冰箱中孵育細(xì)胞過(guò)夜;
5、PBS沖洗細(xì)胞3次,每次10min,按1:150的比例稀釋抗α-actin的二抗, 37℃條件下放置1h;
6、用PBS沖洗3次,每次10min,最后在倒置熒光顯微鏡下觀察圖像并拍照。
操作規(guī)程
1、在96孔板加入細(xì)胞100μL/孔,通常細(xì)胞增殖實(shí)驗(yàn)每孔加入100微升2000個(gè)細(xì)胞,細(xì)胞毒性實(shí)驗(yàn)每孔加入100微升5000~10000個(gè)細(xì)胞(具體每孔所用的細(xì)胞的數(shù)目,需根據(jù)細(xì)胞的大小,細(xì)胞增殖速度的快慢等決定)。置37℃ 5%CO2細(xì)胞培養(yǎng)箱培養(yǎng)24小時(shí).
2、.加入適當(dāng)濃度的0~10μL 受試化合物。
3、將96孔板在37℃,含5% CO2空氣及100%濕度的細(xì)胞培養(yǎng)箱中孵育適當(dāng)時(shí)間。
4、將5×MTT 用稀釋液稀釋成1× MTT 溶液。
5、每孔加50μL 1× MTT 溶液,在37℃孵育4小時(shí),使MTT 還原為甲臜。
6、吸出上清液,每孔加150μL DMSO 使甲臜溶解,用平板搖床搖勻。
7、酶標(biāo)儀在570nm 波長(zhǎng)處檢測(cè)每孔的光密度(如無(wú)570nm 濾光片,可以使用560-600nm 的濾光片)。
8、結(jié)果分析
a、細(xì)胞的存活率:將各測(cè)試孔的OD 值減去本底OD 值(*培養(yǎng)基加MTT,無(wú)細(xì)胞)或空白藥物孔OD 值(*培養(yǎng)基加受試藥物的不同稀釋度加MTT,無(wú)細(xì)胞),各重復(fù)孔的OD 值取平均數(shù)±SD。細(xì)胞的存活率以T/C%表示,T 為加藥細(xì)胞的OD 值,C 為對(duì)照細(xì)胞的OD 值。細(xì)胞存活率% =(加藥細(xì)胞OD/對(duì)照細(xì)胞OD)×100
b、求出T/C = 50% 時(shí)的藥物濃度(IC50)及T/C = 10%時(shí)的藥物濃度(IC90)
二肽基肽-4(DPP4)英文名稱:DPP4 ELISA KitEBV立即早期基因BRLF1抗體包裝1g
二肽基肽4(DPP4)英文名稱:DPP4 ELISA Kit腦表達(dá)X連鎖蛋白4抗體包裝1g
二級(jí)淋巴組織趨化因子(SLC/CCL21)英文名稱:SLC/CCL21 ELISA KitB淋巴新型蛋白1抗體包裝5g
凋亡相關(guān)因子(Fas/Apo-1/CD95)英文名稱:Fas/Apo-1/CD95 ELISA Kit核突觸蛋白β抗體包裝1g
凋亡相關(guān)因子(FAS)英文名稱:FAS ELISA KitBTRC2蛋白抗體包裝5g
單核細(xì)胞趨化蛋白1(MCP-1/CCL2/MCAF)英文名稱:MCP-1/CCL2/MCAF ELISA KitBEND3蛋白抗體包裝1g
次級(jí)淋巴組織趨化因子6Ckine(CCL21)英文名稱:CCL21 ELISA KitBEND4蛋白抗體包裝25g
層粘連蛋白(LN)英文名稱:LN ELISA KitBEND6蛋白抗體包裝5g
層粘連蛋白(Laminin)英文名稱:Laminin ELISA Kit胎兒阿茲海默病抗原/核小體重塑因子抗體包裝100MG
層連蛋白(Laminin)英文名稱:Laminin ELISA Kit巴爾得-別德?tīng)柧C合征相關(guān)蛋白2抗體包裝25g
半乳糖凝集3(Galectin-3)英文名稱:Galectin-3 ELISA Kit巴爾得-別德?tīng)柧C合征相關(guān)蛋白5抗體包裝5g
半乳糖凝集3(Galectin3)英文名稱:Galectin3 ELISA Kit巴爾得-別德?tīng)柧C合征相關(guān)蛋白4抗體包裝25MG
半乳糖凝集1(Galectin-1)英文名稱:Galectin-1 ELISA Kit巴爾得-別德?tīng)柧C合征相關(guān)蛋白7抗體包裝250g
半乳凝3(GAL-3)英文名稱:GAL-3 ELISA Kit巴爾得-別德?tīng)柧C合征相關(guān)蛋白9抗體包裝50g
半乳凝3(GAL3)英文名稱:GAL3 ELISA Kit巴爾得-別德?tīng)柧C合征相關(guān)蛋白10抗體包裝1g
銅轉(zhuǎn)運(yùn)蛋白質(zhì)β鏈抗體干擾α21(IFNα21)L (GW572016) 是一種 ErbB-2 和 EGFR 酪激結(jié)構(gòu)域的有效抑制劑,對(duì)純化的 EGFR 和 ErbB-2 的 IC50
Brdu細(xì)胞增殖檢測(cè)試劑盒(IHC法)釀酒酵母 N-芐氧羰基-4-氨基環(huán)己尿激酶檢測(cè)試劑盒
香菇 (芐氧羰基亞甲基)三苯基膦尿激酶型纖溶酶原激活物檢測(cè)試劑盒
異常威克漢姆酵母 3-溴芐脒鹽酸鹽尿激酶型纖溶酶原激活物受體檢測(cè)試劑盒
產(chǎn)色鏈霉 鹽酸奧昔布寧尿羥脯氨酸檢測(cè)試劑盒
地中海擬無(wú)枝酸 α-甲基-尿素氮檢測(cè)試劑盒
柔薄迷孔 乙酸香茅酯尿酸檢測(cè)試劑盒
齒被栓 氟立班絲氨尿調(diào)蛋白檢測(cè)試劑盒
出芽短梗霉 2-氨基-4-溴-5-氯尿微量白蛋白檢測(cè)試劑盒
枯草芽孢桿 (2E)-3-(6-氨基-3-吡啶基)-2-烯酸檸檬酸合酶檢測(cè)試劑盒
小孢根霉塊狀變種 瑞替加濱凝聚素檢測(cè)試劑盒
中慢生華癸根瘤 N-乙酰-D-亮氨酸凝溶膠蛋白檢測(cè)試劑盒
鈉線屬 4,6-二氯-5-(2-甲氧基苯氧基)-2,2-二嘧啶凝血酶檢測(cè)試劑盒
產(chǎn)氨短桿 (R)-3-甲酸乙酯-L-鹽凝血酶抗凝血酶復(fù)合物檢測(cè)試劑盒
弗吉尼亞鏈霉 N-[6-氯-5-(2-甲氧基苯氧基)[2,2'-二嘧啶]-4-基]-4-叔丁基苯磺酰凝血酶原檢測(cè)試劑盒
pLKO.1-puro 4-溴-2-基噻唑凝血酶原片段F1+2檢測(cè)試劑盒