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上海谷研實(shí)業(yè)有限公司 |
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15026555973 |
| 參考價(jià) | 面議 |
更新時(shí)間：2022-04-21 12:10:06瀏覽次數(shù)：330
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| 供貨周期 | 現(xiàn)貨 | 規(guī)格 | 20T |
|---|---|---|---|
| 貨號(hào) | GOY-01X9627 | 應(yīng)用領(lǐng)域 | 化工 |
| 主要用途 | 公司產(chǎn)品僅供科研 | 英文名稱 | Annexin V-APC/7-AAD Apoptosis Detection Kit |
公司產(chǎn)品僅用于科研
細(xì)胞生物學(xué)研究有以下幾個(gè)方面：
細(xì)胞生物學(xué)的研究?jī)?nèi)容十分廣泛,主要包括：
①細(xì)胞核、染色體以及基因表達(dá)的研究；
②生物膜與細(xì)胞器的研究；
③細(xì)胞骨架體系的研究；
④細(xì)胞增殖及其調(diào)控；
⑤細(xì)胞分化及其調(diào)控；
⑥細(xì)胞的衰老與編程性死亡(凋亡)；
⑦細(xì)胞的起源與進(jìn)化；
⑧細(xì)胞工程.
產(chǎn)品屬性：
中文名稱：AnnexinV-APC/7-AAD細(xì)胞凋亡檢測(cè)試劑盒
英文名稱：Annexin V-APC/7-AAD Apoptosis Detection Kit
產(chǎn)品規(guī)格：20T
發(fā)貨周期：1～3天
商品介紹：
Annexin V-APC/7-AAD細(xì)胞凋亡檢測(cè)試劑盒是用熒光素APC標(biāo)記的Annexin V作為探針，來(lái)檢測(cè)細(xì)胞早期凋亡的發(fā)生，可用流式細(xì)胞儀或其他熒光檢測(cè)設(shè)備進(jìn)行檢測(cè)。 其檢測(cè)原理為：在正常的活細(xì)胞中，磷脂酰絲氨酸（phosphotidylserine，PS）位于細(xì)胞膜的內(nèi)側(cè)，但在早期凋亡的細(xì)胞中，PS從細(xì)胞膜的內(nèi)側(cè)翻轉(zhuǎn)到細(xì)胞膜的表面，暴露在細(xì)胞外環(huán)境中。Annexin-V（膜聯(lián)蛋白-V）是一種分子量為35-36KD的Ca2+ 依賴性磷脂結(jié)合蛋白，能與PS高親和力結(jié)合。可通過(guò)細(xì)胞外側(cè)暴露的磷脂酰絲氨酸與凋亡早期細(xì)胞的胞膜結(jié)合。 另外，本試劑盒中提供的7-AAD可用來(lái)區(qū)分存活的早期細(xì)胞和壞死或晚期凋亡細(xì)胞。7-AAD是一種核酸染料，同PI有著相似的熒光特性，但其發(fā)射光譜較PI窄，對(duì)其他檢測(cè)通道的干擾更小，在多色熒光分析中是PI的佳替代品，可與Annexin V聯(lián)合使用。該染料不能透過(guò)正常細(xì)胞或早期凋亡細(xì)胞的完整的細(xì)胞膜，但可穿透晚期凋亡細(xì)胞或者壞死細(xì)胞并與其內(nèi)的DNA結(jié)合。因此將Annexin V-APC與7-AAD聯(lián)合使用時(shí)，7-AAD則被排除在活細(xì)胞（Annexin V-/7-AAD-）和早期凋亡細(xì)胞（Annexin V+/7-AAD-）之外，而晚期凋亡細(xì)胞和壞死細(xì)胞同時(shí)被Annexin V-APC和7-AAD結(jié)合染色呈現(xiàn)雙陽(yáng)性（Annexin V+/7-AAD+）。 試劑盒組份： 重組人Annexin V/APC*（rh Annexin V/APC）———100μl 7-AAD Viability Staining Solution——————100μl 1×Binding buffer——————————————10ml 儲(chǔ)存條件：4℃，有效期一年。 |
實(shí)驗(yàn)報(bào)告：
一、分離與培養(yǎng)：
1、無(wú)菌條件下，取出1-3d 齡SD大鼠心房組織，然后用PBS將此組織塊清洗2次，最后將1mm3左右大?。?/span>
2、往組織塊中加入4 mL酶消化液（0.1% 和0.1% I型膠原酶），混懸10s，置37℃條件下消化10min，之后用滴管吹打制成單細(xì)胞懸液，自然沉淀并收集上清，用含10% FBS培養(yǎng)基終止消化后4℃放置；
3、剩下的組織再加入3～4mL酶消化液，混懸10s，置37℃消化10 min后，按上述方法收集上清并終止消化后4℃放置，重復(fù)此步驟2-3次，直至組織*被消化；
4、用200目不銹鋼篩網(wǎng)過(guò)濾細(xì)胞消化液，1200r/min 離心10min，棄去上清，沉淀細(xì)胞用含有10％ FBS DMEM/F12培養(yǎng)基混懸，接種于25cm2培養(yǎng)瓶，放置于37℃ ，5％CO2 培養(yǎng)箱中培養(yǎng)；
5、差速貼壁1h后，吸出培養(yǎng)基，按實(shí)驗(yàn)需要接種于6孔板中繼續(xù)培養(yǎng)；
二、免疫熒光鑒定：
1、待心房肌細(xì)胞生長(zhǎng)至80%融合時(shí)，棄去培養(yǎng)基，用溫育的PBS沖洗細(xì)胞2次，每次10min，然后用4%多聚甲醛在室溫條件下固定細(xì)胞15min；
2、PBS沖洗細(xì)胞2次，每次10min，然后在4℃條件下，用0.1％Triton X-100透膜15min；
3、PBS沖洗細(xì)胞2次，每次10min，然后在室溫條件下，用4% BSA封閉細(xì)胞30min；
4、按1: 100的比例稀釋?duì)?actin一抗，然后將其放在4℃冰箱中孵育細(xì)胞過(guò)夜；
5、PBS沖洗細(xì)胞3次，每次10min，按1：150的比例稀釋抗α-actin的二抗， 37℃條件下放置1h；
6、用PBS沖洗3次，每次10min，最后在倒置熒光顯微鏡下觀察圖像并拍照。
操作規(guī)程
1、在96孔板加入細(xì)胞100μL/孔，通常細(xì)胞增殖實(shí)驗(yàn)每孔加入100微升2000個(gè)細(xì)胞，細(xì)胞毒性實(shí)驗(yàn)每孔加入100微升5000～10000個(gè)細(xì)胞（具體每孔所用的細(xì)胞的數(shù)目，需根據(jù)細(xì)胞的大小，細(xì)胞增殖速度的快慢等決定）。置37℃ 5%CO2細(xì)胞培養(yǎng)箱培養(yǎng)24小時(shí).
2、.加入適當(dāng)濃度的0～10μL 受試化合物。
3、將96孔板在37℃，含5% CO2空氣及100%濕度的細(xì)胞培養(yǎng)箱中孵育適當(dāng)時(shí)間。
4、將5×MTT 用稀釋液稀釋成1× MTT 溶液。
5、每孔加50μL 1× MTT 溶液，在37℃孵育4小時(shí)，使MTT 還原為甲臜。
6、吸出上清液，每孔加150μL DMSO 使甲臜溶解，用平板搖床搖勻。
7、酶標(biāo)儀在570nm 波長(zhǎng)處檢測(cè)每孔的光密度（如無(wú)570nm 濾光片，可以使用560-600nm 的濾光片）。
8、結(jié)果分析
a、細(xì)胞的存活率：將各測(cè)試孔的OD 值減去本底OD 值（*培養(yǎng)基加MTT，無(wú)細(xì)胞）或空白藥物孔OD 值（*培養(yǎng)基加受試藥物的不同稀釋度加MTT，無(wú)細(xì)胞），各重復(fù)孔的OD 值取平均數(shù)±SD。細(xì)胞的存活率以T/C%表示，T 為加藥細(xì)胞的OD 值，C 為對(duì)照細(xì)胞的OD 值。細(xì)胞存活率% =（加藥細(xì)胞OD/對(duì)照細(xì)胞OD）×100
b、求出T/C = 50% 時(shí)的藥物濃度(IC50)及T/C = 10%時(shí)的藥物濃度(IC90)
乳腺癌易感蛋白2(BRCA2)英文名稱：BRCA2 ELISA Kit分裂周期樣激2抗體包裝25g
乳鐵傳遞蛋白(LTF)英文名稱：LTF ELISA Kit分裂周期樣激3抗體包裝5g
乳脫氫B(LDHB)英文名稱：LDHB ELISA Kit17號(hào)染色體開(kāi)放閱讀框49抗體包裝1g
乳過(guò)氧化物(LPO)英文名稱：LPO ELISA Kit17號(hào)染色體開(kāi)放閱讀框53抗體包裝25g
肉毒堿棕櫚?；D(zhuǎn)移1A(CPT1A)英文名稱：CPT1A ELISA Kit17號(hào)染色體開(kāi)放閱讀框57抗體包裝5g
肉毒堿乙酰轉(zhuǎn)移(CRAT)英文名稱：CRAT ELISA Kit17號(hào)染色體開(kāi)放閱讀框64抗體包裝1g
融合蛋白(FUS)英文名稱：FUS ELISA Kit17號(hào)染色體開(kāi)放閱讀框66抗體包裝250mg
溶質(zhì)載體家族30成員7(SLC30A7)英文名稱：SLC30A7 ELISA Kit17號(hào)染色體開(kāi)放閱讀框74抗體包裝1g
溶質(zhì)載體家族30成員6(SLC30A6)英文名稱：SLC30A6 ELISA Kit17號(hào)染色體開(kāi)放閱讀框75抗體包裝250mg
溶質(zhì)載體家族30成員5(SLC30A5)英文名稱：SLC30A5 ELISA Kit17號(hào)染色體開(kāi)放閱讀框77抗體包裝5g
溶質(zhì)載體家族30成員4(SLC30A4)英文名稱：SLC30A4 ELISA Kit17號(hào)染色體開(kāi)放閱讀框78抗體包裝1g
溶質(zhì)載體家族30成員3(SLC30A3)英文名稱：SLC30A3 ELISA Kit維調(diào)節(jié)核基質(zhì)相關(guān)蛋白抗體包裝5g
溶質(zhì)載體家族30成員10(SLC30A10)英文名稱：SLC30A10 ELISA Kit17號(hào)染色體開(kāi)放閱讀框42抗體包裝1g
溶質(zhì)載體家族30成員1(SLC30A1)英文名稱：SLC30A1 ELISA Kit17號(hào)染色體開(kāi)放閱讀框97抗體包裝250mg
溶血卵磷脂?；D(zhuǎn)移4(LPCAT4)英文名稱：LPCAT4 ELISA Kit貓眼綜合征染色體候選基因1抗體包裝100g
猴頭菌Hericium│erinaceus (Bull.) Pers. 質(zhì)量規(guī)格：HPLC≥98%,標(biāo)準(zhǔn)品轉(zhuǎn)化生長(zhǎng)因子β1試劑盒蔗糖;Sucrose
芽胞桿菌Bacillus│sp. 質(zhì)量規(guī)格：945-1030 ug /mg,二物轉(zhuǎn)化生長(zhǎng)因子α試劑盒正丁基酞;3-n-Butylphath
結(jié)核分枝桿菌Mycobacterium│tuberculosis 質(zhì)量規(guī)格：效價(jià)測(cè)定轉(zhuǎn)谷酰2C多肽試劑盒知母皂苷B;Anemarsaponin
AnnexinV-APC/7-AAD細(xì)胞凋亡檢測(cè)試劑盒多主葡萄殼 3-氯-2-甲氧基砒啶血紅蛋白晚期糖基化終末產(chǎn)物Elisa
枯草芽孢桿 5--2-甲氧基吡啶血紅結(jié)合蛋白Elisa
瓜亡革 5-溴-2-甲氧基-3-硝基砒啶血紅氧合1Elisa
平菇 3-溴-2-甲氧基吡啶血漿α顆粒膜蛋白Elisa
木糖葡糖酸醋桿 鎢酸鈉血漿淀粉樣蛋白PElisa
釀酒酵母 2,6-二氯苯甲血漿抗凝蛋白CElisa
美澳型核果褐腐病 3-溴-2-羥基吡啶血漿抗凝蛋白SElisa
鼠傷寒沙門氏 2-羥基-5-溴吡啶血漿絲氨酸蛋白抑制劑Elisa
殼 溴化鋰水合物血凝樣氧化低密度脂蛋白受體-1Elisa
熱帶假絲酵母 3,5-二氟-4-異氧基血清白蛋白Elisa
枇杷假尾孢褐斑病 4-羥基-6,7-二甲氧基喹啉血清低半乳糖化IgA1Elisa
香菇 間氟苯磺酰血清淀粉樣蛋白AElisa
毛簇木霉 4-氨基-2-氟苯酚鹽酸鹽血清淀粉樣蛋白A1Elisa
解淀粉芽孢桿植物亞種 L-氨酸叔丁酯鹽酸鹽血清鐵Elisa
禽腺病 3,5-二水楊酸血清鐵蛋白Elisa
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